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斑节对虾卵巢发育的蛋白组研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-7页
第一章 引言第11-22页
    1.1. 斑节对虾第11页
    1.2. 斑节对虾的卵巢发育第11-12页
    1.3. 蛋白质组学第12-18页
        1.3.1. 蛋白质组学(Proteomics)第12-14页
        1.3.2. 蛋白质组学研究技术第14-17页
        1.3.3. 生物信息学分析第17页
        1.3.4. 蛋白质组学在水产养殖生物上的研究进展第17-18页
    1.4. UPP的组成与特性及其在生殖调控中的研究第18-20页
        1.4.1. UPP的组成及其特性第18-20页
        1.4.2. 泛素系统在虾蟹类中的研究进展第20页
    1.5. 本研究的目的和意义第20-22页
第二章 斑节对虾卵巢发育Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的蛋白质组研究第22-47页
    2.1. 实验材料第22-23页
        2.1.1 斑节对虾第22页
        2.1.2 主要试剂及仪器第22-23页
    2.2. 实验方法第23-30页
        2.2.1. 卵巢组织切片第23页
        2.2.2. 样品制备第23-24页
        2.2.3. 一向等电聚焦第24-26页
            2.2.3.1. 蛋白溶解第24页
            2.2.3.2. 蛋白定量第24-25页
            2.2.3.3. 上样液配制第25页
            2.2.3.4. 胶条泡胀第25页
            2.2.3.5. 等点聚焦第25页
            2.2.3.6. 胶条的保存第25-26页
        2.2.4. 二向电泳(垂直电泳)第26-27页
            2.2.4.1. 灌胶第26页
            2.2.4.2. 二向实验器具的准备第26页
            2.2.4.3. 胶条的平衡第26页
            2.2.4.4. 二向电泳第26-27页
        2.2.5. 染色第27-28页
            2.2.5.1. 凝胶转移第27页
            2.2.5.2. 染色第27-28页
            2.2.5.3. 凝胶的扫描与保存第28页
        2.2.6. 图像的分析第28页
        2.2.7. 质谱(由辉骏生物公司处理)第28-30页
            2.2.7.1. 质谱前处理第28-29页
            2.2.7.2. 质谱检测第29-30页
    2.3. 结果与分析第30-39页
        2.3.1. Bradford法绘制蛋白定量标准曲线第30-31页
        2.3.2. 卵巢组织切片分期第31-32页
        2.3.3. 卵巢组织双向电泳图谱及其图谱分析第32-34页
        2.3.4. 斑节对虾卵巢Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组织差异蛋白质谱鉴定与分析第34-39页
    2.4. 讨论第39-47页
        2.4.1. 双向电泳凝胶图谱的建立第39页
        2.4.2. 参考图谱质谱鉴别相关蛋白的讨论第39-47页
第三章 斑节对虾PmP5CDh、PmGST基因的表达分析第47-54页
    3.1. 实验材料第47-48页
        3.1.1. 斑节对虾第47页
        3.1.2. 主要试剂和仪器第47页
        3.1.3. 引物第47-48页
    3.2. 实验方法第48页
        3.2.1. 斑节对虾RNA的提取及逆转录第48页
        3.2.2. PmP5CDh和PmGST在斑节对虾各组织中及卵巢不同发育时期的表达分析第48页
    3.3. 结果与分析第48-51页
        3.3.1. PmP5CDh和PmGST基因在斑节对虾个组织中的表达分析第48-50页
        3.3.2. PmP5CDh和PmGST基因在斑节对虾卵巢发育各时期中的表达分析第50-51页
    3.4. 讨论第51-54页
        3.4.1. δ-1-吡咯啉-5-羧酸脱氢酶第51-52页
        3.4.2. 谷胱甘肽硫转移酶第52-54页
第四章 斑节对虾泛素融合蛋白UbS27、UbL40 基因的克隆与序列分析第54-73页
    4.1. 实验材料第54-55页
        4.1.1. 斑节对虾第54页
        4.1.2. 主要试剂和仪器第54-55页
        4.1.3. 引物第55页
    4.2. 实验方法第55-58页
        4.2.1. 斑节对虾RNA的提取及逆转录第55-56页
        4.2.2. RACE获得基因全长第56页
        4.2.3. 基因克隆第56-57页
        4.2.4. 序列及系统发生分析第57页
        4.2.5. UbS27 和UbL40 在斑节对虾各组织中及卵巢不同发育时期的表达分析第57-58页
    4.3. 结果与分析第58-70页
        4.3.1. PmUbS27 和PmUbL40 的克隆与cDNA序列分析第58-59页
        4.3.2. PmUbS27 和PmUbL40 二级结构和三级结构预测第59-61页
        4.3.3. PmUbS27 和PmUbL40 与其他物种UbL40 序列比对及系统进化树分析第61-67页
        4.3.4. PmUbS27 和PmUbL40 在不同组织中的表达第67-69页
        4.3.5. PmUbS27 和PmUbL40 在卵巢发育各期的表达分析第69-70页
    4.4. 讨论第70-73页
小结第73-74页
参考文献第74-84页
攻读学位期间发表的论文目录第84页
参加的学术会议第84-85页
致谢第85页

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