摘要 | 第6-8页 |
1 前言 | 第8-17页 |
1.1 肉牛发展概况 | 第8页 |
1.2 UCP3、THRSP基因的研究进展 | 第8-12页 |
1.2.1 UCP3基因研究进展 | 第8-11页 |
1.2.2 THRSP基因研究进展 | 第11-12页 |
1.3 三种常见的SNP检测方法概述 | 第12-14页 |
1.3.1 SNP标记在家畜育种中的应用 | 第12-13页 |
1.3.2 测序法 | 第13页 |
1.3.3 PCR-RFLP方法 | 第13页 |
1.3.4 PCR-SSCP方法 | 第13-14页 |
1.4 荧光定量PCR概述 | 第14-15页 |
1.4.1 荧光定量PCR的简介 | 第14页 |
1.4.2 荧光定量PCR的基本原理 | 第14-15页 |
1.4.3 荧光定量PCR定量分析的两种方法 | 第15页 |
1.4.4 荧光定量PCR的优点 | 第15页 |
1.5 本实验的研究内容及意义 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-34页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 实验主要试剂耗材 | 第17-18页 |
2.1.3 实验主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.4 常用溶液及试剂的配制 | 第19页 |
2.1.5 主要分子生物学数据库及分析软件 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-34页 |
2.2.1 实验动物屠宰及分割 | 第20页 |
2.2.2 评价指标和计算方法 | 第20-22页 |
2.2.3 肌内脂肪含量测定方法 | 第22页 |
2.2.4 引物设计及分析软件 | 第22-24页 |
2.2.5 UCP3基因与THRSP基因SNP位点的确定 | 第24-27页 |
2.2.6 利用实时荧光定量PCR技术对肌肉UCP3基因和THRSP基因的mRNA进行相对定量 | 第27-31页 |
2.2.7 数据分析 | 第31-34页 |
3 结果与分析 | 第34-53页 |
3.1 总DNA提取结果 | 第34页 |
3.2 UCP3与THRSP基因DNA部分片段扩增结果鉴定 | 第34-36页 |
3.3 UCP3与THRSP基因SNPs位点的检测及关联分析 | 第36-48页 |
3.3.1 UCP3基因SNPs位点的确认及关联分析 | 第36-42页 |
3.3.2 THRSP基因SNPs位点的确认及关联分析 | 第42-48页 |
3.4 牛的总RNA检测 | 第48页 |
3.5 UCP3、THRSP、B-ACTIN基因DNA部分片段扩增结果检测 | 第48页 |
3.6 UCP3、THRSP基因相对定量标准曲线和溶解曲线 | 第48-51页 |
3.7 UCP3、THRSP基因相对表达量及相关分析 | 第51-53页 |
3.7.1 UCP3基因mRNA表达量测定结果 | 第51页 |
3.7.2 THRSP基因mRNA表达量测定结果 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
4.1 全文讨论 | 第53-54页 |
4.2 实验动物背景讨论 | 第54页 |
4.3 实时荧光定量PCR技术讨论 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
Abstract | 第62-63页 |
附录1 | 第64-66页 |
附录2 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |