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切应力梯度调控血管内皮细胞CONNEXIN表达的机制

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1 引言第13-20页
    1.1 血流切应力对ECs 的影响第14-16页
    1.2 Connexin 在血管组织中的表达及功能第16-18页
    1.3 组蛋白去乙酰化酶SIRT1 在ECs 中的功能第18-20页
    1.4 本文研究的主要内容及创新点第20页
2 实验材料及仪器第20-24页
    2.1 实验仪器第20-21页
    2.2 试剂第21-22页
    2.3 主要溶液成分及配制第22-24页
3 实验方法第24-36页
    3.1 人脐静脉ECs 原代培养第24-25页
    3.2 ECs 的传代培养第25页
    3.3 细胞计数方法第25页
    3.4 细胞冻存与复苏第25页
    3.5 ECs 的鉴定第25-26页
    3.6 切应力梯度加载系统第26-30页
    3.7 实验分组第30页
    3.8 RNA 的提取(TRIzol 法)第30页
    3.9 RT-PCR 实验第30-32页
    3.10 Real-Time PCR 实验第32页
    3.11 蛋白提取第32页
    3.12 蛋白免疫印迹检测第32-33页
    3.13 加药处理实验第33页
    3.14 RNA 干扰实验第33-34页
    3.15 细胞形态学指数第34-36页
    3.16 统计学方法第36页
4 结果第36-52页
    4.1 ECs 原代培养与鉴定第36-37页
    4.2 切应力梯度流动腔数值模拟第37-38页
    4.3 切应力梯度下ECs 的细胞形态分析第38-41页
    4.4 切应力梯度激活ECs 的p-SIRT1、p-ERK 细胞信号通路,诱导ECs 的connexin37 和connexin43 基因表第41-44页
    4.5 切应力梯度下,SIRT1 激动剂Resveratrol 促进ECs 的connexin37 和connexin43 基因表达第44-48页
    4.6 SIRT1 RNA 干扰抑制ECs 的connexin43 表达第48-50页
    4.7 p-ERK 抑制剂下调ECs 的connexin43 表达第50-52页
5 讨论第52-57页
    5.1 切应力梯度改变ECs 形态第53页
    5.2 切应力梯度上调ECs 的connexin37、connexin43 表第53-55页
    5.3 切应力梯度上调ECs 的p-SIRT1、p-ERK 表达第55页
    5.4 SIRT1 在调节connexin43 表达中的作用第55-56页
    5.5 p-ERK 在调节connexin43 表达中的作用第56-57页
6 展望第57-59页
全文小结第59-60页
参考文献第60-65页
致谢第65-66页
攻读硕士学位期间已完成或发表的学术论文第66-71页
上海交通大学学位论文答辩决议书第71页

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