| 致谢 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1. 开花决定 | 第9-18页 |
| 1.1 光周期途径 | 第9-10页 |
| 1.2 春化途径 | 第10-11页 |
| 1.3 热敏感途径 | 第11-12页 |
| 1.4 赤霉素途径 | 第12页 |
| 1.5 自主途径 | 第12-13页 |
| 1.6 年龄相关途径 | 第13页 |
| 1.7 开花调控途径的整合 | 第13-14页 |
| 1.8 植物开花基因FT的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.8.1 植物开花基因FT的发现及发展 | 第14-15页 |
| 1.8.2 植物开花基因FT的作用模式 | 第15-16页 |
| 1.8.3 植物FT基因家族 | 第16-17页 |
| 1.8.4 高等植物FT /TFL1基因家族成员的功能 | 第17-18页 |
| 2. 花的发端 | 第18页 |
| 3. 花器官发育 | 第18-20页 |
| 3.1 花器官发育的ABC模型 | 第19页 |
| 3.2 花器官发育的ABCDE模型 | 第19-20页 |
| 4. 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 小叶杨FT基因的同源克隆和序列分析 | 第22-43页 |
| 1. 实验材料 | 第22-23页 |
| 1.1 植物材料 | 第22页 |
| 1.2 菌株与载体 | 第22页 |
| 1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2. 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.1 小叶杨RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2 总RNA的定量与完整性检测 | 第24页 |
| 2.3 第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
| 2.4 小叶杨FT基因的同源克隆 | 第25-27页 |
| 2.4.1 特异性引物设计 | 第25页 |
| 2.4.2 PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.4.3 目的片段凝胶回收与纯化 | 第26页 |
| 2.4.4 纯化片段与克隆载体的连接反应 | 第26页 |
| 2.4.5 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第26-27页 |
| 2.4.5.1 感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| 2.4.5.2 连接产物的转化 | 第27页 |
| 2.4.6 阳性克隆筛选及测序分析 | 第27页 |
| 2.5 小叶杨FT基因的RACE扩增 | 第27-32页 |
| 2.5.1 引物设计 | 第27-28页 |
| 2.5.2 3’RACE套式PCR | 第28-29页 |
| 2.5.2.1 3’RACE反转录 | 第28页 |
| 2.5.2.2 3’RACE Outer PCR | 第28-29页 |
| 2.5.2.3 3’RACE Inner PCR | 第29页 |
| 2.5.3 5’RACE套式PCR | 第29-32页 |
| 2.5.3.1 去磷酸化处理 | 第29-30页 |
| 2.5.3.2“去帽子”反应 | 第30页 |
| 2.5.3.3 5’RACE Adaptor连接 | 第30-31页 |
| 2.5.3.4 反转录反应 | 第31页 |
| 2.5.3.5 5’RACE Outer PCR | 第31页 |
| 2.5.3.6 5’RACE Inner PCR | 第31-32页 |
| 2.6 FT基因ORF框验证 | 第32-33页 |
| 2.7 生物信息学分析 | 第33页 |
| 3. 结果分析 | 第33-41页 |
| 3.1 小叶杨总RNA提取 | 第33页 |
| 3.2 小叶杨FT基因的全长序列获得 | 第33-37页 |
| 3.3 小叶杨PsFT基因的同源性比较与进化树分析 | 第37-39页 |
| 3.4 小叶杨PsFT基因蛋白质结构分析 | 第39-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 FT基因表达载体的构建 | 第43-51页 |
| 1. 实验材料 | 第43-45页 |
| 1.1 菌株与载体 | 第43-44页 |
| 1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 1.3 实验中用到的引物 | 第45页 |
| 2. 实验方法 | 第45-48页 |
| 2.1 提取FT1、FT2、FT3基因的质粒 | 第45-46页 |
| 2.2 产生attB-PCR产物 | 第46页 |
| 2.3 BP重组反应 | 第46页 |
| 2.4 重组产物的转化（同第二章） | 第46页 |
| 2.5 阳性克隆筛选及测序分析 | 第46-47页 |
| 2.6 LR重组反应 | 第47页 |
| 2.7 重组产物的转化（同第二章） | 第47页 |
| 2.8 阳性克隆筛选及测序分析 | 第47-48页 |
| 3. 结果分析 | 第48-49页 |
| 3.1 attB-PCR产物扩增 | 第48页 |
| 3.2 BP反应后的阳性克隆检测 | 第48-49页 |
| 3.3 LR反应后阳性重组子检测 | 第49页 |
| 4．讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 小叶杨FT基因遗传转化研究 | 第51-66页 |
| 1. 实验材料 | 第51-52页 |
| 1.1 植物材料 | 第51页 |
| 1.2 菌株 | 第51页 |
| 1.3 主要试剂 | 第51页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第51-52页 |
| 2．实验方法 | 第52-57页 |
| 2.1 GV3101感受态细胞的制备 | 第52页 |
| 2.2 液氮冻融法转化农杆菌 | 第52页 |
| 2.3 花序浸染法转化拟南芥 | 第52-53页 |
| 2.4 使用卡那霉素对拟南芥T1代种子进行筛选 | 第53页 |
| 2.5 注射法转化烟草 | 第53-54页 |
| 2.6 叶盘法转化山新杨 | 第54页 |
| 2.6.1 GV3101菌株活化 | 第54页 |
| 2.6.2 转化 | 第54页 |
| 2.7 转基因植株的PCR检测 | 第54-57页 |
| 2.7.1 快速提取拟南芥和山新杨基因组DNA | 第54-55页 |
| 2.7.2 拟南芥和山新杨基因组DNA的PCR检测 | 第55-56页 |
| 2.7.3 本氏烟草总RNA的提取（同第二章） | 第56页 |
| 2.7.4 反转录 | 第56页 |
| 2.7.5 本氏烟草的实时定量PCR检测 | 第56-57页 |
| 2.7.6 小叶杨FT基因对下游基因的影响 | 第57页 |
| 3. 结果分析 | 第57-64页 |
| 3.1 拟南芥T1代种子筛选结果 | 第57-58页 |
| 3.2 小叶杨FT基因促进拟南芥提早开花 | 第58页 |
| 3.3 转基因拟南芥的PCR检测 | 第58-59页 |
| 3.4 小叶杨FT基因促进本氏烟草提早开花 | 第59-60页 |
| 3.5 小叶杨FT基因在山新杨中的遗传转化 | 第60-61页 |
| 3.6 转基因山新杨的分子检测 | 第61-62页 |
| 3.7 小叶杨FT基因对下游基因的影响结果 | 第62-64页 |
| 3.8 转基因植株的移栽 | 第64页 |
| 4. 讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 结论 | 第66-68页 |
| 1. 本研究的主要结论 | 第66-67页 |
| 2. 本实验的创新与特色 | 第67页 |
| 3. 研究展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
