摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 葡萄和葡萄霜霉菌 | 第11-12页 |
1.2 葡萄霜霉病抗性研究进展 | 第12页 |
1.3 植物卵菌效应分子研究进展 | 第12-13页 |
1.4 植物与病原卵菌相互作用研究进展 | 第13-14页 |
1.5 病原卵菌效应分子功能进展 | 第14-15页 |
1.6 葡萄霜霉菌RxLR类效应因子研究进展 | 第15页 |
1.7 研究目的与意义 | 第15-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 实验材料、仪器及试剂 | 第17-18页 |
2.1.1 供试植物材料 | 第17页 |
2.1.2 供试菌株及载体 | 第17页 |
2.1.3 实验溶液及试剂 | 第17页 |
2.1.4 供试耗材及设备 | 第17-18页 |
2.2 相关表达载体的构建 | 第18-20页 |
2.2.1 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197基因的克隆 | 第18-19页 |
2.2.2 PVX-RxLR31197致死实验表达载体的构建 | 第19-20页 |
2.2.3 pCambia2300-RxLR31197亚细胞定位和过表达载体的构建 | 第20页 |
2.2.4 pGBKT7-RxLR31197等酵母相关表达载体的构建 | 第20页 |
2.3 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197的表达模式分析 | 第20-22页 |
2.3.1 RNA的提取 | 第20-21页 |
2.3.2 cDNA第一链的合成 | 第21页 |
2.3.3 qRT-PCR分析 | 第21-22页 |
2.4 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197诱导致死、抑制致死研究 | 第22-23页 |
2.4.1 农杆菌电击感受态的制备 | 第22页 |
2.4.2 农杆菌电击转化 | 第22页 |
2.4.3 诱导致死实验 | 第22-23页 |
2.4.4 抑制致死实验 | 第23页 |
2.5 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197亚细胞定位分析 | 第23-24页 |
2.5.1 RxLR31197基因烟草原生质体亚细胞定位 | 第23页 |
2.5.2 洋葱表皮亚细胞定位的方法进行验证 | 第23-24页 |
2.6 酵母双杂交筛选诱饵蛋白RxLR31197的互作蛋白 | 第24-26页 |
2.6.1 酵母双杂交文库的构建 | 第24页 |
2.6.1.1 酵母双杂交文库构建的准备 | 第24页 |
2.6.1.2 酵母双杂交文库构建的方法 | 第24页 |
2.6.2 pGBKT7-RxLR31197诱饵载体的鉴定 | 第24-25页 |
2.6.2.1 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197毒性功能检测 | 第24页 |
2.6.2.2 诱饵蛋白在酵母细胞中转录激活验证 | 第24-25页 |
2.6.3 诱饵蛋白RxLR31197互作蛋白的筛选 | 第25页 |
2.6.4 验证葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197与靶标蛋白的相互作用 | 第25-26页 |
2.7 转基因烟草抗性分析 | 第26-29页 |
2.7.1 烟草的遗传转化 | 第26页 |
2.7.2 转基因烟草的鉴定 | 第26-27页 |
2.7.3 转基因烟草抗病性分析 | 第27-29页 |
2.7.3.1 本氏烟接种辣椒疫霉菌 | 第27-28页 |
2.7.3.2 抗病相关基因表达分析 | 第28-29页 |
第三章 结果与分析 | 第29-40页 |
3.1 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197基因的生物信息学分析 | 第29-31页 |
3.1.1 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197基因的克隆 | 第29页 |
3.1.2 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197二级结构预测 | 第29-30页 |
3.1.3 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197的系统进化分析 | 第30-31页 |
3.2 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197的表达模式分析 | 第31-32页 |
3.3 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197诱导致死、抑制致死研究 | 第32-33页 |
3.4 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197亚细胞定位分析 | 第33页 |
3.5 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197互作蛋白的筛选 | 第33-36页 |
3.5.1 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197在酵母中的自激活与毒性分析 | 第33-34页 |
3.5.2 酵母双杂交筛选葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197在中国野葡萄中的互作蛋白 | 第34-35页 |
3.5.3 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197与候选互作蛋白的回复验证 | 第35-36页 |
3.6 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197在转基因烟草中的功能分析 | 第36-40页 |
3.6.1 葡萄霜霉菌效应因子RxLR31197转基因烟草的鉴定 | 第36-37页 |
3.6.2 转基因烟草对辣椒疫霉的抗病性分析 | 第37-38页 |
3.6.3 抗病相关基因的表达分析 | 第38-40页 |
第四章 讨论与结论 | 第40-42页 |
4.1 讨论 | 第40-41页 |
4.2 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
缩略词 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简介 | 第49页 |