摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第1章 蛋白质化学合成简介 | 第12-51页 |
1.1 本章引言 | 第12页 |
1.2 早期蛋白质化学合成历史简介 | 第12-15页 |
1.3 蛋白质固相合成 | 第15-25页 |
1.3.1 蛋白质固相合成中的树脂 | 第16-17页 |
1.3.2 蛋白质固相合成中的连接策略 | 第17-19页 |
1.3.3 蛋白质固相合成中的缩合试剂 | 第19-22页 |
1.3.4 蛋白质固相合成中的困难序列 | 第22-23页 |
1.3.5 Fmoc/t-Bu蛋白质固相多肽合成 | 第23-25页 |
1.4 蛋白质肽片段连接 | 第25-33页 |
1.4.1 自然化学连接 | 第26-27页 |
1.4.2 KAHA连接 | 第27-29页 |
1.4.3 Thr/Ser连接 | 第29-30页 |
1.4.4 自然化学连接中含Cys肽片段的获取 | 第30-31页 |
1.4.5 自然化学连接中多肽硫酯片段的获取 | 第31-33页 |
1.5 蛋白质化学合成应用 | 第33-38页 |
1.5.1 化学合成膜蛋白用于生化研究 | 第33-35页 |
1.5.2 化学合成镜像蛋白用于结构研究 | 第35-36页 |
1.5.3 化学合成探针蛋白用于生化研究 | 第36-38页 |
1.6 本章小结 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-51页 |
第2章 化学合成Di-SUMO2蛋白用于生化研究及结构尝试 | 第51-90页 |
2.1 本章引言 | 第51-53页 |
2.2 研究思路 | 第53-55页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第55-69页 |
2.3.1 化学合成Di-SUMO2蛋白 | 第55-63页 |
2.3.2 化学合成Di-SUMO2与表达linear Di-SUMO2的ITC测试 | 第63-64页 |
2.3.3 化学合成Di-SUMO2蛋白的结构解析尝试 | 第64-69页 |
2.4 本章小结 | 第69-70页 |
2.5 实验部分 | 第70-85页 |
2.5.1 材料和仪器 | 第70-71页 |
2.5.2 化学合成Di-SUMO2的实验过程与数据 | 第71-83页 |
2.5.3 实验中所需表达蛋白的获取 | 第83-85页 |
2.5.4 圆二色谱(CD)实验 | 第85页 |
2.5.5 ITC实验 | 第85页 |
2.5.6 准外消旋结晶实验 | 第85页 |
参考文献 | 第85-90页 |
第3章 化学合成Di-SUMO2光交联探针用于SUMO-SIM相互作用的研究 | 第90-119页 |
3.1 本章引言 | 第90-93页 |
3.2 研究思路 | 第93-95页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第95-107页 |
3.3.1 光交联基团的选择 | 第95-98页 |
3.3.2 化学合成Di-SUMO2光交联探针 | 第98-102页 |
3.3.3 Di-SUMO2光交联探针与RNF4和RNF111的交联验证 | 第102-104页 |
3.3.4 Di-SUMO2光交联探针在复杂体系下的交联验证 | 第104-105页 |
3.3.5 Di-SUMO2光交联探针在竞争性条件下的交联验证 | 第105-106页 |
3.3.6 Di-SUMO2光交联探针与细胞裂解液的交联实验 | 第106-107页 |
3.4 本章小结 | 第107-108页 |
3.5 实验部分 | 第108-114页 |
3.5.1 材料和仪器 | 第108-109页 |
3.5.2 化学合成Di-SUMO2光交联探针的实验过程与数据 | 第109-111页 |
3.5.3 RNF111的表达与纯化 | 第111-112页 |
3.5.4 BCA法测量蛋白浓度 | 第112-113页 |
3.5.5 光交联探针与RNF4和RNF111的交联实验 | 第113-114页 |
3.5.6 光交联探针与RNF4在复杂体系下的交联实验 | 第114页 |
3.5.7 linear Di-SUMO2的竞争性抑制实验 | 第114页 |
3.5.8 Di-SUMO2光交联探针与HeLa细胞裂解液的交联实验 | 第114页 |
参考文献 | 第114-119页 |
第4章 化学合成药用利那洛肽用于结构研究 | 第119-130页 |
4.1 本章引言 | 第119-120页 |
4.2 研究思路 | 第120页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第120-124页 |
4.3.1 化学合成利那洛肽 | 第121-123页 |
4.3.2 利那洛肽的生化测试 | 第123-124页 |
4.3.3 利那洛肽的结构获取 | 第124页 |
4.4 本章小结 | 第124-125页 |
4.5 实验部分 | 第125-126页 |
4.5.1 化学合成利那洛肽的实验过程与数据 | 第125页 |
4.5.2 圆二色谱(CD)实验 | 第125-126页 |
4.5.3 外消旋结晶实验 | 第126页 |
参考文献 | 第126-130页 |
致谢 | 第130-131页 |
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第131页 |