| 符号说明 | 第5-12页 |
| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 1 前言 | 第17-31页 |
| 1.1 扩展蛋白超家族 | 第17-18页 |
| 1.2 扩展蛋白的结构特性 | 第18-19页 |
| 1.3 扩展蛋白的进化 | 第19-20页 |
| 1.4 扩展蛋白在植物生长和发育中的作用 | 第20-21页 |
| 1.5 扩展蛋白与植物的非生物胁迫耐性 | 第21-23页 |
| 1.5.1 扩展蛋白与植物的干旱胁迫耐性 | 第22页 |
| 1.5.2 扩展蛋白与植物的盐胁迫耐性 | 第22页 |
| 1.5.3 扩展蛋白与植物的高温胁迫耐性 | 第22-23页 |
| 1.5.4 扩展蛋白与植物其他非生物胁迫的耐性 | 第23页 |
| 1.6 扩展蛋白与植物的生物胁迫耐性 | 第23-24页 |
| 1.7 扩展蛋白表达对激素的响应 | 第24-28页 |
| 1.7.1 扩展蛋白与乙烯调节的生长发育 | 第24-25页 |
| 1.7.2 扩展蛋白与生长素调节的生长发育 | 第25-27页 |
| 1.7.3 扩展蛋白对赤霉素和脱落酸的响应 | 第27-28页 |
| 1.7.4 扩展蛋白对茉莉酸和油菜素内酯的响应 | 第28页 |
| 1.8 扩展蛋白与植物的磷适应能力 | 第28页 |
| 1.9 通过转基因途径和突变体来研究扩展蛋白的生物学功能 | 第28-29页 |
| 1.10 本研究的目的意义 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 2.1.2 材料的培养和处理 | 第31页 |
| 2.1.2.1 小麦的培养和处理 | 第31页 |
| 2.1.2.2 烟草的培养及处理 | 第31页 |
| 2.1.2.3 拟南芥的培养 | 第31页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第31-32页 |
| 2.1.4 酶与各种生化试剂 | 第32页 |
| 2.1.5 PCR引物 | 第32-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-49页 |
| 2.2.1 利用Trizol试剂盒提取RNA | 第34-35页 |
| 2.2.2 反转录cDNA第一条链的合成 | 第35-36页 |
| 2.2.3 CTAB法提取基因组DNA | 第36页 |
| 2.2.4 TAIL-PCR | 第36-38页 |
| 2.2.5 TaEXPB23启动子与GUS报告基因表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第39-40页 |
| 2.2.7 转化菌落PCR鉴定 | 第40页 |
| 2.2.8 质粒DNA的提取 | 第40页 |
| 2.2.9 目的片段和质粒DNA的酶切鉴定 | 第40页 |
| 2.2.10 目的片段与质粒DNA的连接 | 第40-41页 |
| 2.2.11 根癌农杆菌LBA4404/GV3101感受态细胞的制备和转化 | 第41页 |
| 2.2.11.1 根癌农杆菌LBA4404/GV3101感受态细胞的制备 | 第41页 |
| 2.2.11.2 冻融法转化根癌农杆菌LBA4404/GV3101 | 第41页 |
| 2.2.12 TaEXPB23：：GFP融合蛋白洋葱表皮亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 2.2.13 农杆菌介导的烟草转化 | 第42-43页 |
| 2.2.14 转基因植株的PCR检测 | 第43-44页 |
| 2.2.15 GUS染色技术检测目的基因的时空表达 | 第44-45页 |
| 2.2.16 荧光定量PCR检测基因的表达 | 第45-46页 |
| 2.2.17 烟草叶片扩展蛋白活性的检测 | 第46-47页 |
| 2.2.18 生理指标的测定 | 第47-48页 |
| 2.2.18.1 保水能力(WRA)的测定 | 第47页 |
| 2.2.18.2 丙二醛含量的测定 | 第47页 |
| 2.2.18.3 光和参数的测定 | 第47页 |
| 2.2.18.4 抗氧化酶活性测定 | 第47页 |
| 2.2.18.5 叶绿素含量的测定 | 第47-48页 |
| 2.2.18.6 过氧化物酶的提取、分离和测定 | 第48页 |
| 2.2.18.7 扩展蛋白抗体处理 | 第48页 |
| 2.2.19 统计分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-80页 |
| 3.1 TaEXPB23的亚细胞定位 | 第49-50页 |
| 3.1.1 TaEXPB23：：GFP表达载体的构建 | 第49页 |
| 3.1.2 TaEXPB23的亚细胞定位 | 第49-50页 |
| 3.2 TaEXPB23的时空表达模式 | 第50-55页 |
| 3.2.1 小麦胚芽鞘生长过程中TaEXPB23的表达模式 | 第50-51页 |
| 3.2.2 TaEXPB23启动子的克隆及表达分析 | 第51-53页 |
| 3.2.2.1 TaEXPB23基因启动子的克隆及反应元件初步预测 | 第51-53页 |
| 3.2.2.2 ProTaEXPB23：：GUS表达载体的构建和分析 | 第53页 |
| 3.2.3 TaEXPB23基因表达对激素的响应模式 | 第53-54页 |
| 3.2.4 TaEXPB23基因表达对逆境的响应模式 | 第54-55页 |
| 3.3 过表达TaEXPB23转基因烟草的抗逆性分析 | 第55-59页 |
| 3.3.1 过表达TaEXPB23转基因烟草的高温胁迫抗性分析 | 第55-56页 |
| 3.3.2 过表达TaEXPB23转基因烟草的耐盐性分析 | 第56-59页 |
| 3.3.3 过表达TaEXPB23转基因烟草的耐水分胁迫能力分析 | 第59页 |
| 3.4 TaEXPB23在植物磷适应中的功能分析 | 第59-67页 |
| 3.4.1 小麦胚芽鞘细胞的伸长受磷调节 | 第59-60页 |
| 3.4.2 小麦胚芽鞘扩展蛋白活性受磷调节 | 第60-61页 |
| 3.4.3 小麦中多个扩展蛋白基因受磷调节 | 第61-63页 |
| 3.4.4 TaEXPB23的表达受磷调节 | 第63-65页 |
| 3.4.5 过表达TaEXPB23烟草对不同磷浓度的适应能力提高 | 第65-67页 |
| 3.4.5.1 过表达TaEXPB23烟草的磷含量和生物量 | 第65页 |
| 3.4.5.2 不同磷浓度下过表达TaEXPB23烟草的表型观察 | 第65-66页 |
| 3.4.5.3 不同磷浓度下过表达TaEXPB23烟草的光合参数检测 | 第66-67页 |
| 3.5 过表达TaEXPB23转基因烟草植株的抗氧化胁迫能力分析 | 第67-80页 |
| 3.5.1 小麦TaEXPB23基因表达受氧化胁迫诱导 | 第67-68页 |
| 3.5.2 过表达TaEXPB23转基因烟草的氧化胁迫抗性增强 | 第68-70页 |
| 3.5.3 氧化胁迫对转基因和野生型烟草抗氧化相关基因的影响 | 第70-71页 |
| 3.5.4 氧化胁迫条件下转基因烟草和野生型的抗氧化酶活性 | 第71-73页 |
| 3.5.5 扩展蛋白抗体处理降低了抗氧化能力和过氧化物酶活性 | 第73-75页 |
| 3.5.6 atexpb2突变体中过氧化物酶的活性降低 | 第75-80页 |
| 4 讨论 | 第80-85页 |
| 5 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-97页 |
| 附录 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第99页 |
