| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-49页 |
| 1 小鼠早期胚胎发育 | 第13-19页 |
| 1.1 植入前小鼠胚胎发育 | 第13-16页 |
| 1.2 小鼠胚胎植入 | 第16-17页 |
| 1.3 原条发生 | 第17-19页 |
| 2 小鼠视网膜 | 第19-28页 |
| 2.1 小鼠视网膜结构和功能 | 第20-27页 |
| 2.2 感光细胞变性相关疾病 | 第27-28页 |
| 3 细胞自噬 | 第28-39页 |
| 3.1 自噬过程及分子机制 | 第28-30页 |
| 3.2 自噬在哺乳动物发育中的作用 | 第30-35页 |
| 3.3 细胞自噬与疾病 | 第35-39页 |
| 4 微管成核复合物研究综述 | 第39-47页 |
| 4.1 微管成核复合物组成及功能 | 第39-42页 |
| 4.2 非中心体依赖的微管成核信号通路 | 第42-43页 |
| 4.3 TUBGCP4的结构与功能 | 第43-47页 |
| 5 本论文研究的目的与意义 | 第47-49页 |
| 第二章 Tubgcp4在小鼠早期胚胎发育中作用 | 第49-71页 |
| 1 引言 | 第49-50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第50页 |
| 2.2 常用试剂及其来源 | 第50页 |
| 2.3 Tubgcp4基因敲除小鼠制备 | 第50-52页 |
| 2.4 小鼠早期胚胎获取 | 第52-53页 |
| 2.5 囊胚贴壁培养 | 第53页 |
| 2.6 囊胚基因组快速制备 | 第53页 |
| 2.7 小鼠早期胚胎及成体基因型鉴定 | 第53-54页 |
| 2.8 小鼠尾巴DNA提取 | 第54-55页 |
| 2.9 小鼠早期胚胎组织总RNA提取 | 第55页 |
| 2.10 cDNA制备 | 第55页 |
| 2.11 实时定量PCR分析 | 第55-56页 |
| 2.12 组织蛋白提取 | 第56页 |
| 2.13 免疫印迹分析 | 第56-57页 |
| 2.14 组织切片及苏木素伊红染色 | 第57-58页 |
| 2.15 激光捕获显微切割 | 第58页 |
| 3 结果 | 第58-68页 |
| 3.1 Tubgcp4敲除小鼠制备及鉴定 | 第58-59页 |
| 3.2 Tubgcp4敲除纯合突变小鼠胚胎E6.5死亡 | 第59-62页 |
| 3.3 纯合突变小鼠原条发生障碍 | 第62-66页 |
| 3.4 Tubgcp4在小鼠成体组织及胚胎各时期表达 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 4.1 Tubgcp4敲除导致纯合突变小鼠6.5天死亡 | 第68-69页 |
| 4.2 纯合突变小鼠原条发生障碍 | 第69-70页 |
| 5 小结 | 第70-71页 |
| 第三章 Tubgcp4在小鼠视网膜变性和自噬发生中的作用 | 第71-97页 |
| 1 引言 | 第71-72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-80页 |
| 2.1 实验材料 | 第72页 |
| 2.2 常用试剂及来源 | 第72-73页 |
| 2.3 抗体 | 第73页 |
| 2.4 载体构建 | 第73-77页 |
| 2.5 细胞培养 | 第77页 |
| 2.6 动物细胞瞬时转染 | 第77页 |
| 2.7 慢病毒包装及感染 | 第77-78页 |
| 2.8 miRNA干涉及超表达细胞系的建立 | 第78页 |
| 2.9 免疫荧光分析 | 第78-79页 |
| 2.10 蛋白质免疫共沉淀 | 第79页 |
| 2.11 细胞内共定位实验 | 第79页 |
| 2.12 视网膜透射电镜样品制备 | 第79-80页 |
| 2.13 小鼠视网膜电图 | 第80页 |
| 2.14 小鼠活体组成份分析 | 第80页 |
| 2.15 蔗糖密度梯度离心 | 第80页 |
| 3 结果 | 第80-93页 |
| 3.1 Tubgcp4~(+/-)小鼠各项生理指标 | 第80-83页 |
| 3.2 杂合子小鼠视网膜存在病变 | 第83-85页 |
| 3.3 小鼠眼睛组织中丫微管蛋白环状复合物解聚 | 第85-87页 |
| 3.4 杂合子小鼠视网膜中自噬增加 | 第87-90页 |
| 3.5 Tubgcp4与Atg7和Vim相互作用 | 第90-93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| 4.1 Tubgcp4杂合子小鼠眼睛视网膜变性 | 第93-94页 |
| 4.2 Tubgcp4缺失可以促进自噬发生 | 第94-95页 |
| 5 小结 | 第95-97页 |
| 研究总结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-120页 |
| 中英文对照表 | 第120-121页 |
| 在读期间发表论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
