摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 引言 | 第13-20页 |
1.1 血流切应力对ECs 的影响 | 第14-16页 |
1.2 Connexin 在血管组织中的表达及功能 | 第16-18页 |
1.3 组蛋白去乙酰化酶SIRT1 在ECs 中的功能 | 第18-20页 |
1.4 本文研究的主要内容及创新点 | 第20页 |
2 实验材料及仪器 | 第20-24页 |
2.1 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2 试剂 | 第21-22页 |
2.3 主要溶液成分及配制 | 第22-24页 |
3 实验方法 | 第24-36页 |
3.1 人脐静脉ECs 原代培养 | 第24-25页 |
3.2 ECs 的传代培养 | 第25页 |
3.3 细胞计数方法 | 第25页 |
3.4 细胞冻存与复苏 | 第25页 |
3.5 ECs 的鉴定 | 第25-26页 |
3.6 切应力梯度加载系统 | 第26-30页 |
3.7 实验分组 | 第30页 |
3.8 RNA 的提取(TRIzol 法) | 第30页 |
3.9 RT-PCR 实验 | 第30-32页 |
3.10 Real-Time PCR 实验 | 第32页 |
3.11 蛋白提取 | 第32页 |
3.12 蛋白免疫印迹检测 | 第32-33页 |
3.13 加药处理实验 | 第33页 |
3.14 RNA 干扰实验 | 第33-34页 |
3.15 细胞形态学指数 | 第34-36页 |
3.16 统计学方法 | 第36页 |
4 结果 | 第36-52页 |
4.1 ECs 原代培养与鉴定 | 第36-37页 |
4.2 切应力梯度流动腔数值模拟 | 第37-38页 |
4.3 切应力梯度下ECs 的细胞形态分析 | 第38-41页 |
4.4 切应力梯度激活ECs 的p-SIRT1、p-ERK 细胞信号通路,诱导ECs 的connexin37 和connexin43 基因表 | 第41-44页 |
4.5 切应力梯度下,SIRT1 激动剂Resveratrol 促进ECs 的connexin37 和connexin43 基因表达 | 第44-48页 |
4.6 SIRT1 RNA 干扰抑制ECs 的connexin43 表达 | 第48-50页 |
4.7 p-ERK 抑制剂下调ECs 的connexin43 表达 | 第50-52页 |
5 讨论 | 第52-57页 |
5.1 切应力梯度改变ECs 形态 | 第53页 |
5.2 切应力梯度上调ECs 的connexin37、connexin43 表 | 第53-55页 |
5.3 切应力梯度上调ECs 的p-SIRT1、p-ERK 表达 | 第55页 |
5.4 SIRT1 在调节connexin43 表达中的作用 | 第55-56页 |
5.5 p-ERK 在调节connexin43 表达中的作用 | 第56-57页 |
6 展望 | 第57-59页 |
全文小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
攻读硕士学位期间已完成或发表的学术论文 | 第66-71页 |
上海交通大学学位论文答辩决议书 | 第71页 |