| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 生物钟 | 第11-12页 |
| 1.2 斑马鱼生物钟 | 第12-14页 |
| 1.3 生物钟基因per | 第14-16页 |
| 1.4 斑马鱼研究生物钟的优势 | 第16-17页 |
| 1.5 CRISPR-Cas9 | 第17-18页 |
| 1.6 Knockin | 第18页 |
| 1.7 立题依据和研究意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.2 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.3 常用试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.3.1 细菌LB培养基 | 第21页 |
| 2.3.2 抗生素的配制 | 第21页 |
| 2.3.3 核酸电泳相关缓冲液 | 第21页 |
| 2.3.4 Inoue法制备超级感受态细胞的相关溶液 | 第21-22页 |
| 2.4 实验方法及设计 | 第22-36页 |
| 2.4.1 斑马鱼交配产卵 | 第22页 |
| 2.4.2 显微注射 | 第22页 |
| 2.4.3 斑马鱼总DNA的提取 | 第22页 |
| 2.4.4 PCR扩增目的片段 | 第22-23页 |
| 2.4.5 斑马鱼总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.4.6 mRNA反转成cDNA | 第24页 |
| 2.4.7 荧光定量PCR | 第24-25页 |
| 2.4.8 感受态细胞的制备 | 第25页 |
| 2.4.9 胶回收 | 第25-26页 |
| 2.4.10 转化 | 第26页 |
| 2.4.11 质粒的提取 | 第26-27页 |
| 2.4.12 转化试验重组子的鉴定 | 第27页 |
| 2.4.13 目的片段连接到载体上及酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4.14 Gataway方法构建过表达品系 | 第28页 |
| 2.4.15 Konckin构建转基因鱼的方法 | 第28-30页 |
| 2.4.16 行为方法描述 | 第30-32页 |
| 2.4.17 利用CRISPR-Cas9构建组织特异性敲除斑马鱼 | 第32-34页 |
| 2.4.18 高通量深度测序 | 第34-35页 |
| 2.4.19 统计方法描述 | 第35页 |
| 2.4.20 荧光素酶表达水平检测 | 第35页 |
| 2.4.21 ChIP | 第35-36页 |
| 2.5 实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.6 引物序列 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-60页 |
| 3.1 per1a基因受生物钟调控 | 第38-39页 |
| 3.2 全身敲除的per1a纯合突变体对斑马鱼的行为节律没有影响 | 第39-42页 |
| 3.3 松果体特异性敲除的per1a对斑马鱼的行为节律没有影响 | 第42-46页 |
| 3.4 生物钟基因在全身敲除的per1a纯合突变体的深度测序结果 | 第46-48页 |
| 3.5 生物钟基因在全身敲除的per1a纯合突变体中是下调的 | 第48-51页 |
| 3.6 过表达per1a基因后生物钟基因也随之上调 | 第51-53页 |
| 3.7 过表达per1a基因后对生物钟行为的影响 | 第53-56页 |
| 3.8 运用knockin技术构建per1a-GFP/RFP转基因鱼系基因 | 第56-57页 |
| 3.9 在per1a纯合突变体中有与精神分裂症相关的基因 | 第57-60页 |
| 第四章 讨论 | 第60-65页 |
| 4.1 per1a与生物钟 | 第60-62页 |
| 4.2.per1a纯合突变体中有精神分裂症相关基因dao.1 | 第62-63页 |
| 4.3 Knockin构建per1a转基因鱼的优势 | 第63-64页 |
| 4.4.全身性基因敲除、组织特异性基因敲除以及热休克蛋白介导的过表达方法比较 | 第64-65页 |
| 第五章 结论 | 第65-67页 |
| 5.1 per1a受生物钟的调控 | 第65页 |
| 5.2 per1a对斑马鱼生物钟的行为节律和基因的影响 | 第65-66页 |
| 5.3 per1a纯合突变体生物钟方面的转录组分析 | 第66页 |
| 5.4 per1a转基因鱼的构建 | 第66页 |
| 5.5 per1a纯合突变体精神分裂症相关方面的转录组分析 | 第66-67页 |
| 第六章 展望 | 第67-69页 |
| 6.1 生物钟基因在per1a纯合突变体中下调的机制 | 第67页 |
| 6.2 per1a和dao.1的表达是否有共定位 | 第67页 |
| 6.3 per1a纯合突变体的神经细胞是否有减少 | 第67-68页 |
| 6.4 Per1a对精神分裂症相关基因dao.1的调控 | 第68页 |
| 6.5 per1a纯合突变体是否有精神分裂症相关的症状 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 缩略词表 | 第75-76页 |
| 研究生期间已发表的论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
