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水稻多分蘖突变体基因的图位克隆与功能分析

符号说明第4-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9页
1 引言第10-22页
    1.1 水稻分蘖定义及其规律第10-12页
        1.1.1 水稻分蘖定义第10-11页
        1.1.2 水稻分蘖规律第11-12页
    1.2 水稻分蘖研究的意义第12-13页
    1.3 水稻分蘖的影响因素第13-14页
        1.3.1 遗传因素第13-14页
        1.3.2 环境因素第14页
    1.4 水稻分蘖基因的克隆第14-16页
    1.5 水稻分蘖的研究现状第16-20页
        1.5.1 水稻分蘖的 QTL 定位第16-17页
        1.5.2 水稻少分蘖第17页
        1.5.3 水稻多分蘖第17-19页
        1.5.4 其它作物分蘖的研究进展第19-20页
    1.6 存在的问题与发展前景第20-22页
2 材料与方法第22-37页
    2.1 试验材料第22-26页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 菌株、工具酶第22页
        2.1.3 试剂及试剂盒第22-23页
        2.1.4 化学贮存液配制第23-25页
            2.1.4.1 DNA 提取试剂第23页
            2.1.4.2 琼脂糖凝胶电泳试剂第23-24页
            2.1.4.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂第24页
            2.1.4.5 培养基第24-25页
            2.1.4.6 其它常规试剂配制第25页
        2.1.5 仪器设备第25-26页
    2.2 试验方法第26-37页
        2.2.1 田间性状调查第26页
        2.2.2 突变体的遗传分析第26页
        2.2.3 基因的初步定位第26-29页
            2.2.3.1 稻基因组 DNA 的提取第27-28页
            2.2.3.2 PCR 反应第28页
            2.2.3.3 丙烯酰胺凝胶电泳第28-29页
        2.2.4 基因的精细定位第29-30页
        2.2.5 基因功能预测与测序第30-31页
        2.2.6 f2-132 和 S1-154 对 GR24 的响应第31-32页
        2.2.7 D14/D14m 蛋白的空间结构预测第32页
        2.2.8 半定量 RT-PCR第32-34页
            2.2.8.1 植物总 RNA 的提取第32-33页
            2.2.8.2 DNase I 消化第33页
            2.2.8.3 cDNA 反转录合成第33页
            2.2.8.4 半定量 RT-PCR第33-34页
        2.2.9 pMAL-C5X-D14m 载体的构建第34-37页
            2.2.9.1 目的基因的扩增与克隆第34-36页
            2.2.9.2 pMAL-C5X- D14/D14m 融合蛋白的原核表达第36页
            2.2.9.3 pMAL-C5X- D14/D14m 融合蛋白与 amylose resin 的结合第36-37页
3 结果与分析第37-50页
    3.1 突变体的表型分析第37-39页
        3.1.1 半矮化多分蘖突变体 f2-132 的表型分析第37页
        3.1.2 半矮化多分蘖突变体 S1-154 的表型分析第37-39页
    3.2 遗传分析第39-40页
        3.2.1 f2-132 材料的遗传分析第39-40页
        3.2.2 S1-154 材料的遗传分析第40页
    3.3 突变基因的图位克隆第40-43页
        3.3.1 f2-132 突变基因的图位克隆第40-41页
        3.3.2 S1-154 突变基因的图位克隆第41-43页
    3.4 候选基因的序列分析第43-45页
        3.4.1 f2-132 候选基因的序列分析第43-44页
        3.4.2 S1-154 候选基因的序列分析第44-45页
    3.5 独脚金内酯处理第45页
        3.5.1 f2-132 对独脚金内酯的响应第45页
        3.5.2 S1-154 对独脚金内酯的响应第45页
    3.6 D14 基因的突变对其蛋白空间结构的影响第45-46页
    3.7 D14 基因半定量 RT-PCR第46页
    3.8 D14 基因的扩增、克隆和测序第46-47页
    3.9 D14 蛋白的原核表达及纯化第47-48页
        3.9.1 pMAL-C5X- D14/D14m 融合蛋白的原核表达第47-48页
        3.9.2 pMAL-C5X- D14/D14m 融合蛋白与 amylose resin 的结合第48页
    3.10 讨论第48-50页
4 结论第50-51页
参考文献第51-58页
附录第58-59页
图版说明第59页
Explanation of plates第59-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表论文情况第62页

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