| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 猪流感概述 | 第13-19页 |
| 1.1.1 猪流感的病原学 | 第13-14页 |
| 1.1.2 猪流感病毒的分子生物学 | 第14-16页 |
| 1.1.3 猪流感的流行病学 | 第16-18页 |
| 1.1.4 猪流感疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2 伪狂犬病概述 | 第19-22页 |
| 1.2.1 伪狂犬病的病原学 | 第19页 |
| 1.2.2 伪狂犬病病毒的分子生物学 | 第19-21页 |
| 1.2.3 伪狂犬病的流行病学 | 第21页 |
| 1.2.4 伪狂犬病病毒载体的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 杆状病毒表达系统概述 | 第22-23页 |
| 1.4 初免-加强免疫策略概述 | 第23-25页 |
| 2 研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 3 材料和方法 | 第26-43页 |
| 3.1 材料 | 第26-31页 |
| 3.1.1 毒株、细胞和质粒 | 第26页 |
| 3.1.2 酶、试剂和耗材 | 第26-30页 |
| 3.1.3 引物设计 | 第30-31页 |
| 3.1.4 重要仪器设备及软件 | 第31页 |
| 3.1.5 试验动物及禽胚 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-43页 |
| 3.2.1 SIVHA基因的生物信息学分析 | 第31页 |
| 3.2.2 重组病毒rSMX?TK?gI/gE-optiHA的构建 | 第31-36页 |
| 3.2.3 重组病毒rSMX?TK?gI/gE-optiHA生物学特性研究 | 第36-37页 |
| 3.2.4 重组杆状病毒rAcMPV-HA的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.5 SIVHA蛋白的杆状病毒表达及鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.6 HA蛋白表达、纯化及亚单位疫苗的制备 | 第39页 |
| 3.2.7 两种基因工程疫苗单独及联合免疫方案 | 第39-42页 |
| 3.2.8 数据处理 | 第42-43页 |
| 4 结果与分析 | 第43-59页 |
| 4.1 HA基因的生物信息学分析 | 第43-44页 |
| 4.2 rSMX?TK?gI/gE-optiHA的构建及部分生物学特性研究 | 第44-47页 |
| 4.2.1 转移质粒的构建 | 第44页 |
| 4.2.2 rSMX?TK?gI/gE-optiHA的构建及鉴定 | 第44-46页 |
| 4.2.3 rSMX?TK?gI/gE-optiHA的部分生物学特性 | 第46-47页 |
| 4.3 SIVHA蛋白的杆状病毒表达及亚单位疫苗的制备 | 第47-53页 |
| 4.3.1 重组杆状病毒rAcMPV-HA的构建 | 第47-50页 |
| 4.3.2 SIVHA蛋白的表达鉴定 | 第50-52页 |
| 4.3.3 SIVHA蛋白的表达纯化及亚单位疫苗的制备 | 第52-53页 |
| 4.4 两种疫苗单独及联合免疫保护力研究 | 第53-59页 |
| 4.4.1 免疫后小鼠的体液免疫 | 第53-56页 |
| 4.4.2 IFN-γ分泌量检测 | 第56-57页 |
| 4.4.3 攻毒后小鼠肺组织病变观察 | 第57-58页 |
| 4.4.4 攻毒后小鼠体重丢失及存活率 | 第58-59页 |
| 5 讨论 | 第59-64页 |
| 5.1 目的基因的选择依据 | 第59页 |
| 5.2 表达SIVHA基因的重组变异伪狂犬病病毒rPRV-HA的制备 | 第59-60页 |
| 5.3 HA蛋白亚单位疫苗的制备 | 第60-61页 |
| 5.4 初免-加强免疫策略的初步研究 | 第61-62页 |
| 5.5 本研究存在的问题及改进策略 | 第62-64页 |
| 6 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
