| 摘要 | 第4-5页 |
| SUMMARY | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1. 胚胎干细胞及其理论意义 | 第10页 |
| 2. 牛ES细胞系的国内外研究进展 | 第10-11页 |
| 3. 影响牛ES细胞建系的因素 | 第11-15页 |
| 3.1 细胞因子 | 第12页 |
| 3.2 特异多能性标记基因和表面标记 | 第12-14页 |
| 3.3 传代方式 | 第14-15页 |
| 3.4 饲养层 | 第15页 |
| 4. 利用RNA-Seq技术对牛ICM进行转录组分析 | 第15-16页 |
| 4.1 转录组学与转录组 | 第15页 |
| 4.2 RNA-Seq及其研究进展 | 第15-16页 |
| 5. 问题与展望 | 第16-17页 |
| 第二章 基于RNA-Seq技术的牛囊胚ICM与TE差异表达基因筛选 | 第17-38页 |
| 1. 试验材料 | 第17-18页 |
| 1.1 主要试验试剂与溶液配制 | 第17-18页 |
| 2. 试验方法 | 第18-25页 |
| 2.1 体外受精囊胚的生产 | 第18-19页 |
| 2.2 牛囊胚ICM和TE的分选 | 第19-20页 |
| 2.3 RNA-Seq | 第20页 |
| 2.4 标准信息分析 | 第20-24页 |
| 2.5 qRT-PCR检测牛囊胚ICM和TE基因的差异表达 | 第24-25页 |
| 3. 结果与分析 | 第25-35页 |
| 3.1 牛囊胚ICM和TE的分选 | 第25-26页 |
| 3.2 RNA-Seq测序评估 | 第26-29页 |
| 3.3 基因表达定量 | 第29-30页 |
| 3.4 差异表达基因筛选 | 第30-32页 |
| 3.5 Gene Ontology功能显著性富集分析 | 第32-33页 |
| 3.6 KEGG Pathway显著性富集分析 | 第33-34页 |
| 3.7 qRT-PCR验证ICM和TE差异表达基因 | 第34-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| 5. 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 牛囊胚ICM克隆的体外培养 | 第38-49页 |
| 1. 材料与方法 | 第39-42页 |
| 1.1 主要试剂 | 第39-40页 |
| 1.2 方法 | 第40-42页 |
| 2. 结果与分析 | 第42-46页 |
| 2.1 牛囊胚ICM分离与培养 | 第42-43页 |
| 2.2 ICM克隆中多能性标记基因及表面标记检测 | 第43-45页 |
| 2.3 牛囊胚ICM和TE的分选 | 第45页 |
| 2.4 ICM和TE多能性基因的表达 | 第45-46页 |
| 3. 讨论 | 第46-48页 |
| 3.1 牛囊胚ICM体外培养及免疫荧光染色 | 第46-47页 |
| 3.2 SOX2、OCT4和NANOG在ICM和TE上的表达差异 | 第47-48页 |
| 4. 结论 | 第48-49页 |
| 第四章 全文结论 | 第49-50页 |
| 1. 基于RNA-Seq技术的牛囊胚ICM与TE差异表达基因筛选 | 第49页 |
| 2. 牛囊胚ICM克隆的体外培养 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 个人简介 | 第60-61页 |
| 导师简介 | 第61-62页 |
