摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩略语一览表 | 第11-13页 |
第1章 引言 | 第13-23页 |
1.1 CMD的结构和功能 | 第13-14页 |
1.2 CMD关于心脏肥大的研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 CMD与心脏肥大 | 第14-15页 |
1.2.2 CMD抑制剂 | 第15-16页 |
1.3 PPTA的结构和功能 | 第16页 |
1.4 PPTA关于心脏肥大的相关研究 | 第16-17页 |
1.5 CAMRs的结构和功能 | 第17-18页 |
1.6 RYR的结构和功能 | 第18-19页 |
1.7 钙调蛋白介导的心脏肥大信号通路 | 第19-20页 |
1.8 本课题的研究目的及意义 | 第20-23页 |
第2章 材料与方法 | 第23-53页 |
2.1 实验材料与设备 | 第23-33页 |
2.1.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.2 实验仪器 | 第23-25页 |
2.1.3 实验试剂 | 第25-28页 |
2.1.4 溶液配制 | 第28-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-53页 |
2.2.1 分子克隆 | 第33-44页 |
2.2.2 细胞培养相关实验 | 第44-48页 |
2.2.3 Western blot | 第48-50页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
2.2.5 数据的统计学分析 | 第51-53页 |
第3章 实验结果与分析 | 第53-83页 |
3.1 分子克隆 | 第53-63页 |
3.1.1 CMD A和CMD B目的片段克隆 | 第53-54页 |
3.1.2 重组质粒的构建 | 第54-57页 |
3.1.3 重组质粒测序结果 | 第57-60页 |
3.1.4 CMD A全序列目的片段克隆结果 | 第60-63页 |
3.2 PEI法细胞瞬时转染 | 第63-67页 |
3.2.1 CMD A、CMD B重组质粒的细胞瞬时转染 | 第63-66页 |
3.2.2 CMD A基因全序列重组质粒的细胞瞬时转染 | 第66-67页 |
3.3 CMD A基因及其完整序列和CMD B基因对于细胞表征的影响 | 第67-69页 |
3.3.1 过表达CMD基因对于细胞体积的影响 | 第67-68页 |
3.3.2 过表达CMD基因对于细胞面积的影响 | 第68-69页 |
3.4 CMD A及其全序列和CMD B基因过表达对于心脏肥大相关钙调基因在蛋白表达水平的影响 | 第69-74页 |
3.4.1 CMD A及其全序列和CMD B基因对CAMR 1和CAMR 2蛋白表达的影响 | 第69-72页 |
3.4.2 CMD A及其全序列和CMD B基因对PPTA蛋白表达的影响 | 第72-74页 |
3.5 CMD A及其全序列和CMD B基因对于心脏肥大相关钙调蛋白基因在mRNA表达水平的影响 | 第74-80页 |
3.5.1 总RNA的提取及检测 | 第74页 |
3.5.2 CMD过表达对CAMR 1和CAMR 2基因mRNA水平表达量的影响 | 第74-77页 |
3.5.3 CMD过表达对PPTAA和PPTA C基因mRNA水平表达量的影响 | 第77-80页 |
3.6 细胞周期同步化 | 第80-81页 |
3.7 细胞周期测定结果 | 第81-83页 |
第4章 讨论 | 第83-89页 |
4.1 两种细胞材料的特征及PEI转染效果 | 第83-84页 |
4.2 CMD对于细胞肥大的调节 | 第84-85页 |
4.2.1 CMD对于细胞体积的调节 | 第84-85页 |
4.2.2 CMD对于细胞面积的调节 | 第85页 |
4.3 CMD与心脏内钙相关蛋白的相互作用 | 第85-87页 |
4.3.1 CMD对于蛋白表达水平的影响 | 第85-86页 |
4.3.2 CMD对于mRNA表达水平的影响 | 第86-87页 |
4.4 过表达CMD对于细胞周期的影响 | 第87-88页 |
4.5 结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-99页 |
致谢 | 第99-101页 |
攻读硕士期间的科研成果 | 第101页 |