| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 HIV-1 MPER 表位分支肽免疫原的研究 | 第16-62页 |
| 第一节 背景知识 | 第16-30页 |
| 1.1 HIV 病毒简介 | 第16-17页 |
| 1.2 HIV 疫苗研究现状 | 第17-20页 |
| 1.3 HIV 广泛中和抗体 | 第20-27页 |
| 1.4 分支肽疫苗、豚鼠实验动物 | 第27-28页 |
| 1.5 立题依据及设计 | 第28-30页 |
| 第二节 四分支肽免疫原表位表征 | 第30-36页 |
| 一. 实验材料 | 第30-31页 |
| 1.1 Tricine SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第30-31页 |
| 二. 实验方法 | 第31-32页 |
| 2.1 高效液相色谱（HPLC） | 第31页 |
| 2.2 质谱（MS） | 第31页 |
| 2.3 Tricine SDS-PAGE 电泳 | 第31-32页 |
| 2.4 吸附中和实验 | 第32页 |
| 三. 实验结果 | 第32-36页 |
| 3.1 确定多肽的纯度和分子量 | 第32-34页 |
| 3.2 分子水平验证多肽免疫原表位正确性 | 第34-35页 |
| 3.3 细胞水平上确认多肽免疫原表位正确性 | 第35-36页 |
| 第三节 MPER 表位多肽免疫原和免疫策略的探索 | 第36-47页 |
| 一. 实验材料 | 第36-40页 |
| 1.1 主要试剂 | 第36-38页 |
| 1.2 试剂配方 | 第38页 |
| 1.3 多肽 | 第38-39页 |
| 1.4 质粒、病毒及细胞系 | 第39-40页 |
| 1.5 实验动物 | 第40页 |
| 二. 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.1 动物免疫 | 第40页 |
| 2.2 动物采血 | 第40-41页 |
| 2.3 ELISA 检测 | 第41页 |
| 2.4 HIV-1 假病毒包装 | 第41页 |
| 2.5 HIV-1 假病毒的滴度测定 | 第41-42页 |
| 2.6 HIV-1 假病毒中和实验 | 第42-43页 |
| 2.7 统计学处理方法 | 第43页 |
| 三. 实验结果 | 第43-47页 |
| 3.1 免疫原的选择 | 第43-44页 |
| 3.2 免疫佐剂的选择 | 第44-45页 |
| 3.3 免疫剂量的考察 | 第45-47页 |
| 第四节 四分支肽免疫原免疫原性表征 | 第47-59页 |
| 一. 实验材料 | 第47页 |
| 1.1 Protein A 纯化抗体柱的相关试剂 | 第47页 |
| 1.2 ADCC 相关试剂 | 第47页 |
| 二. 实验方法 | 第47-50页 |
| 2.1 抗体分型 | 第47-48页 |
| 2.2 抗体纯化 | 第48页 |
| 2.3 ADCC | 第48-49页 |
| 2.4 线性表位多肽抑制四分支肽抗血清纯化 IgG 中和活性实验 | 第49-50页 |
| 三. 实验结果 | 第50-59页 |
| 3.1 四分支肽免疫原诱导抗血清的特异性结合活性 | 第50-51页 |
| 3.2 豚鼠单只血清中和实验结果 | 第51-54页 |
| 3.3 ADCC 活性 | 第54-55页 |
| 3.4 抗血清纯化后得到的 IgG 的免疫原性和中和活性 | 第55-57页 |
| 3.5 四分支肽免疫原诱导出的 HIV-1 中和抗体识别线性表位 | 第57-58页 |
| 3.6 数据统计 | 第58-59页 |
| 讨论 | 第59-60页 |
| 小结 | 第60-62页 |
| 第二章 MPER 衍生多肽的促感染活性的研究 | 第62-104页 |
| 第一节 背景知识 | 第62-68页 |
| 1.1 逆转录病毒载体在基因治疗中的重要地位 | 第62-63页 |
| 1.2 人及 HIV 病毒来源的多肽对于 HIV 感染的促进作用 | 第63-64页 |
| 1.3 HIV 包膜蛋白和 MPER | 第64页 |
| 1.4 淀粉样纤维及其促进病毒感染的研究 | 第64-66页 |
| 1.5 立体依据和设计 | 第66-68页 |
| 第二节 MPER 衍生肽促感染活性的发现和确认 | 第68-93页 |
| 一. 材料、试剂和仪器 | 第68-70页 |
| 1.1 多肽合成 | 第68页 |
| 1.2 细胞、病毒和单克隆抗体 | 第68-69页 |
| 1.3 主要试剂和材料 | 第69页 |
| 1.4 试剂配制 | 第69-70页 |
| 1.5 主要仪器与设备 | 第70页 |
| 二. 实验方法 | 第70-78页 |
| 2.1 多肽配制 | 第70页 |
| 2.2 硫磺素 T (ThT) 结合实验 | 第70-71页 |
| 2.3 透射电镜 (TEM) | 第71页 |
| 2.4 细胞杀伤实验（MTT） | 第71页 |
| 2.5 病毒包装 | 第71-73页 |
| 2.6 HIV-1 感染实验 | 第73-77页 |
| 2.7 血凝实验 | 第77-78页 |
| 三. 实验结果 | 第78-93页 |
| 3.1 4E10-LP（P13）促感染活性的发现 | 第78-79页 |
| 3.2 以 P13 为基础的分子改造 | 第79-80页 |
| 3.3 P16 促感染作用的特征 | 第80-89页 |
| 3.4 P16 与常用促感染试剂的活性比较 | 第89-90页 |
| 3.5 P16 促感染活性并不局限于 HIV-1 包膜病毒 | 第90-93页 |
| 第三节 P16 促感染活性的机理研究 | 第93-100页 |
| 一. 实验材料 | 第93-94页 |
| 1.1 多肽 | 第93页 |
| 1.2 试剂配制 | 第93-94页 |
| 二. 实验方法 | 第94-95页 |
| 2.1 Zeta 电位测定 | 第94页 |
| 2.2 不同磷酸盐缓冲液条件下 P16 促感染情况考察实验 | 第94页 |
| 2.3 阴离子多聚物肝素抑制 P16 介导的 HIV-1 感染增强作用实验 | 第94-95页 |
| 三. 实验结果 | 第95-100页 |
| 3.1 正电氨基酸对于 P16 促感染活性的影响 | 第95-98页 |
| 3.2 芳香性氨基酸 Trp 对于 P16 促感染活性的影响 | 第98-100页 |
| 讨论 | 第100-102页 |
| 小结 | 第102-104页 |
| 结论 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-123页 |
| 作者简历 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
