摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1 干扰素系统的研究进展 | 第12-17页 |
1.1 鱼类的干扰素的研究 | 第13-15页 |
1.2 鱼类 I 型干扰素的功能和诱导基因 | 第15-17页 |
2 鱼类信号转导及转录激活因子家族的研究进展 | 第17-19页 |
2.1 信号转导及转录激活因子 STAT1 的研究进展 | 第17-19页 |
2.1.1 牙鲆 STAT1 研究进展 | 第18页 |
2.1.2 大西洋鲑鱼 STAT1 研究进展 | 第18-19页 |
3 鱼类干扰素调节因子家族的研究进展 | 第19-22页 |
3.1 鱼类干扰素调节因子的分类及结构特征 | 第19-20页 |
3.2 鱼类干扰素调节因子的作用 | 第20页 |
3.3 干扰素调节因子 IRF9 的研究进展 | 第20-22页 |
4 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 全长 cDNA克隆表达分析 | 第23-57页 |
1 材料及仪器 | 第23-26页 |
1.1 材料 | 第23-24页 |
1.2 实验试剂 | 第24-25页 |
1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-36页 |
2.1 Total RNA 的抽提和质检 | 第26-27页 |
2.2 cDNA 第一链的合成 | 第27-28页 |
2.3 克隆大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 核心片段及测序 | 第28-32页 |
2.3.1 核心片段的 PCR 扩增 | 第28-30页 |
2.3.2 目的片段回收 | 第30页 |
2.3.3 目的片段与载体连接 | 第30-31页 |
2.3.4 制备感受态细胞和转化 | 第31-32页 |
2.3.5 阳性克隆筛选 | 第32页 |
2.3.6 核心片段测序分析 | 第32页 |
2.4 克隆 RACE 片段及测序 | 第32-35页 |
2.4.1 设计 3’RACE 和 5’RACE 特异性引物 | 第32页 |
2.4.2 3’RACE 反应及测序 | 第32-34页 |
2.4.3 5’RACE 反应及测序 | 第34-35页 |
2.5 全长 cDNA 序列的拼接 | 第35-36页 |
3 实验结果 | 第36-55页 |
3.1 抽提 Total RNA 与质量测定 | 第36页 |
3.2 核心片段克隆及测序结果 | 第36-39页 |
3.3 RACE 片段的克隆及测序结果 | 第39-44页 |
3.4 全长 cDNA 序列及分析 | 第44-50页 |
3.4.1 cDNA 序列拼接 | 第44页 |
3.4.2 全长 cDNA 序列结果 | 第44-49页 |
3.4.3 STAT1 和 IRF9 的氨基酸序列的同源性 | 第49-50页 |
3.5 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 系统进化分析 | 第50-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
第三章 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 基因的表达 | 第57-68页 |
1 大菱鲆 STAT1 和牙鲆 IRF9 mRNAs 在健康鱼体分布 | 第57-60页 |
1.1 实验材料 | 第57页 |
1.1.1 动物 | 第57页 |
1.1.2 实验设备 | 第57页 |
1.2 实验方法 | 第57-59页 |
1.2.1 解剖鱼体,分离组织 | 第57页 |
1.2.2 总 RNA 的抽提与质量检测 | 第57-58页 |
1.2.3 cDNA 第一链的合成 | 第58页 |
1.2.4 引物设计 | 第58页 |
1.2.5 Real-time PCR 分析 | 第58-59页 |
1.3 实验结果 | 第59-60页 |
2 TRBIV,LCDV 和 PolyI:C 刺激对 STAT1 和 IRF9 的表达影响 | 第60-68页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第61页 |
2.1.1 材料 | 第61页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第61页 |
2.2 实验方法 | 第61-62页 |
2.2.1 Poly I:C 刺激 | 第61-62页 |
2.2.2 TRBIV,LCDV 分别感染 | 第62页 |
2.2.3 Total RNA 的抽提检测 | 第62页 |
2.2.4 制备第一链 cDNA | 第62页 |
2.2.5 Real-time PCR 检测 | 第62页 |
2.3 实验结果 | 第62-65页 |
2.3.1 PolyI:C 和 TRBIV 感染后 STAT1 基因表达 | 第62-64页 |
2.3.2 PolyI:C 和 LCDV 刺激 IRF9 基因的表达 | 第64-65页 |
2.4 讨论 | 第65-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简历 | 第76页 |
发表的学术论文 | 第76-77页 |