| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 肠道病毒71型灭活疫苗的研究进展 | 第11-18页 |
| 1.1 肠道病毒71型背景与简介 | 第11-14页 |
| 1.2 灭活疫苗的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 灭活疫苗简介 | 第14页 |
| 1.2.2 灭活疫苗的生产与毒株的选择 | 第14-15页 |
| 1.2.3 灭活疫苗免疫原性的研究 | 第15页 |
| 1.2.4 灭活疫苗的临床研究 | 第15-16页 |
| 1.2.5 灭活疫苗研发的可行性及问题 | 第16-17页 |
| 1.2.6 灭活疫苗的发展前景 | 第17-18页 |
| 第二章 研究论文 内蒙古EV71病毒C33株VP2疫苗的初步研究 | 第18-65页 |
| 2.1 前言 | 第18-21页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第21-44页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.2.1.1 主要试剂 | 第21页 |
| 2.2.1.2 主要实验仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.2.1.3 常用溶液的配制 | 第22-26页 |
| 2.2.1.4 实验病毒、菌株、动物和载体 | 第26页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第26-44页 |
| 2.2.2.1 EV71病毒总RNA的提取 | 第26-28页 |
| 2.2.2.2 EV71vp2基因的克隆及载体的构建 | 第28-35页 |
| 2.2.2.3 vp2基因的生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 2.2.2.4 VP2和HIS-VP2蛋白质的表达及鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.2.5 重组蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| 2.2.2.6 Bradford法测定纯化后蛋白质的浓度 | 第38-39页 |
| 2.2.2.7 动物免疫及腹水抗体的制备 | 第39-41页 |
| 2.2.2.8 病毒中和实验 | 第41-42页 |
| 2.2.2.9 肠道病毒71型感染乳鼠模型的建立 | 第42-44页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第44-62页 |
| 2.3.1 目的基因vp2的克隆及载体的构建 | 第44-54页 |
| 2.3.1.1 vp2基因的克隆 | 第44页 |
| 2.3.1.2 pMD-19T-VP2和pET3a-VP2重组载体的构建与鉴定 | 第44-46页 |
| 2.3.1.3 pMD-19T-HIS-VP2和pET3a-HIS-VP2重组载体的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| 2.3.1.4 vp2基因的测序结果与生物信息学分析 | 第47-54页 |
| 2.3.2 VP2和HIS-VP2蛋白质在大肠杆菌中的表达与鉴定 | 第54-56页 |
| 2.3.2.1 SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第54-55页 |
| 2.3.2.2 VP2和HIS-VP2蛋白质的纯化及浓度测定 | 第55-56页 |
| 2.3.3 抗VP2和HIS-VP2腹水抗体的WesternBlot检测 | 第56-57页 |
| 2.3.4 抗VP2腹水抗体的ELISA检测 | 第57-58页 |
| 2.3.5 抗VP2和抗HIS-VP2腹水抗体的中和实验评估 | 第58页 |
| 2.3.6 肠道病毒71型感染乳鼠模型的建立及评价 | 第58-62页 |
| 2.3.6.1 动物模型乳鼠鼠龄确定 | 第58-59页 |
| 2.3.6.2 肠道病毒71型感染乳鼠模型的建立 | 第59-62页 |
| 2.4 讨论 | 第62-64页 |
| 2.5 总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
