对虾溶菌酶重组蛋白在大肠杆菌表达及包涵体复性研究
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-28页 |
| 1.1 溶菌酶的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 溶菌酶的简介 | 第10页 |
| 1.1.2 溶菌酶的发展史 | 第10-11页 |
| 1.1.3 溶菌酶的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.4 溶菌酶的理化性质 | 第12页 |
| 1.2 海洋动物溶菌酶的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.3 溶菌酶的应用 | 第13-16页 |
| 1.3.1 溶菌酶在食品行业的应用 | 第13-15页 |
| 1.3.2 溶菌酶在饲料行业的应用 | 第15页 |
| 1.3.3 溶菌酶在医疗疾病中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3.4 溶菌酶在其他领域的应用 | 第16页 |
| 1.4 重组蛋白在原核细胞中的表达 | 第16-20页 |
| 1.4.1 原核表达系统 | 第16-17页 |
| 1.4.2 重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达策略 | 第17-20页 |
| 1.5 包涵体的研究进展 | 第20-25页 |
| 1.5.1 包涵体的形成机制 | 第20-21页 |
| 1.5.2 包涵体的分离、洗涤和溶解 | 第21页 |
| 1.5.3 包涵体蛋白的体外折叠机制 | 第21-22页 |
| 1.5.4 蛋白质复性方法 | 第22-25页 |
| 1.6 本实验的内容、目的、意义和主要技术路线 | 第25-28页 |
| 1.6.1 实验内容 | 第25页 |
| 1.6.2 实验目的 | 第25页 |
| 1.6.3 实验意义 | 第25-27页 |
| 1.6.4 主要技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-48页 |
| 2.1 目的基因在大肠杆菌中表达研究 | 第28-39页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第28-32页 |
| 2.1.2 方法与步骤 | 第32-39页 |
| 2.2 中国明对虾溶菌酶包涵体复性 | 第39-44页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
| 2.2.2 方法与步骤 | 第40-44页 |
| 2.3 重组对虾溶菌酶的含量和活性检测 | 第44-48页 |
| 2.3.1 材料和试剂 | 第44页 |
| 2.3.2 菌种 | 第44页 |
| 2.3.3 主要仪器和设备 | 第44-45页 |
| 2.3.4 Bradford法测定蛋白含量 | 第45-46页 |
| 2.3.5 重组对虾溶菌酶活性检测 | 第46-48页 |
| 第三章 结果与分析 | 第48-63页 |
| 3.1 FcLys重组表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 3.2 重组对虾溶菌酶的表达分析 | 第49-50页 |
| 3.3 可溶性表达条件优化 | 第50-52页 |
| 3.4 包涵体复性研究 | 第52-60页 |
| 3.4.1 包涵体的制备和洗涤 | 第52页 |
| 3.4.2 包涵体溶解 | 第52-55页 |
| 3.4.3 包涵体复性结果 | 第55-56页 |
| 3.4.4 影响稀释复性蛋白回收率的因素 | 第56-59页 |
| 3.4.5 影响亲和层析复性蛋白回收率因素 | 第59-60页 |
| 3.5 重组对虾溶菌酶的含量测定和生物活性检测 | 第60-63页 |
| 3.5.1 重组对虾溶菌酶的含量检测 | 第60-61页 |
| 3.5.2 重组对虾溶菌酶的生物活性检测 | 第61-63页 |
| 第四章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
