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一氧化氮在水稻开花及非生物胁迫应答中的功能研究

本论文的创新点第6-10页
中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
本论文缩略词表第15-17页
第一章 引言第17-49页
    1.1 一氧化氮在植物中的信号途径第17-20页
        1.1.1 植物中一氧化氮的合成第17-18页
        1.1.2 植物中一氧化氮的代谢第18-19页
        1.1.3 植物中一氧化氮信号转导通路第19-20页
    1.2 一氧化氮在植物中的功能研究第20-30页
        1.2.1 一氧化氮和种子萌发第21-22页
        1.2.2 一氧化氮与植物幼苗的生长第22-23页
        1.2.3 一氧化氮和植物有性生殖第23-24页
        1.2.4 一氧化氮与果实成熟和叶片衰老第24页
        1.2.5 一氧化氮与气孔开闭第24-25页
        1.2.6 一氧化氮与生物胁迫第25-29页
        1.2.7 一氧化氮与非生物胁迫第29-30页
    1.3 干旱胁迫和盐胁迫第30-35页
        1.3.1 干旱胁迫的现状第30-31页
        1.3.2 干旱胁迫对植物的影响第31-32页
        1.3.3 植物的抗旱机制第32页
        1.3.4 植物干旱胁迫的信号转导第32-33页
        1.3.5 盐胁迫对植物的影响第33-34页
        1.3.6 植物的耐盐机制第34页
        1.3.7 植物盐胁迫信号转导第34-35页
    1.4 植物在干旱和高盐胁迫下的应对策略第35-40页
        1.4.1 植物形态的变化第36页
        1.4.2 植物体内的渗透调节第36页
        1.4.3 植物体内的离子调节第36-37页
        1.4.4 气孔关闭第37页
        1.4.5 活性氧的清除第37页
        1.4.6 一氧化氮和干旱胁迫第37-38页
        1.4.7 一氧化氮和盐胁迫第38-40页
    1.5 镉胁迫第40-43页
        1.5.1 镉胁迫对植物的毒害第40-41页
        1.5.2 植物的镉耐受机制第41页
        1.5.3 一氧化氮与镉胁迫第41-43页
    1.6 水稻开花第43-47页
        1.6.1 水稻第43页
        1.6.2 水稻的开花调控第43-46页
        1.6.3 一氧化氮和植物开花调控第46-47页
    1.7 本研究的目的和意义第47-49页
第二章 材料和方法第49-70页
    2.1 实验材料第49页
        2.1.1 菌种材料和载体第49页
        2.1.2 植物材料第49页
    2.2 水稻植株的栽培与种子收获第49页
    2.3 水稻nNOS转基因植株纯合体鉴定第49-50页
    2.4 水稻基因组的提取第50页
    2.5 水稻中RNA提取和反转录第50-52页
        2.5.1 植物中RNA提取第50-51页
        2.5.2 植物中RNA的反转录第51-52页
    2.6 实时定量PCR检测第52页
    2.7 nNOS过表达载体的构建第52-53页
    2.8 目的片段的获得及胶回收第53-54页
    2.9 片段的补平第54页
    2.10 载体的线性化第54-55页
    2.11 线性化载体的去磷酸化第55-56页
    2.12 目的片段与载体连接第56页
    2.13 大肠杆菌DH5α超级感受态细胞的制备第56-57页
    2.14 连接产物转化DH5α感受态细胞第57-58页
    2.15 质粒的提取第58页
    2.16 农杆菌EHA105感受态细胞的制备第58-59页
    2.17 农杆菌EHA105感受态细胞的转化第59页
    2.18 农杆菌介导的水稻转化第59-62页
        2.18.1 水稻愈伤组织的培养第59-60页
        2.18.2 愈伤组织继代第60页
        2.18.3 愈伤组织的预培养第60页
        2.18.4 农杆菌培养与重悬第60页
        2.18.5 农杆菌感染愈伤与共培养第60页
        2.18.6 农杆菌的去除第60-61页
        2.18.7 愈伤组织的筛选第61页
        2.18.8 水稻愈伤组织的分化第61页
        2.18.9 分化小苗的生根第61页
        2.18.10 炼苗与移栽第61-62页
    2.19 转基因植株纯合体筛选第62页
    2.20 水稻幼苗的生长以及外源处理第62-63页
    2.21 一氧化氮含量检测第63-64页
        2.21.1 一氧化氮荧光探针检测一氧化氮含量第63页
        2.21.2 自由基法检测一氧化氮含量第63-64页
    2.22 NOS酶活的测定第64页
    2.23 水稻幼苗对mannitol、NaCl和CdCl_2敏感性分析第64页
    2.24 水稻对干旱胁迫的耐受性分析第64页
    2.25 生理指标的测定第64-67页
        2.25.1 相对含水量的测定第64-65页
        2.25.2 叶片失水率的测定第65页
        2.25.3 气孔导度的测定第65页
        2.25.4 脯氨酸的测定第65-66页
        2.25.5 丙二醛含量的测定第66页
        2.25.6 电导率的测定第66-67页
        2.25.7 过氧化氢含量的测定第67页
        2.25.8 POX和CAT酶活的测定第67页
    2.26 常规试剂的配置第67-68页
    2.27 本论文涉及的引物序列第68-70页
第三章 结果与分析第70-99页
    3.1 nNOS超表达载体的构建和水稻的遗传转化第70-71页
        3.1.1 nNOS过表达载体的构建第70-71页
        3.1.2 水稻的遗传转化第71页
    3.2 nNOS过表达水稻株系的基因组鉴定第71-72页
    3.3 nNOS过表达水稻株系中nNOS基因的表达第72-73页
    3.4 nNOS过表达水稻株系NOS酶活的测定第73页
    3.5 nNOS过表达水稻株系NO含量的测定第73-75页
    3.6 干旱和盐胁迫诱导水稻中NOS酶活和NO含量升高第75-76页
    3.7 L-NAME降低水稻对干旱和高盐胁迫的耐受性第76-77页
    3.8 nNOS过表达水稻株系对干旱胁迫的耐受性增强第77-79页
    3.9 nNOS过表达水稻株系对盐胁迫的耐受性增强第79-81页
    3.10 nNOS过表达水稻株系在干旱和盐胁迫下生理指标的变化第81-86页
        3.10.1 nNOS过表达水稻株系在干旱和盐胁迫下的相对含水量第81-82页
        3.10.2 nNOS过表达水稻株系离体叶片的失水率第82-83页
        3.10.3 nNOS过表达水稻株系叶片的气孔导度第83-84页
        3.10.4 nNOS过表达水稻株系在干旱和盐胁迫条件下的脯氨酸含量第84页
        3.10.5 nNOS过表达水稻株系在干旱和盐胁迫条件下的电导率第84-85页
        3.10.6 nNOS过表达水稻株系在干旱和盐胁迫条件下的MDA含量第85-86页
    3.11 nNOS过表达水稻株系在胁迫条件下的活性氧清除能力增强第86-88页
    3.12 nNOS过表达水稻株系中胁迫相关基因的表达第88-90页
    3.13 nNOS过表达水稻株系对镉胁迫的耐受性增强第90-94页
    3.14 nNOS过表达水稻株系的开花时间延迟第94-99页
第四章 讨论第99-104页
    4.1 表达nNOS是改变植物体内源NO代谢的有效手段第99-100页
    4.2 NO在水稻非生物胁迫应答中的作用第100-103页
    4.3 NO在水稻开花调控中的作用第103-104页
参考文献第104-118页
在读期间发表和投稿的论文第118-119页
致谢第119页

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