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大菱鲆信号转导及转录激活因子1(STAT1)和牙鲆干扰素调节因子9(IRF9)全长cDNA克隆与表达分析

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第12-23页
    1 干扰素系统的研究进展第12-17页
        1.1 鱼类的干扰素的研究第13-15页
        1.2 鱼类 I 型干扰素的功能和诱导基因第15-17页
    2 鱼类信号转导及转录激活因子家族的研究进展第17-19页
        2.1 信号转导及转录激活因子 STAT1 的研究进展第17-19页
            2.1.1 牙鲆 STAT1 研究进展第18页
            2.1.2 大西洋鲑鱼 STAT1 研究进展第18-19页
    3 鱼类干扰素调节因子家族的研究进展第19-22页
        3.1 鱼类干扰素调节因子的分类及结构特征第19-20页
        3.2 鱼类干扰素调节因子的作用第20页
        3.3 干扰素调节因子 IRF9 的研究进展第20-22页
    4 本研究的目的及意义第22-23页
第二章 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 全长 cDNA克隆表达分析第23-57页
    1 材料及仪器第23-26页
        1.1 材料第23-24页
        1.2 实验试剂第24-25页
        1.3 实验仪器第25-26页
    2 实验方法第26-36页
        2.1 Total RNA 的抽提和质检第26-27页
        2.2 cDNA 第一链的合成第27-28页
        2.3 克隆大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 核心片段及测序第28-32页
            2.3.1 核心片段的 PCR 扩增第28-30页
            2.3.2 目的片段回收第30页
            2.3.3 目的片段与载体连接第30-31页
            2.3.4 制备感受态细胞和转化第31-32页
            2.3.5 阳性克隆筛选第32页
            2.3.6 核心片段测序分析第32页
        2.4 克隆 RACE 片段及测序第32-35页
            2.4.1 设计 3’RACE 和 5’RACE 特异性引物第32页
            2.4.2 3’RACE 反应及测序第32-34页
            2.4.3 5’RACE 反应及测序第34-35页
        2.5 全长 cDNA 序列的拼接第35-36页
    3 实验结果第36-55页
        3.1 抽提 Total RNA 与质量测定第36页
        3.2 核心片段克隆及测序结果第36-39页
        3.3 RACE 片段的克隆及测序结果第39-44页
        3.4 全长 cDNA 序列及分析第44-50页
            3.4.1 cDNA 序列拼接第44页
            3.4.2 全长 cDNA 序列结果第44-49页
            3.4.3 STAT1 和 IRF9 的氨基酸序列的同源性第49-50页
        3.5 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 系统进化分析第50-55页
    4 讨论第55-57页
第三章 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 基因的表达第57-68页
    1 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 mRNAs 在健康鱼体分布第57-60页
        1.1 实验材料第57页
            1.1.1 动物第57页
            1.1.2 实验设备第57页
        1.2 实验方法第57-59页
            1.2.1 解剖鱼体,分离组织第57页
            1.2.2 总 RNA 的抽提与质量检测第57-58页
            1.2.3 cDNA 第一链的合成第58页
            1.2.4 引物设计第58页
            1.2.5 Real-time PCR 分析第58-59页
        1.3 实验结果第59-60页
    2 TRBIV,LCDV 和 PolyI:C 刺激对 STAT1 和 IRF9 的表达影响第60-68页
        2.1 实验材料与仪器第61页
            2.1.1 材料第61页
            2.1.2 仪器与设备第61页
        2.2 实验方法第61-62页
            2.2.1 Poly I:C 刺激第61-62页
            2.2.2 TRBIV,LCDV 分别感染第62页
            2.2.3 Total RNA 的抽提检测第62页
            2.2.4 制备第一链 cDNA第62页
            2.2.5 Real-time PCR 检测第62页
        2.3 实验结果第62-65页
            2.3.1 PolyI:C 和 TRBIV 感染后 STAT1 基因表达第62-64页
            2.3.2 PolyI:C 和 LCDV 刺激 IRF9 基因的表达第64-65页
        2.4 讨论第65-68页
结论第68-69页
参考文献第69-75页
致谢第75-76页
个人简历第76页
发表的学术论文第76-77页

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