摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第8-20页 |
1.1 棉花抗黄萎病研究进展 | 第8-12页 |
1.1.1 棉花黄萎病的致病机理和影响因素 | 第8-9页 |
1.1.2 棉花黄萎病的抗性遗传和育种研究 | 第9-12页 |
1.2 植物抗病机制研究 | 第12-14页 |
1.3 病程相关蛋白 | 第14-18页 |
1.3.1 PR 蛋白的生化和组织特性 | 第14-15页 |
1.3.2 PR 蛋白的分类 | 第15-17页 |
1.3.3 PR 10 蛋白的特性 | 第17-18页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 材料和方法 | 第20-38页 |
2.1 材料与试剂 | 第20-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
2.1.3 细菌和真菌培养基 | 第20页 |
2.1.4 酶与试剂盒 | 第20-21页 |
2.1.5 实验试剂 | 第21-23页 |
2.1.5.1 RNA 提取溶液的配制 | 第21页 |
2.1.5.2 DNA 提取溶液的配制 | 第21-22页 |
2.1.5.3 SDS PAGE 试剂 | 第22页 |
2.1.5.4 其它试剂 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-38页 |
2.2.1 棉花 RNA 的抽提及 RNA 质量检测 | 第23-24页 |
2.2.2 GbPR10 1 基因的克隆 | 第24-25页 |
2.2.3 生物信息学分析 | 第25页 |
2.2.4 基因组 Southern 杂交分析 | 第25-30页 |
2.2.4.1 海岛棉基因组 DNA 的大量抽提 | 第25-26页 |
2.2.4.2 杂交试剂配制 | 第26页 |
2.2.4.3 探针的制备与标记 | 第26-27页 |
2.2.4.4 海岛棉基因组 DNA 的限制性酶切消化与凝胶电泳 | 第27页 |
2.2.4.5 凝胶的转膜和固定 | 第27-28页 |
2.2.4.6 探针与膜的杂交 | 第28页 |
2.2.4.7 杂交膜的清洗 | 第28-29页 |
2.2.4.8 杂交膜的自显影检测 | 第29-30页 |
2.2.5 GbPR10 1 基因在不同胁迫诱导下的表达分析 | 第30-31页 |
2.2.5.1 实验材料棉花的准备 | 第30页 |
2.2.5.2 海岛棉不同的胁迫诱导条件 | 第30页 |
2.2.5.3 使用 RT-PCR 作基因表达模式分析 | 第30-31页 |
2.2.6 GbPR10-1 蛋白的原核表达 | 第31-35页 |
2.2.6.1 含目标基因质粒的提取 | 第31-32页 |
2.2.6.2 将目的基因连接到原核表达载体 | 第32-34页 |
2.2.6.3 大肠杆菌(BL21)感受态细胞的制备和连接反应物的转化 | 第34-35页 |
2.2.6.4 重组质粒的诱导表达 | 第35页 |
2.2.7 表达蛋白的检测和纯化 | 第35-37页 |
2.2.7.1 SDS-PAGE 电泳 | 第35-36页 |
2.2.7.2 表达蛋白的分离纯化 | 第36-37页 |
2.2.8 表达蛋白核酸酶和抗真菌活性 | 第37-38页 |
第三章 结果分析 | 第38-48页 |
3.1 海岛棉 GbPR10-1 全长基因的序列分析 | 第38-42页 |
3.2 海岛棉 GbPR10-1 基因的 Southern 分析 | 第42-43页 |
3.3 GbPR10-1 基因的表达谱分析 | 第43-46页 |
3.4 GbPR10-1 的原核表达 | 第46-47页 |
3.5 GbPR10-1 重组蛋白的核酸酶和抑菌活性分析 | 第47-48页 |
第四章 总结与展望 | 第48-51页 |
4.1 研究总结 | 第48-49页 |
4.2 后续工作展望 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
缩写词中英文对照表 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第57-59页 |