| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-17页 |
| 1 材料与方法 | 第17-29页 |
| 1.1 试验材料 | 第17-18页 |
| 1.1.1 供试品种来源 | 第17页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 1.1.3 菌株和质粒 | 第17页 |
| 1.1.4 试验引物 | 第17-18页 |
| 1.2 梨极矮化突变体GAI基因的克隆及表达 | 第18-25页 |
| 1.2.1 总RNA的提取 | 第18页 |
| 1.2.2 cDNA的合成与RT-PCR全长扩增 | 第18-21页 |
| 1.2.3 PuGAI基因多序列比对及系统发育树的构建 | 第21页 |
| 1.2.4 PuGAI双元表达载体的构建及鉴定 | 第21-24页 |
| 1.2.5 梨极矮化突变体PuGAI、PuGA20-ox、PuRGLl、PuRGL2基因表达 | 第24-25页 |
| 1.3 农杆菌介导的PUGA20-OX与PURGL1烟草转化 | 第25-29页 |
| 1.3.1 植物材料 | 第25页 |
| 1.3.2 植物表达载体 | 第25页 |
| 1.3.3 基本培养基 | 第25-26页 |
| 1.3.4 PuGA20-ox与PuRGL1转化及抗性植株筛选 | 第26-27页 |
| 1.3.5 转基因植株PCR检测 | 第27-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-42页 |
| 2.1 梨极矮化突变体PuGAI基因的克隆 | 第29-35页 |
| 2.1.1 梨极矮化突变体总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.1.2 RT-PCR全长扩增及电泳检测 | 第29-30页 |
| 2.1.3 梨极矮化突变体PuGAI全长序列 | 第30-32页 |
| 2.1.4 梨极矮化突变体PuGAI基因多序列比对及系统发育树构建 | 第32-35页 |
| 2.2 梨极矮化突变体PuGAI双元表达载体构建 | 第35-38页 |
| 2.2.1 植物表达载体的构建及检测 | 第35-37页 |
| 2.2.2 植物表达载体的农杆菌转化及鉴定 | 第37-38页 |
| 2.3 PUGAI、PUGA20-OX、PURGL1、PURGL2基因表达特性分析 | 第38-40页 |
| 2.4 PUGA20-OX与PuRGL1基因的烟草转化及鉴定 | 第40-42页 |
| 2.4.1 抗性植株的筛选与培养 | 第40页 |
| 2.4.2 转基因烟草的PCR鉴定 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 3.1 梨极矮化突变体DELLA蛋白家族基因的克隆 | 第42页 |
| 3.2 植物生长调节对梨极矮化突变体PUGA20-OX与DELLA蛋白基因表达的影响 | 第42-44页 |
| 4 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
