摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一部分 文献综述 原始生殖细胞的特化和表观遗传重编程过程研究进展 | 第11-20页 |
1 PGCs的特化的调节 | 第11-14页 |
1.1 内胚层因子SOX17的关键作用 | 第12-13页 |
1.2 SOX17的作用 | 第13-14页 |
1.3 PRDM14的作用 | 第14页 |
2 PGCs迁移中的表观遗传调节研究 | 第14-17页 |
2.1 广泛的DNA去甲基化 | 第14-15页 |
2.2 部分印记基因的保留 | 第15-16页 |
2.3 组蛋白甲基化水平的动态变化 | 第16-17页 |
2.4 miRNA的作用 | 第17页 |
3 PGCs对性腺形成的作用 | 第17-18页 |
4 小结 | 第18-20页 |
第二部分 实验研究 | 第20-48页 |
一、小鼠原始生殖细胞迁移过程中基因表达分析 | 第20-33页 |
1 引言 | 第20-21页 |
2 材料和方法 | 第21-26页 |
2.1 试剂及耗材 | 第21页 |
2.2 实验动物 | 第21-22页 |
2.3 小鼠胚胎石蜡切片及HE染色 | 第22-23页 |
2.4 不同胚龄小鼠胚胎的获取以及分选前处理 | 第23页 |
2.5 小鼠原始生殖细胞的获取 | 第23-24页 |
2.6 碱性磷酸酶染色 | 第24页 |
2.7 单细胞RNA-Seq文库制备和测序 | 第24页 |
2.8 数据处理 | 第24-25页 |
2.9 实时定量PCR | 第25-26页 |
3 结果 | 第26-31页 |
3.1 mPGCs的定位检测 | 第26-27页 |
3.2 E12.5天胎鼠性别鉴定 | 第27-28页 |
3.3 流式细胞mPGCs分离 | 第28页 |
3.4 数据处理与质量评估 | 第28-29页 |
3.5 mPGCs的差异表达基因筛选 | 第29-30页 |
3.6 实时定量PCR验证测序结果 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
二、PGCs迁移过程中的通路分析 | 第33-47页 |
1 引言 | 第33页 |
2 材料和方法 | 第33-35页 |
2.1 实验材料 | 第33页 |
2.2 实验方法 | 第33-35页 |
3 实验结果 | 第35-44页 |
3.1 DEGs的GO分析与KEGGpathway分析 | 第35-37页 |
3.2 ErbBs信号通路 | 第37-38页 |
3.3 Ras信号通路和EGFR酪氨酸激酶抑制剂抗性信号通路 | 第38-40页 |
3.4 Focaladhesion信号通路 | 第40-41页 |
3.5 分析结果验证 | 第41-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-61页 |
附录 | 第61-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
攻读学位期间已发表学术论文 | 第66页 |