摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号说明 | 第9-12页 |
1 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 MEF2的概述 | 第12-13页 |
1.2 MEF2C基因的结构与组织表达 | 第13-15页 |
1.3 MEF2C基因的调控和参与的信号通路 | 第15-16页 |
1.4 MEF2C基因的生物学功能 | 第16-18页 |
1.4.1 MEF2C基因在肌肉发育过程中的作用 | 第16-17页 |
1.4.2 MEF2C基因参与神经系统发育 | 第17-18页 |
1.4.3 MEF2C基因调控血管生成和B细胞成熟 | 第18页 |
1.5 可变剪切的产生和作用方式 | 第18-20页 |
1.6 MEF2C可变剪接体的种类及分布 | 第20-21页 |
1.7 MEF2C可变剪切体的生物学功能 | 第21-22页 |
1.8 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-33页 |
2.1 试验材料 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-32页 |
2.2.1 组织、细胞总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.2 RNA的反转录 | 第24页 |
2.2.3 扩增山羊MEF2C基因全序列 | 第24-25页 |
2.2.4 目的基因的克隆 | 第25-26页 |
2.2.5 MEF2C基因不同转录本的RT-PCR验证 | 第26页 |
2.2.6 qPCR定量 | 第26-27页 |
2.2.7 蛋白免疫印迹 | 第27-29页 |
2.2.8 载体构建 | 第29-30页 |
2.2.9 真核体外转录/翻译系统检测MEF2C2蛋白表达 | 第30-31页 |
2.2.10 山羊骨骼肌卫星细胞体外分化模型的建立及细胞转染 | 第31-32页 |
2.3 数据分析与处理 | 第32-33页 |
2.3.1 生物信息学分析 | 第32页 |
2.3.2 统计分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-51页 |
3.1 山羊MEF2C基因的克隆 | 第33-34页 |
3.2 山羊MEF2C基因不同转录本的鉴定 | 第34-37页 |
3.2.1 山羊MEF2C基因转录本的预测 | 第34-35页 |
3.2.2 山羊MEF2C基因不同转录本的克隆及鉴定 | 第35-37页 |
3.3 菌液测序结果及核酸序列对比分析 | 第37-38页 |
3.4 不同转录本氨基酸序列分析及蛋白质结构域预测 | 第38-41页 |
3.4.1 氨基酸序列及蛋白预测结果 | 第38-40页 |
3.4.2 蛋白功能域预测分析结果 | 第40-41页 |
3.5 MEF2C氨基酸序列的系统进化分析 | 第41-42页 |
3.6 MEF2C不同转录本mRNA水平的相对定量分析 | 第42-46页 |
3.6.1 不同转录本的组织表达 | 第42-44页 |
3.6.2 不同转录本在肌肉组织的时序表达 | 第44-45页 |
3.6.3 不同转录本在SMSCs的表达 | 第45-46页 |
3.7 MEF2C蛋白在山羊不同组织中的表达 | 第46-47页 |
3.8 MEF2C2转录本载体构建 | 第47-49页 |
3.9 过表达MEF2C2转录本对SMSCs的影响 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
4.1 MEF2C基因不同转录本的分子克隆及生物信息学分析 | 第51-52页 |
4.2 不同转录本的蛋白功能域预测与蛋白表达 | 第52页 |
4.3 不同转录本的组织表达差异 | 第52-53页 |
4.4 MEF2C2转录本对SCMSCs分化的影响 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |