| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词对照表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-35页 |
| 1.1 氟中毒的研究现状及进展 | 第15-16页 |
| 1.2 氟中毒与骨损伤 | 第16-17页 |
| 1.3 氟与骨细胞 | 第17-18页 |
| 1.4 氟的作用过程 | 第18-25页 |
| 1.4.1 细胞呼吸链 | 第18页 |
| 1.4.2 细胞内膜渗透性与膜电位 | 第18页 |
| 1.4.3 ROS的产生 | 第18-19页 |
| 1.4.4 细胞坏死 | 第19页 |
| 1.4.5 凋亡 | 第19-20页 |
| 1.4.6 分泌,运输与回收小泡 | 第20-21页 |
| 1.4.7 转运蛋白 | 第21页 |
| 1.4.8 钙与磷酸转运蛋白 | 第21页 |
| 1.4.9 葡萄糖转运 | 第21-22页 |
| 1.4.10 Na+/K+-ATPase | 第22页 |
| 1.4.11 囊性纤维化跨膜传导调节蛋白 | 第22页 |
| 1.4.12 转录作用 | 第22-23页 |
| 1.4.13 炎症反应 | 第23页 |
| 1.4.14 细胞迁移 | 第23-24页 |
| 1.4.15 细胞增殖与细胞周期 | 第24-25页 |
| 1.5 细胞凋亡与自噬的关系 | 第25-29页 |
| 1.5.1 TOR激酶路径在自噬与凋亡中的作用 | 第26-27页 |
| 1.5.2 Beclin 1在自噬与凋亡中的作用 | 第27页 |
| 1.5.3 Caspases对自噬的调控 | 第27-28页 |
| 1.5.4 抗凋亡FLIPs对自噬的调控 | 第28页 |
| 1.5.5 死亡相关蛋白激酶家族在凋亡与自噬中的作用 | 第28页 |
| 1.5.6 p53在凋亡与自噬中的作用 | 第28-29页 |
| 1.6 SIRT1在细胞凋亡与自噬中的作用 | 第29-34页 |
| 1.6.1 Sirtuins的发现过程 | 第29页 |
| 1.6.2 Sirtuins参与的生物学功能 | 第29-30页 |
| 1.6.3 SIRT1的调节机制 | 第30-34页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第34-35页 |
| 第二章 氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞凋亡 | 第35-52页 |
| 2.1 引言 | 第35页 |
| 2.2 材料 | 第35-38页 |
| 2.2.1 细胞类型 | 第35页 |
| 2.2.2 主要仪器和耗材 | 第35-36页 |
| 2.2.3 主要试剂和试剂盒 | 第36页 |
| 2.2.4 实验所用溶液及其配制 | 第36-38页 |
| 2.3 方法 | 第38-44页 |
| 2.3.1 MC3T3-E1细胞培养 | 第38页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第38页 |
| 2.3.3 细胞冻存与复苏 | 第38页 |
| 2.3.4 实验分组 | 第38-39页 |
| 2.3.5 Annexin V-FITC/PI流式双染色检测氟诱导的MC3T3-E1细胞凋亡 | 第39页 |
| 2.3.6 RT-qPCR检测氟诱导的MC3T3-E1细胞凋亡 | 第39-41页 |
| 2.3.7 Western bloting检测氟诱导的MC3T3-E1细胞凋亡 | 第41-42页 |
| 2.3.8 显微镜观察高氟环境下MC3T3-E1细胞形态变化的影响 | 第42页 |
| 2.3.9 荧光显微镜检测氟诱导的MC3T3-E1细胞内ROS水平的变化 | 第42-43页 |
| 2.3.10 PI流式染色检测氟诱导的MC3T3-E1细胞周期变化 | 第43-44页 |
| 2.3.11 数据处理与统计 | 第44页 |
| 2.4 结果 | 第44-49页 |
| 2.4.1 氟化钠对MC3T3-E1细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.2 氟化钠对MC3T3-E1细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第45-47页 |
| 2.4.3 氟化钠对MC3T3-E1细胞形态学变化的影响 | 第47页 |
| 2.4.5 氟化钠对MC3T3-E1细胞内ROS水平的影响 | 第47-49页 |
| 2.4.6 氟化钠对MC3T3-E1细胞周期的影响 | 第49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-51页 |
| 2.6 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬 | 第52-59页 |
| 3.1 引言 | 第52页 |
| 3.2 材料 | 第52-54页 |
| 3.2.1 主要仪器与耗材 | 第52页 |
| 3.2.2 主要试剂和试剂盒 | 第52-53页 |
| 3.2.3 MC3T3-E1细胞培养 | 第53页 |
| 3.2.4 实验分组 | 第53页 |
| 3.2.5 RT-qPCR检测氟诱导的MC3T3-E1细胞自噬 | 第53-54页 |
| 3.2.6 Western bloting检测氟诱导的MC3T3-E1细胞自噬 | 第54页 |
| 3.2.7 MDC法检测氟诱导的MC3T3-E1细胞自噬 | 第54页 |
| 3.2.8 数据处理与统计 | 第54页 |
| 3.3 结果 | 第54-57页 |
| 3.3.1 氟化钠对MC3T3-E1细胞自噬相关蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
| 3.3.2 氟化钠对MC3T3-E1细胞内自噬小体的影响 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 SIRT1在MC3T3-E1细胞凋亡与自噬中的作用 | 第59-84页 |
| 4.1 引言 | 第59页 |
| 4.2 材料 | 第59-65页 |
| 4.2.1 主要仪器与耗材 | 第59页 |
| 4.2.2 主要试剂与试剂盒 | 第59-60页 |
| 4.2.3 MC3T3-E1细胞培养 | 第60-61页 |
| 4.2.4 实验分组 | 第61页 |
| 4.2.5 RT-qPCR检测氟化钠对MC3T3-E1细胞内SIRT1 mRNA表达变化的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.6 SIRT1激活物SRT1720与抑制物Ex-527对MC3T3-E1细胞存活率的影响 | 第62页 |
| 4.2.7 荧光显微镜检测SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞内ROS水平变化的影响 | 第62页 |
| 4.2.8 PI流式染色检测氟诱导的MC3T3-E1细胞周期变化 | 第62-63页 |
| 4.2.9 Annexin V-FITC/PI流式双染色检测SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞凋亡的影响 | 第63页 |
| 4.2.10 Western bloting检测SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞凋亡的影响 | 第63页 |
| 4.2.11 MTT法检测氟环境下SIRT1与自噬对MC3T3-E1细胞存活率的影响 | 第63-64页 |
| 4.2.12 显微镜观察自噬对暴露于高氟环境下MC3T3-E1细胞形态变化的影响 | 第64页 |
| 4.2.13 RT-qPCR检测SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬的影响 | 第64页 |
| 4.2.14 Western bloting检测SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬的影响 | 第64页 |
| 4.2.15 荧光显微镜检测SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬的影响 | 第64页 |
| 4.2.16 激光共聚焦显微镜检测SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.17 Western bloting检测氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬中SIRT1介导的细胞路径 | 第65页 |
| 4.2.18 数据处理与统计 | 第65页 |
| 4.3 结果 | 第65-78页 |
| 4.3.1 氟化钠对SIRT1的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.2 SIRIT1激活物SRT1720,抑制物Ex-527对MC3T3-E1细胞存活率的影响 | 第66页 |
| 4.3.3 SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞凋亡的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.4 SIRT1对氟环境下MC3T3-E1细胞内ROS水平的影响 | 第67-69页 |
| 4.3.5 氟环境下SIRT1对MC3T3-E1细胞周期的影响 | 第69页 |
| 4.3.6 SIRT1在氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞凋亡中介导的细胞路径 | 第69-70页 |
| 4.3.7 氟环境下SIRT1对MC3T3-E1细胞存活率的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.8 自噬对暴露于氟环境下MC3T3-E1细胞存活率的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.9 自噬对暴露于高氟环境下MC3T3-E1细胞形态变化的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.10 SIRT1对氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬的影响 | 第73-77页 |
| 4.3.11 SIRT1在氟化钠诱导的MC3T3-E1细胞自噬中介导的细胞路径 | 第77-78页 |
| 4.4 讨论 | 第78-83页 |
| 4.5 小结 | 第83-84页 |
| 第五章 结论和创新点 | 第84-85页 |
| 5.1 结论 | 第84页 |
| 5.2 创新点 | 第84页 |
| 5.3 研究展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简介 | 第101页 |
