| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 课题研究的背景和意义 | 第9页 |
| 1.2 乙型肝炎病毒的简介 | 第9-10页 |
| 1.3 溶质转运蛋白简介 | 第10页 |
| 1.4 转运蛋白NTCP的简介 | 第10-15页 |
| 1.4.1 NTCP的主要表达部位及调节 | 第10-11页 |
| 1.4.2 NTCP蛋白的功能 | 第11页 |
| 1.4.3 NTCP蛋白与HBV结合的关键氨基 | 第11页 |
| 1.4.4 NTCP蛋白转运胆汁酸与HBV受体功能的关联 | 第11-12页 |
| 1.4.5 NTCP作为靶标治疗HBV的药物研究 | 第12-13页 |
| 1.4.6 NTCP蛋白对HCV感染肝细胞的影响 | 第13-14页 |
| 1.4.7 NTCP蛋白对于研究HBV的意义 | 第14页 |
| 1.4.8 NTCP基因缺陷的影响 | 第14-15页 |
| 1.5 杆状病毒表达系统 | 第15页 |
| 1.6 本课题的主要研究内容 | 第15-16页 |
| 1.7 实验技术路线 | 第16-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 载体、菌株和细胞 | 第17页 |
| 2.1.2 分子克隆试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 感受态细胞制备试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 纯化蛋白常用试剂 | 第17页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 目的片段的获得 | 第19-20页 |
| 2.2.2 重组表达载体的构建 | 第20-21页 |
| 2.2.3 感受态T1细胞的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.4 重组连接产物的转化 | 第22页 |
| 2.2.5 质粒的提取操作 | 第22-23页 |
| 2.2.6 重组载体的提取和筛选鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.7 感受态DH10细胞的制备 | 第24页 |
| 2.2.8 重组杆状病毒的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.9 目的蛋白NTCP的表达纯化 | 第27-29页 |
| 2.2.10 亲和力测定的MST实验 | 第29-30页 |
| 第3章 NTCP蛋白的表达纯化 | 第30-49页 |
| 3.1 获得5种NTCP片段 | 第30页 |
| 3.2 重组载体的构建及PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 3.3 重组黏粒的获得及PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 3.4 检测带不同标签的5种NTCP在昆虫动物中的表达 | 第32-36页 |
| 3.5 带不同标签的5种NTCP在昆虫动物中的表达 | 第36-48页 |
| 3.5.1 带HA信号肽的5种NTCP在昆虫动物中的表达 | 第36-40页 |
| 3.5.2 带SUMO标签的5种NTCP在昆虫动物中的表达 | 第40-44页 |
| 3.5.3 带MBP标签的5种NTCP在昆虫动物中的表达 | 第44-48页 |
| 3.6 本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 NTCP蛋白的行为表征研究 | 第49-59页 |
| 4.1 不同去垢剂对NTCP蛋白行为表征的影响 | 第49-55页 |
| 4.1.1 去垢剂DDM对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第49-50页 |
| 4.1.2 去垢剂D360S对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第50页 |
| 4.1.3 去垢剂C316S对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第50-51页 |
| 4.1.4 去垢剂O310S对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第51-52页 |
| 4.1.5 去垢剂NG311对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第52页 |
| 4.1.6 去垢剂F308S对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第52-53页 |
| 4.1.7 去垢剂D322S对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第53-54页 |
| 4.1.8 去垢剂C325S对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第54页 |
| 4.1.9 去垢剂O311S对树鼩的NTCP蛋白的影响 | 第54-55页 |
| 4.2 NTCP蛋白与多肽相互作用力的测定 | 第55-57页 |
| 4.2.1 树鼩的NTCP蛋白的纯化 | 第55-56页 |
| 4.2.2 树鼩的NTCP蛋白与Myr47相互作用力测定 | 第56-57页 |
| 4.3 多肽Myr47对树鼩NTCP蛋白行为表型的影响 | 第57-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
