中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
英文缩略词 | 第17-18页 |
前言 | 第18-20页 |
第1章 文献回顾 | 第20-23页 |
第2章 CCL20/CCR6生物轴在人唾液腺腺样囊性癌标本中的表达及意义 | 第23-28页 |
1 材料 | 第23-24页 |
1.1 病例材料 | 第23-24页 |
1.2 实验试剂和仪器设备 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-25页 |
3 结果 | 第25-27页 |
3.1 人涎腺腺样囊性癌组织和正常人涎腺组织中CCR6表达 | 第25页 |
3.2 CCR6特异性染色结果 | 第25-27页 |
4 讨论 | 第27-28页 |
第3章 CCR6在SACC-LM细胞系中的表达 | 第28-33页 |
1 材料 | 第28页 |
1.1 细胞系 | 第28页 |
1.2 主要试剂 | 第28页 |
2 实验方法 | 第28-30页 |
2.1 免疫细胞化学法检测SACC-LM细胞系CCR6的表达情况 | 第28-29页 |
2.2 免疫荧光法检测SACC-LM细胞系中CCR6的表达情况 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
第4章 抑制SACC-LM细胞系CCR6表达的siRNA序列的筛选及稳定转染株建立 | 第33-62页 |
实验一 CCR6SHRNA慢病毒的构建 | 第33-42页 |
1 材料 | 第33-34页 |
1.1 实验试剂 | 第33-34页 |
1.2 实验仪器 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-38页 |
3 实验结果 | 第38-42页 |
3.1 siRNA序列和shRNA序列 | 第38-39页 |
3.2 测序结果分析 | 第39-42页 |
实验二 慢病毒包装及其滴度检测 | 第42-47页 |
1 实验材料 | 第42-43页 |
1.1 实验试剂 | 第42页 |
1.2 慢病毒载体、包装细胞和菌株 | 第42-43页 |
1.3 实验设备 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-45页 |
3 滴度结果 | 第45-47页 |
实验三 抑制人唾液腺腺样囊性癌CCR6表达的稳定转染细胞系建立 | 第47-52页 |
1 实验材料 | 第47-48页 |
1.1 实验试剂 | 第47页 |
1.2 实验设备 | 第47-48页 |
2 实验方法 | 第48-50页 |
3 结果 | 第50-52页 |
3.1 不同moi梯度SACC-LM转染结果(放大倍数10*10) | 第50-51页 |
3.2 CCR6干扰稳定转染SACC-LM细胞系 | 第51-52页 |
实验四 QPCR检测SACC-LM稳定转染后CCR6的干扰效率 | 第52-58页 |
1 材料 | 第52-53页 |
1.1 实验设备 | 第52页 |
1.2 实验试剂 | 第52-53页 |
2 实验方法 | 第53-55页 |
3 实验结果 | 第55-57页 |
3.1 紫外分光光度计检测RNA提取质量检测结果 | 第55页 |
3.2 RNA琼脂糖凝胶电泳分析结果 | 第55-56页 |
3.3 GAPDH基因溶解曲线 | 第56页 |
3.4 GAPDH基因扩增曲线 | 第56页 |
3.5 CCR6基因溶解曲线 | 第56-57页 |
3.6 CCR6基因扩增曲线 | 第57页 |
3.7 相对定量计算 | 第57页 |
4 结论 | 第57-58页 |
实验五 免疫荧光发检测SACC-LM稳定转染后CCR6的干扰效率 | 第58-62页 |
1 材料 | 第58页 |
2 方法 | 第58-59页 |
3 结果 | 第59页 |
4 结论 | 第59-60页 |
5 讨论 | 第60-62页 |
第5章 CCR6-siRNA对人唾液腺腺样囊性癌细胞SACC-LM生物学行为的影响 | 第62-71页 |
1 材料 | 第62-63页 |
1.1 实验试剂 | 第62页 |
1.2 细胞 | 第62-63页 |
2 方法 | 第63-65页 |
2.1 CCK-8法检测细胞增殖能力 | 第63页 |
2.2 细胞迁移实验(划痕实验) | 第63-64页 |
2.3 趋化实验 | 第64页 |
2.4 侵袭实验 | 第64-65页 |
2.5 统计学分析 | 第65页 |
3 结果 | 第65-69页 |
3.1 CCR6-siRNA稳定转染对唾液腺腺样囊性癌细胞增殖的影响 | 第65-66页 |
3.2 CCR6-siRNA稳定转染对唾液腺腺样囊性癌细胞迁移能力的影响 | 第66页 |
3.3 趋化因子CCL20对唾液腺腺样囊性癌细胞的影响 | 第66-68页 |
3.4 抑制趋化因子受体CCR6表达对唾液腺腺样囊性癌细胞侵袭能力的影响 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-71页 |
第6章 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
个人简历和研究成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |