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针刺俞募穴对GFRα1基因敲除后FC小鼠GDNF-PI3K-Akt信号转导通路影响的研究

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
引言第12-17页
    1 研究背景第12-15页
    2 研究目的和意义第15页
    3 研究内容第15-17页
中英文缩略词表第17-18页
技术路线第18-19页
实验第19-49页
    1 实验材料第19-24页
        1.1 实验动物第19-21页
            1.1.1 基因敲除小鼠的制备第19-20页
            1.1.2 基因敲除小鼠的繁育第20-21页
        1.2 主要试剂第21-22页
        1.3 主要仪器第22-24页
    2 实验方法第24-34页
        2.1 动物分组第24页
        2.2 模型建立第24页
        2.3 模型评估第24页
        2.4 电针治疗第24-25页
        2.5 取材第25页
        2.6 观察指标第25-26页
            2.6.1 小鼠排便情况第25页
            2.6.2 胃排空和小肠推进率的检测第25-26页
            2.6.3 GDNF蛋白、Rai蛋白及其mRNA表达水平的检测第26页
            2.6.4 RET的mRNA及蛋白表达水平的检测第26页
            2.6.5 PI3K、Akt磷酸化水平的检测第26页
        2.7 检测方法第26-34页
            2.7.1 免疫组化法第26-27页
            2.7.2 原位杂交法第27-28页
            2.7.3 实时定量聚合酶链式反应第28-31页
            2.7.4 Western Blot法第31-34页
        2.8 统计方法第34页
    3 实验结果第34-46页
        3.1 小鼠排便情况第34-36页
            3.1.1 一般状态观察第34页
            3.1.2 造模前排便实验结果第34-35页
            3.1.3 造模后排便实验结果第35-36页
        3.2 胃排空和小肠推进率第36-37页
            3.2.1 胃排空实验结果第36页
            3.2.2 小肠推进率实验结果第36-37页
        3.3 GDNF蛋白及其mRNA表达水平的检测第37-39页
            3.3.1 GDNF蛋白的表达第38页
            3.3.2 GDNF mRNA的表达第38-39页
        3.4 Rai蛋白及其mRNA表达水平的检测第39-42页
            3.4.1 Rai蛋白的表达第40-41页
            3.4.2 Raim RNA的表达第41-42页
        3.5 RET蛋白及其mRNA表达水平的检测第42-44页
            3.5.1 RET蛋白的表达第42-43页
            3.5.2 RET mRNA的表达第43-44页
        3.6 PI3K、Akt蛋白磷酸化水平的检测第44-46页
            3.6.1 PI3K蛋白的表达第45页
            3.6.2 Akt蛋白的表达第45-46页
    4 小结第46-49页
        4.1 造模对GFRα1基因敲除小鼠排便情况的影响第46-47页
        4.2 针刺俞募穴对GFRα1基因敲除小鼠胃排空率和小肠推进率的影响第47页
        4.3 针刺俞募穴对GFRα1基因敲除小鼠结肠内GDNF蛋白及mRNA表达的调控第47页
        4.4 针刺俞募穴对GFRα1基因敲除小鼠结肠内Rai蛋白及其mRNA表达的调控第47页
        4.5 针刺俞募穴对GFRα1基因敲除小鼠结肠内RET蛋白及其mRNA表达的调控第47-48页
        4.6 针刺俞募穴对GFRα1基因敲除小鼠结肠内PI3K、Akt蛋白表达的调控第48-49页
讨论第49-80页
    1 我国传统医学对功能性便秘的认知第49-51页
        1.1 病名的追溯第49页
        1.2 病因病机的认识第49-50页
        1.3 本病治疗的认识第50-51页
            1.3.1 辨证分型第50页
            1.3.2 治疗探讨第50-51页
    2 西医学对本病的认识第51-62页
        2.1 本病的基本特点第51-53页
            2.1.1 流行病学研究第51-52页
            2.1.2 一般规律及诱发因素第52-53页
        2.2 本病的定义与诊断第53-54页
            2.2.1 定义第53页
            2.2.2 诊断标准第53-54页
        2.3 本病的发病机制研究第54-60页
            2.3.1 相关肌群动力障碍第54页
            2.3.2 肠道神经系统病变第54-59页
            2.3.3 肠道微生物第59-60页
            2.3.4 胃肠激素第60页
        2.4 本病治疗进展第60-62页
            2.4.1 药物疗法第60-61页
            2.4.2 非药物疗法第61-62页
    3 针灸治疗功能性便秘的临床研究第62-64页
        3.1 针灸治疗本病的疗效第62-63页
        3.2 针灸治疗本病的选穴配穴第63页
        3.3 针灸治疗本病的刺灸方法第63-64页
    4 针灸治疗功能性便秘的机制研究第64-68页
        4.1 针刺对肠神经系统的调节第64-66页
            4.1.1 针刺对神经节细胞的调控第65页
            4.1.2 针刺对神经递质的调控第65-66页
            4.1.3 针刺对胃肠激素的调控第66页
        4.2 针刺对脑—肠轴的调节第66-67页
        4.3 针刺对精神心理的调节第67-68页
    5 本实验动物模型的建立与评估第68-71页
        5.1 GFRa1与功能性便秘的关系第68-69页
        5.2 动物模型的建立第69-71页
            5.2.1 GFRα1基因的敲除第69页
            5.2.2 功能性便秘模型的建立第69-71页
        5.3 动物模型成功的评估方法第71页
    6 本实验指标的选择依据第71-75页
        6.1 胃肠传输功能的检测第71-72页
            6.1.1 胃排空率与功能性便秘第72页
            6.1.2 小肠推进率与功能性便秘第72页
        6.2 GDNF-PI3K-Akt信号转导通路的检测第72-75页
            6.2.1 EGC及其分泌的GDNF与功能性便秘第73页
            6.2.2 RET蛋白与功能性便秘第73页
            6.2.3 Rai蛋白与功能性便秘第73-74页
            6.2.4 PI3K-Akt信号通路与功能性便秘第74-75页
    7 本实验结果的讨论第75-80页
        7.1 针刺俞募穴对GFRa1基因敲除小鼠胃肠传输功能影响研究第75-76页
            7.1.1 针刺与胃排空率第75-76页
            7.1.2 针刺与小肠推进率第76页
        7.2 针刺俞募穴对GFRa1基因敲除小鼠GDNF-PI3K-Akt信号转导通路的影响第76-80页
            7.2.1 针刺与EGC分泌的GDNF第76-77页
            7.2.2 针刺与RET蛋白第77页
            7.2.3 针刺与Rai蛋白第77页
            7.2.4 针刺与PI3K/Akt信号通路第77-80页
结论第80-81页
创新性和先进性第81-82页
问题与展望第82-83页
致谢第83-84页
参考文献第84-97页
附录一第97-101页
    附图第97-101页
        1 基因敲除小鼠的制备过程第97-98页
        2 基因敲除小鼠的繁育第98页
        3 电针治疗过程第98-99页
        4 各组PI3K检测图片第99页
        5 各组Akt检测图片第99-101页
附录二第101-110页
    综述第101-110页
        参考文献第106-110页
附录三第110-112页
    在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果第110-112页
        (一)期刊论文第110-111页
        (二)课题第111页
        (三)获奖第111-112页

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