| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·尸胺简介 | 第9-14页 |
| ·尸胺的性质 | 第9页 |
| ·尸胺的生物学作用 | 第9-11页 |
| ·新型耐高温塑料尼龙-56 | 第11-12页 |
| ·尸胺的生产方法 | 第12-14页 |
| ·L-赖氨酸脱羧酶 | 第14-16页 |
| ·L-赖氨酸脱羧酶性质和来源 | 第14-15页 |
| ·L-赖氨酸脱羧酶酶活测定方法 | 第15-16页 |
| ·谷氨酸棒杆菌表达体系 | 第16-19页 |
| ·棒杆菌载体系统的研究 | 第16-18页 |
| ·转化技术 | 第18-19页 |
| ·论文立题背景及主要内容 | 第19-21页 |
| ·立题背景 | 第19-20页 |
| ·本课题研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·溶液 | 第22-23页 |
| ·培养基和抗生素 | 第23-24页 |
| ·仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-36页 |
| ·Hafnia alvei染色体的提取 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·基因克隆 | 第25-27页 |
| ·克隆载体的构建与鉴定 | 第27-29页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第29-30页 |
| ·谷氨酸棒杆菌转化实验 | 第30-32页 |
| ·分析测定方法 | 第32-34页 |
| ·酶活分析 | 第34-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-59页 |
| ·基因克隆 | 第36-41页 |
| ·Hafnia alvei AS1.1009染色体DNA的提取 | 第36页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第36-37页 |
| ·克隆载体的构建与鉴定 | 第37页 |
| ·酶切验证 | 第37-39页 |
| ·赖氨酸脱羧酶基因序列分析 | 第39-41页 |
| ·重组质粒pXMJ19-1dc的构建及鉴定 | 第41-43页 |
| ·重组质粒电转化C.glutamicum | 第43-45页 |
| ·培养基对C.glutamicum电击转化的影响 | 第43页 |
| ·细菌生长至不同时期对转化效率的影响 | 第43页 |
| ·电场强度对转化率的影响 | 第43-44页 |
| ·细胞浓度对转化效率的影响 | 第44-45页 |
| ·重组菌株的获得与基因鉴定 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第46页 |
| ·相关产物检测 | 第46-50页 |
| ·赖氨酸的定性分析 | 第46-47页 |
| ·赖氨酸的定量测定 | 第47页 |
| ·葡萄糖定量测定 | 第47-48页 |
| ·尸胺分析 | 第48-50页 |
| ·基因工程菌发酵条件的研究 | 第50-55页 |
| ·重组菌与原始菌生长曲线及重组菌的初始尸胺产量 | 第50-51页 |
| ·接种量对发酵的影响 | 第51-52页 |
| ·供氧条件对尸胺发酵的影响 | 第52-53页 |
| ·碳源、氮源、豆饼水解液对尸胺发酵的影响 | 第53-55页 |
| ·添加醋酸对发酵的影响 | 第55页 |
| ·优化条件下发酵 | 第55-57页 |
| ·酶活测定 | 第57-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 5 展望 | 第60-61页 |
| 6 参考文献 | 第61-66页 |