摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 前言 | 第12页 |
1.2 内分泌干扰物 | 第12-13页 |
1.2.1 EDCs 概述 | 第12-13页 |
1.2.2 EDCs 的毒害作用 | 第13页 |
1.3 EDCs 的分子标志物 | 第13-17页 |
1.3.1 figla | 第14页 |
1.3.2 foxl2 | 第14-15页 |
1.3.3 scp3 | 第15页 |
1.3.4 sox9 | 第15-16页 |
1.3.5 vtg | 第16页 |
1.3.6 zp | 第16-17页 |
1.4 生态毒理试验用鱼 | 第17页 |
1.5 本研究目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 稀有鮈鲫 figla、scp3、sox9a 和 zp3 基因 cDNA 全长的克隆与组织分布 | 第18-35页 |
2.1 前言 | 第18页 |
2.2 材料与试剂 | 第18页 |
2.2.1 主要试验器材 | 第18页 |
2.2.2 主要试验试剂 | 第18页 |
2.2.3 试验用溶液及配制 | 第18页 |
2.2.4 试验材料 | 第18页 |
2.3 试验方法 | 第18-24页 |
2.3.1 figla、scp3、sox9a 和 zp3 中间片段的克隆 | 第18-21页 |
2.3.2 RACE 方法克隆 cDNA 末端序列 | 第21-22页 |
2.3.3 测序结果整理及分析 | 第22-23页 |
2.3.4 qRT-PCR | 第23-24页 |
2.3.5 数据处理及分析 | 第24页 |
2.4 结果分析 | 第24-33页 |
2.4.1 总 RNA 质量 | 第24页 |
2.4.2 稀有鮈鲫 figla、scp3、sox9a 和 zp3 基因 cDNA 全长的克隆 | 第24-25页 |
2.4.3 稀有鮈鲫 figla、scp3、sox9a 和 zp3 基因 cDNA 全长的分析 | 第25-31页 |
2.4.4 稀有鮈鲫 figla、scp3、sox9a 和 zp3 基因的组织分布 | 第31-33页 |
2.5 讨论 | 第33-34页 |
2.5.1 稀有鮈鲫 figla、scp3、sox9a 和 zp3 基因结构与功能 | 第33页 |
2.5.2 稀有鮈鲫 figla、scp3、sox9a 和 zp3 基因的组织分布与功能 | 第33-34页 |
2.6 小结 | 第34-35页 |
第三章 EE2 对稀有鮈鲫 figla、foxl2、scp3、sox9a、vtg、zp2 和 zp3 基因表达的影响 | 第35-49页 |
3.1 前言 | 第35页 |
3.2 材料与试剂 | 第35-36页 |
3.2.1 主要试验器材 | 第35页 |
3.2.2 主要试验试剂 | 第35页 |
3.2.3 试验材料 | 第35页 |
3.2.4 暴露试验 | 第35-36页 |
3.3 试验方法 | 第36-37页 |
3.3.1 总 RNA 提取 | 第36页 |
3.3.2 RNA 质量和浓度检测 | 第36页 |
3.3.3 cDNA 第一链合成 | 第36页 |
3.3.4 qRT-PCR | 第36页 |
3.3.5 内参基因筛选 | 第36页 |
3.3.6 5′侧翼序列的克隆 | 第36-37页 |
3.3.7 数据处理及分析 | 第37页 |
3.4 结果分析 | 第37-45页 |
3.4.1 内参基因筛选 | 第37-38页 |
3.4.2 EE2 对 figla、foxl2、scp3、sox9a、vtg、zp2 和 zp3 基因表达影响 | 第38-42页 |
3.4.3 5′侧翼序列分析 | 第42-45页 |
3.5 讨论 | 第45-48页 |
3.5.1 EE2 对稀有鮈鲫 figla 基因表达的影响 | 第45-46页 |
3.5.2 EE2 对稀有鮈鲫 foxl2 基因表达的影响 | 第46-47页 |
3.5.3 EE2 对稀有鮈鲫 scp3 基因表达的影响 | 第47页 |
3.5.4 EE2 对稀有鮈鲫 sox9a 基因表达的影响 | 第47页 |
3.5.5 zp 和 vtg 基因对 EE2 不同的响应能力 | 第47-48页 |
3.5.6 性腺中 zp2 和 zp3 对 EE2 不同的响应能力 | 第48页 |
3.6 小结 | 第48-49页 |
结论、创新点和下一步研究计划 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
附录 | 第59-68页 |
缩略词 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |