| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-26页 |
| 1.1 玉米籽粒发育的研究进展 | 第13-19页 |
| 1.1.1 玉米籽粒的结构 | 第13页 |
| 1.1.2 玉米胚的发育 | 第13-14页 |
| 1.1.3 玉米胚乳发育 | 第14-19页 |
| 1.1.3.1 基底胚乳转移层的发育 | 第16页 |
| 1.1.3.2 胚乳糊粉层发育 | 第16-17页 |
| 1.1.3.3 胚乳淀粉合成 | 第17-18页 |
| 1.1.3.4 籽粒储藏蛋白的形成 | 第18-19页 |
| 1.2 细胞壁转化酶的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3 非自养器官中蔗糖的卸载机制 | 第22-23页 |
| 1.4 植物响应糖信号的研究现状 | 第23-25页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.1 玉米突变体材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株及质粒载体 | 第26页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 引物合成和DNA测序 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-47页 |
| 2.2.1 材料种植与生长环境 | 第26-27页 |
| 2.2.2 组织切片观察 | 第27-28页 |
| 2.2.3 扫描电镜观察 | 第28-29页 |
| 2.2.4 基因组DNA提取方法 | 第29-30页 |
| 2.2.4.1 CTAB法提取玉米叶片基因组DNA | 第29页 |
| 2.2.4.2 CTAB法提取玉米籽粒基因组DNA | 第29-30页 |
| 2.2.5 PCR反应筛选多态性SSR分子标记 | 第30页 |
| 2.2.6 PCR产物检测 | 第30-31页 |
| 2.2.7 SSR分子标记的开发 | 第31页 |
| 2.2.8 PCR扩增候选基因序列 | 第31-32页 |
| 2.2.9 胶回收 | 第32页 |
| 2.2.10 连接反应 | 第32-33页 |
| 2.2.11 大肠杆菌感受态的制备 | 第33页 |
| 2.2.12 大肠杆菌感受态的转化 | 第33-34页 |
| 2.2.13 大肠杆菌的活化 | 第34页 |
| 2.2.14 大肠杆菌的菌落PCR鉴定 | 第34页 |
| 2.2.15 DNA测序 | 第34-35页 |
| 2.2.16 玉米籽粒总RNA的提取(CTAB法) | 第35页 |
| 2.2.17 反转录cDNA第一条链的合成 | 第35-36页 |
| 2.2.18 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.2.19 序列连锁性分析 | 第37-38页 |
| 2.2.20 等位验证 | 第38页 |
| 2.2.21 生化成分分析 | 第38-42页 |
| 2.2.21.1 醇溶蛋白和非醇溶蛋白的提取 | 第38-41页 |
| 2.2.21.2 蛋白含量的定量分析 | 第41页 |
| 2.2.21.3 实时荧光定量PCR检测 | 第41页 |
| 2.2.21.4 糖含量分析 | 第41-42页 |
| 2.2.22 蛋白结构分析与进化树分析 | 第42-43页 |
| 2.2.23 醇溶蛋白基因响应糖信号 | 第43-46页 |
| 2.2.23.1 qRT-PCR检测糖信号对醇溶蛋白的响应 | 第43页 |
| 2.2.23.2 玉米胚乳瞬时表达实验 | 第43-45页 |
| 2.2.23.3 双荧光素酶检测实验 | 第45-46页 |
| 2.2.24 烟草体内激活实验 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-79页 |
| 3.1 突变体smk3表型分析 | 第47-48页 |
| 3.2 突变体smk3遗传鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3 突变体smk3籽粒组织切片观察 | 第49-53页 |
| 3.4 突变体smk3籽粒胚乳扫描电镜观察 | 第53-54页 |
| 3.5 玉米smk3突变体胚乳成分分析 | 第54-57页 |
| 3.5.1 蛋白含量分析 | 第54-55页 |
| 3.5.2 淀粉含量分析 | 第55页 |
| 3.5.3 糖类含量分析 | 第55-57页 |
| 3.6 SMK3 基因的图位克隆 | 第57-63页 |
| 3.6.1 多态性SSR分子标记的筛选 | 第57页 |
| 3.6.2 SMK3基因的粗定位 | 第57-59页 |
| 3.6.3 SMK3基因的精细定位 | 第59-60页 |
| 3.6.4 目的基因的确认 | 第60-63页 |
| 3.7 等位突变体smk3-1的相关分析 | 第63-66页 |
| 3.7.1 smk3-1突变体籽粒的表型观察 | 第63-64页 |
| 3.7.2 smk3-1突变体籽粒胚乳扫描电镜观察 | 第64-65页 |
| 3.7.3 smk3-1突变体胚乳成分分析 | 第65-66页 |
| 3.8 基因Mn1编码一个植物中特有的细胞壁转化酶 | 第66-68页 |
| 3.9 Mn1基因主要在籽粒中表达 | 第68页 |
| 3.10 Mn1基因突变影响胚乳发育相关基因的表达 | 第68-69页 |
| 3.11 smk3突变体与野生型的差异表达谱分析 | 第69-73页 |
| 3.12 醇溶蛋白基因启动子响应糖信号 | 第73-74页 |
| 3.13 转录因子SRF1调控醇溶蛋白的表达 | 第74-77页 |
| 3.14 过表达Mn1降低籽粒蔗糖和醇溶蛋白含量 | 第77-79页 |
| 4 讨论 | 第79-81页 |
| 4.1 Mn1基因突变造成糖的积累 | 第79页 |
| 4.2 转录因子SRF1介导蔗糖信号对醇溶蛋白合成基因表达的调控 | 第79-81页 |
| 5 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-96页 |
| 附录 | 第96-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
