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海岛棉GbPR10-1基因的克隆和功能分析

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第一章 文献综述第8-20页
    1.1 棉花抗黄萎病研究进展第8-12页
        1.1.1 棉花黄萎病的致病机理和影响因素第8-9页
        1.1.2 棉花黄萎病的抗性遗传和育种研究第9-12页
    1.2 植物抗病机制研究第12-14页
    1.3 病程相关蛋白第14-18页
        1.3.1 PR 蛋白的生化和组织特性第14-15页
        1.3.2 PR 蛋白的分类第15-17页
        1.3.3 PR 10 蛋白的特性第17-18页
    1.4 本研究的目的和意义第18-20页
第二章 材料和方法第20-38页
    2.1 材料与试剂第20-23页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 菌株和质粒第20页
        2.1.3 细菌和真菌培养基第20页
        2.1.4 酶与试剂盒第20-21页
        2.1.5 实验试剂第21-23页
            2.1.5.1 RNA 提取溶液的配制第21页
            2.1.5.2 DNA 提取溶液的配制第21-22页
            2.1.5.3 SDS PAGE 试剂第22页
            2.1.5.4 其它试剂第22-23页
    2.2 实验方法第23-38页
        2.2.1 棉花 RNA 的抽提及 RNA 质量检测第23-24页
        2.2.2 GbPR10 1 基因的克隆第24-25页
        2.2.3 生物信息学分析第25页
        2.2.4 基因组 Southern 杂交分析第25-30页
            2.2.4.1 海岛棉基因组 DNA 的大量抽提第25-26页
            2.2.4.2 杂交试剂配制第26页
            2.2.4.3 探针的制备与标记第26-27页
            2.2.4.4 海岛棉基因组 DNA 的限制性酶切消化与凝胶电泳第27页
            2.2.4.5 凝胶的转膜和固定第27-28页
            2.2.4.6 探针与膜的杂交第28页
            2.2.4.7 杂交膜的清洗第28-29页
            2.2.4.8 杂交膜的自显影检测第29-30页
        2.2.5 GbPR10 1 基因在不同胁迫诱导下的表达分析第30-31页
            2.2.5.1 实验材料棉花的准备第30页
            2.2.5.2 海岛棉不同的胁迫诱导条件第30页
            2.2.5.3 使用 RT-PCR 作基因表达模式分析第30-31页
        2.2.6 GbPR10-1 蛋白的原核表达第31-35页
            2.2.6.1 含目标基因质粒的提取第31-32页
            2.2.6.2 将目的基因连接到原核表达载体第32-34页
            2.2.6.3 大肠杆菌(BL21)感受态细胞的制备和连接反应物的转化第34-35页
            2.2.6.4 重组质粒的诱导表达第35页
        2.2.7 表达蛋白的检测和纯化第35-37页
            2.2.7.1 SDS-PAGE 电泳第35-36页
            2.2.7.2 表达蛋白的分离纯化第36-37页
        2.2.8 表达蛋白核酸酶和抗真菌活性第37-38页
第三章 结果分析第38-48页
    3.1 海岛棉 GbPR10-1 全长基因的序列分析第38-42页
    3.2 海岛棉 GbPR10-1 基因的 Southern 分析第42-43页
    3.3 GbPR10-1 基因的表达谱分析第43-46页
    3.4 GbPR10-1 的原核表达第46-47页
    3.5 GbPR10-1 重组蛋白的核酸酶和抑菌活性分析第47-48页
第四章 总结与展望第48-51页
    4.1 研究总结第48-49页
    4.2 后续工作展望第49-51页
参考文献第51-55页
缩写词中英文对照表第55-56页
致谢第56-57页
攻读学位期间发表的论文第57-59页

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