| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 琥珀酸放线杆菌简介 | 第9-11页 |
| 1.1.1 琥珀酸放线杆菌生理特点 | 第9-10页 |
| 1.1.2 琥珀酸放线杆菌分子生物学研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 琥珀酸放线杆菌发酵产丁二酸的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.1 丁二酸简介 | 第11页 |
| 1.2.2 琥珀酸放线杆菌发酵产丁二酸 | 第11-12页 |
| 1.3 微生物抵御酸胁迫机制的研究 | 第12-15页 |
| 1.3.1 H+-ATPase和细胞膜外排泵 | 第13页 |
| 1.3.2 保护或修复大分子 | 第13-14页 |
| 1.3.3 细胞膜 | 第14页 |
| 1.3.4 细胞内的碱化作用 | 第14-15页 |
| 1.4 立题目的和意义 | 第15页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 培养基 | 第16页 |
| 2.1.2 主要溶液配制 | 第16页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.1.5 菌株、质粒和引物 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 菌体培养 | 第19-20页 |
| 2.2.2 .斑点实验 | 第20页 |
| 2.2.3 基因组的提取方法 | 第20页 |
| 2.2.4 质粒提取方法 | 第20页 |
| 2.2.5 pCR方法 | 第20页 |
| 2.2.6 pCR产物回收及片段连接方法 | 第20-21页 |
| 2.2.7 大肠杆菌热激转化感受态的制备与转化方法 | 第21页 |
| 2.2.8 琥珀酸放线杆菌电激转化感受态制备与转化方法 | 第21页 |
| 2.2.9 分析方法 | 第21-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-52页 |
| 3.1 丁二酸胁迫条件确定 | 第24-26页 |
| 3.1.1 丁二酸或丁二酸钠胁迫条件下不同菌株的生长能力 | 第24-26页 |
| 3.2 琥珀酸放线杆菌对丁二酸胁迫的生理应答 | 第26-35页 |
| 3.2.1 细胞内pH值的响应 | 第26-27页 |
| 3.2.2 细胞膜H+-ATPase的响应 | 第27-29页 |
| 3.2.3 细胞膜对丁二酸胁迫的响应 | 第29-32页 |
| 3.2.4 谷氨酸对丁二酸胁迫下琥珀酸放线杆菌的保护作用 | 第32-35页 |
| 3.3 琥珀酸放线杆菌对丁二酸胁迫的转录应答 | 第35-43页 |
| 3.3.1 酸胁迫条件下琥珀酸放线杆菌SWO-SWX的差异基因表达分析 | 第36-38页 |
| 3.3.2 酸胁迫条件下琥珀酸放线杆菌ZKO-ZKX的差异基因表达分析 | 第38-40页 |
| 3.3.3 酸胁迫前SWO-ZKO的差异基因表达分析 | 第40-42页 |
| 3.3.4 酸胁迫后SWX-ZKX的差异基因表达分析 | 第42-43页 |
| 3.4 琥珀酸放线杆菌四个差异基因的过表达研究 | 第43-48页 |
| 3.4.1 质粒pLGZ922多克隆位点的设计和引入 | 第44-45页 |
| 3.4.2 过表达重组质粒的构建 | 第45-47页 |
| 3.4.3 四个差异基因过表达对丁二酸耐受能力的影响 | 第47-48页 |
| 3.5 琥珀酸放线杆菌中异源表达布氏乳杆菌gadB基因的研究 | 第48-52页 |
| 3.5.1 pLGZ-gadB基因重组质粒的构建 | 第49-50页 |
| 3.5.2 谷氨酸脱羧酶酶活的验证 | 第50页 |
| 3.5.3 谷氨酸脱羧酶过表达对琥珀酸放线杆菌SW丁二酸耐受能力的影响 | 第50-52页 |
| 主要结论与展望 | 第52-54页 |
| 主要结论 | 第52页 |
| 展望 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录Ⅰ：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61-62页 |
| 附录Ⅱ：差异表达基因 | 第62-76页 |
