| 致谢 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述与开题 | 第8-18页 |
| 1.1 马尾松概况 | 第8页 |
| 1.2 马尾松基因研究 | 第8-9页 |
| 1.3 马尾松种子园建设及其相关研究 | 第9-10页 |
| 1.4 高等植物开花相关基因 | 第10-16页 |
| 1.4.1 高等植物成花的相关基因 | 第10-11页 |
| 1.4.2 植物开花基因调控机制 | 第11-12页 |
| 1.4.3 花器官发育模型 | 第12-13页 |
| 1.4.4 FLO/LFY基因及其同源基因的研究进展 | 第13页 |
| 1.4.5 FLO/LFY及其同源基因的结构 | 第13-15页 |
| 1.4.6 TFL1及其同源基因 | 第15-16页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 1.6 技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 马尾松LFY、NLY和TFL1基因的克隆 | 第18-45页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌种和质粒 | 第18页 |
| 2.1.3 试验试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 引物合成和测序 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 马尾松总RNA的提取 | 第19页 |
| 2.2.2 RNA的纯化 | 第19-20页 |
| 2.2.3 马尾松总RNA完整性检测 | 第20页 |
| 2.2.4 cDNA第一条链的合成 | 第20页 |
| 2.2.5 中间片段的扩增和回收 | 第20-23页 |
| 2.2.6 基因末端快速克隆 | 第23-26页 |
| 2.2.7 马尾松LFY、NLY和TFL1基因全长的克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.8 马尾松基因组织特异性检测 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-30页 |
| 2.3.1 马尾松总RNA的提取结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 马尾松LFY、NLY和TFL1的克隆结果 | 第29-30页 |
| 2.4 马尾松LFY、NLY和TFL1的序列分析 | 第30-43页 |
| 2.4.1 全长的拼接和检验 | 第30-31页 |
| 2.4.2 同源系列比对 | 第31-34页 |
| 2.4.3 蛋白质一级结构与理化特征分析 | 第34-36页 |
| 2.4.4 蛋白质二级结构 | 第36-37页 |
| 2.4.5 蛋白质跨膜螺旋结构分析 | 第37-38页 |
| 2.4.6 蛋白质激酶磷酸化修饰位点预测 | 第38页 |
| 2.4.7 蛋白质结构域分析 | 第38-39页 |
| 2.4.8 系统发育进化树 | 第39-42页 |
| 2.4.9 组织特异性表达 | 第42-43页 |
| 2.5 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 PmLFY、PmNLY、PmTFL1基因真核表达载体构建 | 第45-53页 |
| 3.1 试验材料 | 第45页 |
| 3.1.1 菌种和质粒 | 第45页 |
| 3.1.2 试剂 | 第45页 |
| 3.2 试验方法 | 第45-49页 |
| 3.2.1 植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.2.1.1 酶切引物的设计 | 第45-46页 |
| 3.2.1.2 PmLFY、PmNLY、PmTFL1酶切片段的PCR扩增 | 第46页 |
| 3.2.1.3 PmLFY、PmNLY、PmTFL1全长基因和pBI121表达载体的克隆和检测 | 第46页 |
| 3.2.1.4 根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备 | 第46页 |
| 3.2.1.5 质粒提取 | 第46页 |
| 3.2.1.6 质粒的酶切 | 第46-47页 |
| 3.2.2 表达载体的连接与转化 | 第47页 |
| 3.2.3 叶盘法转化烟草 | 第47-48页 |
| 3.2.4 转PmLFY基因烟草苗的检测 | 第48-49页 |
| 3.3 结果与分析 | 第49-52页 |
| 3.3.1 酶切质粒电泳条带 | 第49-50页 |
| 3.3.2 PCR基因组检测 | 第50页 |
| 3.3.3 反转录PCR检测转基因烟草的表达 | 第50页 |
| 3.3.4 转基因烟草形态学表型观察 | 第50-51页 |
| 3.3.5 烟草花期观察 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-53页 |
| 第四章 结论与展望 | 第53-55页 |
| 4.1 结论 | 第53页 |
| 4.2 展望 | 第53-55页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
