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综合应用液体核磁共振和电生理方法揭示钾离子通道调节亚基对通道亚基的作用机制

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第11-27页
    1.1 离子通道第11-13页
    1.2 钾离子通道第13-19页
        1.2.1 引言第13-15页
        1.2.2 电压门控钾离子通道第15-18页
        1.2.3 电压门控钾离子通道的辅助亚基第18-19页
    1.3 膜片钳技术第19-22页
        1.3.1 膜片钳技术的简介第19页
        1.3.2 膜片钳技术的类型第19-21页
        1.3.3 膜片钳技术的主要应用第21-22页
    1.4 本文主要研究内容第22-23页
    参考文献第23-27页
第二章 调节亚基KCNE2对KCNQ1通道的作用机制研究第27-69页
    2.1 背景介绍第27-35页
        2.1.1 KCNQ1蛋白第27-30页
        2.1.2 KCNE蛋白家族第30-33页
        2.1.3 KCNE蛋白对KCNQ1通道的研究现状第33-35页
    2.2 实验材料和方法第35-41页
        2.2.1 实验材料和仪器第35页
        2.2.2 质粒构建第35-37页
        2.2.3 细胞培养第37-38页
        2.2.4 细胞转染和滴片第38页
        2.2.5 免疫荧光实验第38-39页
        2.2.6 荧光成像第39页
        2.2.7 电生理实验第39页
        2.2.8 电生理数据分析第39-40页
        2.2.9 分子模拟第40-41页
    2.3 实验结果和讨论第41-56页
        2.3.1 KCNE2的前期实验第41页
        2.3.2 去污剂中KCNE2的液体核磁共振结构解析第41-42页
        2.3.3 KCNE1和KCNE2的序列及对KCNQ1通道的功能比对第42-43页
        2.3.4 KCNEs的C端对KCNQ1的调节作用第43-46页
        2.3.5 KCNE1/KCNE2嵌合体对KCNQ1通道的调节特性第46-48页
        2.3.6 KCNE2的N末端对KCNQ1细胞膜表面表达的影响第48-51页
        2.3.7 鉴别KCNE跨膜区(KCNE-TMDs)和KCNQ1的相互作用位点第51-53页
        2.3.8 KCNQ1/KCNE-TMDs的分子模拟和相互作用模型第53-56页
    2.4 讨论和总结第56-59页
    参考文献第59-69页
第三章 MPS1的基本结构和功能第69-87页
    3.1 研究背景第69-72页
    3.2 实验方法和结果第72-82页
        3.2.1 MPS-1蛋白的结构预测第72-73页
        3.2.2 MPS-1蛋白的克隆、表达和纯化第73-74页
        3.2.3 MPS-1蛋白剪切突变体的确定及表达纯化第74-76页
        3.2.4 MPS-1蛋白剪切突变体的光谱第76-77页
        3.2.5 MPS-1(134-256)/Mps-1-123蛋白的结构解析第77-79页
        3.2.6 MPS-1(134-256)蛋白的二级结构分析第79-82页
        3.2.7 MPS-1(134-256)蛋白的功能检测第82页
    3.3 讨论和总结第82-85页
    参考文献第85-87页
第四章 BK钾离子通道调节亚基的功能调节初探第87-113页
    4.1 BK钾离子通道的背景知识综述第87-98页
        4.1.1 引言第87页
        4.1.2 BK钾离子通道的结构和调节亚基第87-92页
        4.1.3 BK钾离子通道的生理机能和功能第92-94页
        4.1.4 BK钾离子通道的门控假说第94-96页
        4.1.5 小结第96-98页
    4.2 实验方法和结果第98-104页
        4.2.1 实验材料和方法第98页
        4.2.2 实验思路第98-99页
        4.2.3 BK钾离子通道α亚基单独表达的电生理实验第99页
        4.2.4 BK钾离子通道α亚基和β1亚基共表达的电生理实验第99-100页
        4.2.5 BK钾离子通道α亚基和β2亚基共表达的电生理实验第100-101页
        4.2.6 IbTX对BK钾离子通道的抑制作用研究第101-104页
    4.3 总结第104-105页
    参考文献第105-113页
附录第113-117页
    附录1 细胞培养相关培养基和试剂第113-114页
    附录2 全细胞电生理相关溶液配方第114-115页
    附录3 蛋白表达和纯化相关溶液配方第115-117页
致谢第117-119页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第119页

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