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从细胞水平探究CMD A、CMD B及相关基因对细胞表征调节的分子机制

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
英文缩略语一览表第11-13页
第1章 引言第13-23页
    1.1 CMD的结构和功能第13-14页
    1.2 CMD关于心脏肥大的研究进展第14-16页
        1.2.1 CMD与心脏肥大第14-15页
        1.2.2 CMD抑制剂第15-16页
    1.3 PPTA的结构和功能第16页
    1.4 PPTA关于心脏肥大的相关研究第16-17页
    1.5 CAMRs的结构和功能第17-18页
    1.6 RYR的结构和功能第18-19页
    1.7 钙调蛋白介导的心脏肥大信号通路第19-20页
    1.8 本课题的研究目的及意义第20-23页
第2章 材料与方法第23-53页
    2.1 实验材料与设备第23-33页
        2.1.1 实验材料第23页
        2.1.2 实验仪器第23-25页
        2.1.3 实验试剂第25-28页
        2.1.4 溶液配制第28-33页
    2.2 实验方法第33-53页
        2.2.1 分子克隆第33-44页
        2.2.2 细胞培养相关实验第44-48页
        2.2.3 Western blot第48-50页
        2.2.4 实时荧光定量PCR第50-51页
        2.2.5 数据的统计学分析第51-53页
第3章 实验结果与分析第53-83页
    3.1 分子克隆第53-63页
        3.1.1 CMD A和CMD B目的片段克隆第53-54页
        3.1.2 重组质粒的构建第54-57页
        3.1.3 重组质粒测序结果第57-60页
        3.1.4 CMD A全序列目的片段克隆结果第60-63页
    3.2 PEI法细胞瞬时转染第63-67页
        3.2.1 CMD A、CMD B重组质粒的细胞瞬时转染第63-66页
        3.2.2 CMD A基因全序列重组质粒的细胞瞬时转染第66-67页
    3.3 CMD A基因及其完整序列和CMD B基因对于细胞表征的影响第67-69页
        3.3.1 过表达CMD基因对于细胞体积的影响第67-68页
        3.3.2 过表达CMD基因对于细胞面积的影响第68-69页
    3.4 CMD A及其全序列和CMD B基因过表达对于心脏肥大相关钙调基因在蛋白表达水平的影响第69-74页
        3.4.1 CMD A及其全序列和CMD B基因对CAMR 1和CAMR 2蛋白表达的影响第69-72页
        3.4.2 CMD A及其全序列和CMD B基因对PPTA蛋白表达的影响第72-74页
    3.5 CMD A及其全序列和CMD B基因对于心脏肥大相关钙调蛋白基因在mRNA表达水平的影响第74-80页
        3.5.1 总RNA的提取及检测第74页
        3.5.2 CMD过表达对CAMR 1和CAMR 2基因mRNA水平表达量的影响第74-77页
        3.5.3 CMD过表达对PPTAA和PPTA C基因mRNA水平表达量的影响第77-80页
    3.6 细胞周期同步化第80-81页
    3.7 细胞周期测定结果第81-83页
第4章 讨论第83-89页
    4.1 两种细胞材料的特征及PEI转染效果第83-84页
    4.2 CMD对于细胞肥大的调节第84-85页
        4.2.1 CMD对于细胞体积的调节第84-85页
        4.2.2 CMD对于细胞面积的调节第85页
    4.3 CMD与心脏内钙相关蛋白的相互作用第85-87页
        4.3.1 CMD对于蛋白表达水平的影响第85-86页
        4.3.2 CMD对于mRNA表达水平的影响第86-87页
    4.4 过表达CMD对于细胞周期的影响第87-88页
    4.5 结论第88-89页
参考文献第89-99页
致谢第99-101页
攻读硕士期间的科研成果第101页

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