| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 生物矿化 | 第12页 |
| 1.2 贝壳的结构与形成过程 | 第12-13页 |
| 1.2.1 贝壳的结构 | 第12页 |
| 1.2.2 贝壳的形成过程 | 第12-13页 |
| 1.3 棱柱层方解石矿化相关蛋白及基因的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3.1 棱柱层不溶性有机框架组分 | 第13-14页 |
| 1.3.2 棱柱层中诱导晶体成核生长的基质蛋白 | 第14-15页 |
| 1.4 β-N-乙酰-己糖胺酶研究进展 | 第15页 |
| 1.5 几丁质蛋白研究进展 | 第15-16页 |
| 1.6 EGF-likedomain-containing蛋白研究进展 | 第16-17页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 马氏珠母贝PmHEX和PmHEXL基因的克隆及功能研究 | 第18-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 实验动物与材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂和溶液的配制 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.5 引物设计 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第20页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第20页 |
| 2.2.3 基因片段的克隆 | 第20-22页 |
| 2.2.4 RACE扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.5 生物信息学分析及所用软件 | 第23页 |
| 2.2.6 组织差异表达分析 | 第23-24页 |
| 2.2.7 原位杂交实验 | 第24-25页 |
| 2.2.8 RNAi实验 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-40页 |
| 2.3.1 马氏珠母贝β-N-乙酰-己糖胺酶基因PmHEX的克隆及功能研究 | 第26-34页 |
| 2.3.1.1 PmHEX基因全长获得及序列特征分析 | 第26-29页 |
| 2.3.1.2 PmHEX同源性分析及三级结构预测 | 第29-31页 |
| 2.3.1.3 PmHEX进化分析 | 第31页 |
| 2.3.1.4 PmHEX基因在不同组织表达分析 | 第31-32页 |
| 2.3.1.5 ISH检测PmHEX基因在外套膜的表达定位 | 第32-33页 |
| 2.3.1.6 PmHEX基因的RNAi实验结果 | 第33-34页 |
| 2.3.2 马氏珠母贝β-N-乙酰-己糖胺酶基因PmHEXL的克隆与功能研究 | 第34-40页 |
| 2.3.2.1 PmHEXL基因的全长获得及序列特征分析 | 第34-36页 |
| 2.3.2.2 PmHEXL同源性分析及三级结构预测 | 第36-38页 |
| 2.3.2.3 PmHEXL进化分析 | 第38页 |
| 2.3.2.4 PmHEXL基因在不同组织表达分析 | 第38-39页 |
| 2.3.2.5 ISH检测PmHEXL基因在外套膜的表达定位 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-42页 |
| 3 马氏珠母贝几丁质结合蛋白基因PmCBP的克隆及功能研究 | 第42-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第42页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 主要试剂和溶液的配制 | 第42页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第42页 |
| 3.1.5 引物设计 | 第42-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43页 |
| 3.3 结果 | 第43-51页 |
| 3.3.1 PmCBP基因的全长获得及序列特征分析 | 第43-45页 |
| 3.3.2 PmCBP的ChtBD2序列的同源性及聚类分析 | 第45-48页 |
| 3.3.3 PmCBP基因在不同组织表达分析 | 第48页 |
| 3.3.4 ISH检测PmCBP基因在外套膜的表达定位 | 第48-49页 |
| 3.3.5 矿化性状的相关性分析 | 第49-50页 |
| 3.3.6 PmCBP基因的RNAi实验结果 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 4 马氏珠母贝PmEGFCP基因的克隆及功能研究 | 第53-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第53页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第53页 |
| 4.1.3 主要试剂和溶液的配制 | 第53页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第53页 |
| 4.1.5 引物设计 | 第53-54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 总RNA的提取 | 第54页 |
| 4.2.2 cDNA第一链的合成 | 第54页 |
| 4.2.3 基因片段的克隆 | 第54页 |
| 4.2.4 RACE扩增 | 第54页 |
| 4.2.5 生物信息学分析及所用软件 | 第54页 |
| 4.2.6 组织差异表达分析 | 第54页 |
| 4.2.7 原位杂交实验 | 第54-55页 |
| 4.2.8 RNAi实验 | 第55页 |
| 4.2.9 原核表达 | 第55页 |
| 4.2.10 Westernblotting | 第55-56页 |
| 4.2.11 包涵体溶解及纯化 | 第56页 |
| 4.2.12 蛋白质的复性及纯化 | 第56页 |
| 4.2.13 蛋白超滤浓缩 | 第56页 |
| 4.3 结果 | 第56-66页 |
| 4.3.1 PmEGFCP基因全长获得及序列特征分析 | 第56-58页 |
| 4.3.2 PmEGFCP同源性分析 | 第58-60页 |
| 4.3.3 PmEGFCP进化分析 | 第60页 |
| 4.3.4 PmEGFCP基因在不同组织表达分析 | 第60-61页 |
| 4.3.5 ISH检测PmEGFCP基因在外套膜的表达定位 | 第61-62页 |
| 4.3.6 PmEGFCP基因的RNAi实验结果 | 第62-63页 |
| 4.3.7 PmEGFCP原核表达实验 | 第63-64页 |
| 4.3.8 Westernbolt分析 | 第64-65页 |
| 4.3.9 重组蛋白纯化、复性和冻干 | 第65-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-68页 |
| 5 马氏珠母贝Pm-PNU7基因的克隆及功能研究 | 第68-76页 |
| 5.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第68页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第68页 |
| 5.1.3 主要试剂和溶液的配制 | 第68页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第68页 |
| 5.1.5 引物设计 | 第68-69页 |
| 5.2 实验方法 | 第69页 |
| 5.3 结果 | 第69-74页 |
| 5.3.1 Pm-PNU7基因全长获得及序列特征分析 | 第69-70页 |
| 5.3.2 Pm-PNU7同源性分析 | 第70-71页 |
| 5.3.3 Pm-PNU7进化分析 | 第71-72页 |
| 5.3.4 Pm-PNU7基因在不同组织表达分析 | 第72页 |
| 5.3.5 ISH检测Pm-PNU7基因在外套膜的表达定位 | 第72-73页 |
| 5.3.6 Pm-PNU7基因的RNAi实验结果 | 第73-74页 |
| 5.4 讨论 | 第74-76页 |
| 6 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简介 | 第91-92页 |
| 导师简介 | 第92页 |
