摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
引言 | 第10-12页 |
文献综述 | 第12-24页 |
1 花发育概述 | 第12-13页 |
2 水稻花器官的结构 | 第13页 |
3 花器官发育模型的研究进展 | 第13-17页 |
3.1 经典的ABC模型 | 第13-14页 |
3.2 ABCD模型 | 第14-15页 |
3.3 ABCDE模型 | 第15-16页 |
3.4 四因子模型 | 第16-17页 |
4 调控花器官发育的途径 | 第17-21页 |
4.1 MADS转录因子对花发育的调控 | 第17-19页 |
4.2 磷酸酯酶在花器官发育中的作用 | 第19-20页 |
4.3 miRNA在花器官发育中的作用 | 第20-21页 |
5 植物基因功能验证的几种方法 | 第21-24页 |
5.1 功能互补实验 | 第21页 |
5.2 RNA干扰 | 第21-22页 |
5.3 超表达 | 第22-24页 |
材料与方法 | 第24-30页 |
1 实验材料 | 第24页 |
1.1 植物材料 | 第24页 |
1.2 本试验所用载体 | 第24页 |
1.3 常用分子生物学试剂 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-30页 |
2.1 载体构建 | 第24-26页 |
2.1.1 PSD2候选基因TG1干扰载体pTCK303-TG1的构建 | 第25页 |
2.1.1.1 干扰载体pTCK303-TG1反向连接序列的导入 | 第25页 |
2.1.1.2 干扰载体pTCK303-TG1止向连接序列的导入 | 第25页 |
2.1.2 PSD2候选基因TG2互补载体 | 第25-26页 |
2.1.3 PSD2候选基因TG2启动子的GUS表达载体pTG2:GUS | 第26页 |
2.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第26-28页 |
2.2.1 传统侵染成熟胚愈伤的方法 | 第26-27页 |
2.2.1.1 接种 | 第26页 |
2.2.1.2 掐芽 | 第26页 |
2.2.1.3 继代 | 第26-27页 |
2.2.1.4 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第27页 |
2.2.1.5 抗性愈伤的继代筛选与再生植株 | 第27页 |
2.2.2 培养基 | 第27-28页 |
2.3 GUS基因的活性检测(组织化学定位法) | 第28页 |
2.4 转基因植株的检测与转基因植株基因型的鉴定 | 第28-30页 |
2.4.1 转基因植株的检测 | 第28页 |
2.4.2 转基因植株基因型的鉴定 | 第28-29页 |
2.4.3 基因型为psd2psd2的转基因植株的分子鉴定 | 第29-30页 |
结果与分析 | 第30-38页 |
1 PSD2候选基因TG2互补载体pCAMBIA1300-TG2的遗传转化及结果分析 | 第30-34页 |
1.1 TG2互补载体pCAMBIA1300-TG2的遗传转化以及转基因植株的分子鉴定 | 第30页 |
1.2 转基因植株的基因型鉴定 | 第30-31页 |
1.3 基因型为psd2psd2的转基因植株的分子鉴定 | 第31页 |
1.4 TG2互补植株小穗的表型分析 | 第31-33页 |
1.5 TG2互补植株表达水平的分析 | 第33-34页 |
2 TG2基因启动子的GUS表达载体的遗传转化及活性检测 | 第34-35页 |
2.1 TG2基因启动子的GUS表达载体pTG2:GUS的遗传转化 | 第34页 |
2.2 GUS活性检测 | 第34-35页 |
3 PSD2候选基因TG1干扰载体pTCK303-TG1的构建和转化 | 第35-38页 |
3.1 干扰载体pTCK303-TG1反向连接序列的导入 | 第35-36页 |
3.2 干扰载体pTCK303-TG1正向连接序列的导入 | 第36-37页 |
3.3 干扰载体pTCK303-TG1的转化 | 第37页 |
3.4 TG1干扰植株表达水平的分析 | 第37-38页 |
讨论 | 第38-41页 |
1 TG2是一个调控水稻雌雄蕊发育的关键基因 | 第38-39页 |
2 转基因中存在的问题及其原因分析 | 第39页 |
3 下一步工作 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录 | 第47-58页 |
附录1 本论文所使用的表达载体的结构示意图 | 第47-48页 |
附录2 分子生物学实验中的体系建立 | 第48页 |
附录3 本实验所用的其他实验方法 | 第48-52页 |
附录4 本实验所用基本培养基配方 | 第52-56页 |
附录5 GUS活性检测重要溶液 | 第56-57页 |
附录6 缩写词 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |