奶牛乳房炎三种主要致病菌多重PCR检测方法的建立
| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 奶牛乳房炎 | 第10页 |
| 1.2 奶牛乳房炎的分类 | 第10-11页 |
| 1.2.1 美国对奶牛乳房的分类 | 第10-11页 |
| 1.2.2 国内对乳房炎的分类 | 第11页 |
| 1.3 奶牛乳房炎的病因 | 第11-16页 |
| 1.3.1 病原微生物 | 第12-15页 |
| 1.3.2 环境方面 | 第15页 |
| 1.3.3 饲养管理方面 | 第15-16页 |
| 1.3.4 奶牛自身因素 | 第16页 |
| 1.4 奶牛乳房炎的发病机理 | 第16页 |
| 1.5 奶牛乳房炎的诊断方法 | 第16-19页 |
| 1.5.1 临床乳房炎诊断 | 第16-17页 |
| 1.5.2 乳汁中体细胞计数法 | 第17页 |
| 1.5.3 病原微生物的分离鉴定 | 第17页 |
| 1.5.4 乳汁的理化检测 | 第17-18页 |
| 1.5.5 PCR检测法 | 第18-19页 |
| 1.6 奶牛乳房炎的防治 | 第19-21页 |
| 1.6.1 奶牛乳房炎的防制 | 第19-20页 |
| 1.6.2 奶牛乳房炎的治疗 | 第20-21页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第21页 |
| 2 试验材料与方法 | 第21-26页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要试验仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试验试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 乳样 | 第22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 主要溶液和培养基的配制 | 第22-23页 |
| 2.2.2 细菌的培养 | 第23页 |
| 2.2.3 细菌基因组DNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.4 乳样中细菌基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.5 引物的设计 | 第24页 |
| 2.2.6 单一和多重PCR反应条件的优化 | 第24-25页 |
| 2.2.7 PCR产物的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.8 多重PCR方法特异性检测 | 第26页 |
| 2.2.9 单一和多重PCR方法敏感性检测 | 第26页 |
| 2.2.10 临床乳样的病原学鉴定 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-34页 |
| 3.1 PCR方法反应条件优化结果 | 第26-28页 |
| 3.2 测序结果 | 第28页 |
| 3.3 多重PCR特异性检测结果 | 第28-29页 |
| 3.4 单一和多重PCR敏感性检测结果 | 第29-31页 |
| 3.5 临床乳样病原学鉴定结果 | 第31-34页 |
| 3.5.1 生化试验结果 | 第31-33页 |
| 3.5.2 分子生物学鉴定结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 作者简介 | 第42页 |
