| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-36页 |
| 1.1 选题背景及意义 | 第11-13页 |
| 1.2 细胞核内染色质的空间构象及其功能意义 | 第13-18页 |
| 1.2.1 细胞核与染色质 | 第13-14页 |
| 1.2.2 细胞核内染色质/染色体的空间构象形式 | 第14-16页 |
| 1.2.3 细胞核内染色质空间构象的稳定存在 | 第16-17页 |
| 1.2.4 决定细胞核内染色质非随机空间构象的因素 | 第17-18页 |
| 1.2.5 细胞核内染色质的空间构象与基因表达相关 | 第18页 |
| 1.3 细胞内遗传物质的特异性标记——三维荧光原位杂交技术 | 第18-22页 |
| 1.3.1 三维荧光原位杂交技术 3D-FISH | 第18-21页 |
| 1.3.2 3D-FISH 多色标记，即“一对一”标记 | 第21页 |
| 1.3.3 FISH 组合标记 M-FISH 和 SKY 技术 | 第21-22页 |
| 1.4 三维荧光显微镜技术 | 第22-34页 |
| 1.4.1 宽场荧光显微技术 | 第23-24页 |
| 1.4.2 荧光共聚焦显微技术 | 第24-25页 |
| 1.4.3 双光子荧光显微技术 | 第25-28页 |
| 1.4.4 超分辨率荧光显微技术 | 第28-34页 |
| 1.5 论文结构安排 | 第34-36页 |
| 第2章 实验方法 | 第36-59页 |
| 2.1 生物样品制备 | 第36-40页 |
| 2.1.1 小鼠卵母细胞样品制备 | 第36-37页 |
| 2.1.2 外周血/骨髓单个核细胞 3D-FISH 样品制备 | 第37-40页 |
| 2.2 实验仪器 | 第40-43页 |
| 2.2.1 双光子荧光显微镜系统 | 第40-42页 |
| 2.2.2 Nikon A1Rsi 共聚焦荧光显微成像系统 | 第42-43页 |
| 2.3 图像处理方法 | 第43-58页 |
| 2.3.1 图像去卷积 | 第43-46页 |
| 2.3.2 图像噪声分析及去噪 | 第46-49页 |
| 2.3.3 3D-FISH 图像双标通道间串扰的解决 | 第49-52页 |
| 2.3.4 图像自动分割 | 第52-55页 |
| 2.3.5 卵母细胞图像半自动分割过程 | 第55-58页 |
| 2.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第3章 实验方法改进之一：三维双光子成像的荧光轴向衰减对小鼠卵母细胞染色体体积量化影响的矫正 | 第59-64页 |
| 3.1 本章引言 | 第59-60页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第60-61页 |
| 3.2.1 生物样品制备 | 第60页 |
| 3.2.2 小鼠卵母细胞染色体的三维双光子荧光成像 | 第60页 |
| 3.2.3 三维双光子荧光图像的荧光轴向衰减矫正 | 第60-61页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第61-63页 |
| 3.3.1 小鼠卵母细胞染色体的三维双光子荧光图像的荧光轴向衰减严重 | 第61-62页 |
| 3.3.2 三维双光子荧光成像的荧光轴向衰减对小鼠卵母细胞内染色体体积量化影响矫正 | 第62-63页 |
| 3.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 第4章 实验方法改进之二：3D-FISH“双色五标”方法 | 第64-74页 |
| 4.1 引言 | 第64-65页 |
| 4.2 材料与方法 | 第65-68页 |
| 4.2.1 细胞的获取、固定及 3D-FISH 预处理步骤 | 第65页 |
| 4.2.2 3D-FISH 杂交与目标物标记 | 第65-66页 |
| 4.2.3 显微镜与图像处理过程 | 第66页 |
| 4.2.4 目标物辨别流程 | 第66-68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-72页 |
| 4.3.1 3D-FISH“双色五标”方法的实现 | 第68-70页 |
| 4.3.2 3D-FISH“双色五标”方法的适用条件及适用对象 | 第70-71页 |
| 4.3.3 3D-FISH“双色五标”方法应用实例 | 第71-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72-74页 |
| 第5章 化疗药物 5-Azacytidine 作用下体外成熟小鼠卵母细胞染色体结构及空间构象的量化表征 | 第74-88页 |
| 5.1 引言 | 第74-75页 |
| 5.2 实验与方法 | 第75-78页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第75页 |
| 5.2.2 小鼠卵母细胞染色体的三维荧光全染 | 第75-76页 |
| 5.2.3 小鼠卵母细胞染色体的三维双光子荧光成像 | 第76-77页 |
| 5.2.4 小鼠卵母细胞细胞早期凋亡和核成熟检测 | 第77-78页 |
| 5.2.5 实时 RT-PCR 检测小鼠卵母细胞 Cas 3, Cas 8, Cas 9, Gdf 9 和 Bmp 15 的mRNA 水平 | 第78页 |
| 5.2.6 实验可重复性与数据统计学处理 | 第78页 |
| 5.3 结果 | 第78-84页 |
| 5.3.1 化疗药物 5-AzaC 作用下的体外成熟小鼠卵母细胞染色体凝集程度研究 | 第78-80页 |
| 5.3.2 化疗药物 5-AzaC 作用下的体外成熟小鼠卵母细胞染色体三维空间构象研究 | 第80-82页 |
| 5.3.3 化疗药物 5-AzaC 作用下的体外成熟小鼠卵母细胞早期凋亡和卵母细胞核成熟现象研究 | 第82-84页 |
| 5.4 讨论 | 第84-86页 |
| 5.5 本章小结 | 第86-88页 |
| 第6章 化疗作用下 AML M2 t(8;21)(q22;q22)患者单个核细胞内 CTs 8 和 21 空间构象的量化表征 | 第88-104页 |
| 6.1 引言 | 第88-90页 |
| 6.2 材料与方法 | 第90-92页 |
| 6.2.1 取样 | 第90页 |
| 6.2.2 3D-FISH 样片制备及成像条件 | 第90-91页 |
| 6.2.3 样本空间构象的定量分析 | 第91-92页 |
| 6.2.4 统计学分析 | 第92页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第92-102页 |
| 6.3.1 染色质三维空间构象对 AMLM2 t(8;21)(q22;q22)患者病情的早期预测 | 第92-94页 |
| 6.3.2 AMLM2 t(8;21)(q22;q22)患者骨髓单个核细胞内染色质易位模式研究 | 第94-95页 |
| 6.3.3 化疗对细胞核内 CT8 和 CT21 三维空间构象的影响 | 第95-96页 |
| 6.3.4 相随细胞内染色质特殊的三维空间构象 | 第96-99页 |
| 6.3.5 外周血单个核细胞与骨髓单个核细胞内染色质三维空间构象的异同 | 第99-102页 |
| 6.4 本章小结 | 第102-104页 |
| 第7章 总结与展望 | 第104-108页 |
| 7.1 工作总结 | 第104-106页 |
| 7.2 创新点与展望 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-118页 |
| 致谢 | 第118-120页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第120-121页 |
