摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1.1 昆虫气味结合蛋白(Odorant binding proteins,OBPs) | 第12-14页 |
1.1.1 气味结合蛋白的种类 | 第12-13页 |
1.1.2 昆虫气味结合蛋白的一般特性和分子结构 | 第13页 |
1.1.3 气味结合蛋白的表达部位 | 第13页 |
1.1.4 气味结合蛋白的功能 | 第13-14页 |
1.1.5 气味结合蛋白的三维结构 | 第14页 |
1.2 化学感受蛋白(Chemosensory proteins,CSPs) | 第14-16页 |
1.2.1 化学感受蛋白的种类 | 第15页 |
1.2.2 化学感受蛋白的分子结构 | 第15页 |
1.2.3 化学感受蛋白的表达 | 第15页 |
1.2.4 化学感受蛋白的功能 | 第15-16页 |
1.2.5 化学感受蛋白的三维结构 | 第16页 |
1.3 气味受体(Odorant receptor,ORs) | 第16-18页 |
1.3.1 气味受体的研究进展 | 第17页 |
1.3.2 昆虫气味受体的种类及分子结构 | 第17-18页 |
1.3.3 气味受体的表达 | 第18页 |
1.3.4 气味受体的功能 | 第18页 |
1.4 感觉神经元膜蛋白(Sensory neuron membarane proteins,SNMPs) | 第18-19页 |
1.5 气味降解酶(Odorant degrading enzymes,ODEs) | 第19页 |
1.6 本研究的的目的和技术路线 | 第19-21页 |
1.6.1 研究目的和意义 | 第19-20页 |
1.6.2 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 桃蛀螟触角 cDNA 文库的构建 | 第21-28页 |
2.1 材料与方法 | 第21-24页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第21页 |
2.1.3 总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
2.1.4 第一链 cDNA 的合成 | 第22页 |
2.1.5 LD-PCR 合成双链 cDNA | 第22-23页 |
2.1.6 ds cDNA 的纯化与分离 | 第23页 |
2.1.7 ds cDNA 与 pSMART2IFD 载体连接 | 第23-24页 |
2.1.8 重组质粒电转入 E.coli 感受态细胞 | 第24页 |
2.1.9 文库质量鉴定 | 第24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-26页 |
2.2.1 总 RNA 的提取 | 第24-25页 |
2.2.2 最佳循环数的确定 | 第25页 |
2.2.3 ds cDNA 分析 | 第25页 |
2.2.4 ds cDNA 的纯化与分离 | 第25-26页 |
2.2.5 菌液 PCR 鉴定文库插入片段大小 | 第26页 |
2.3 讨论 | 第26-28页 |
第三章 桃蛀螟触角 ESTs 序列测定与分析 | 第28-36页 |
3.1 材料与方法 | 第28-29页 |
3.1.1 材料 | 第28页 |
3.1.2 方法 | 第28-29页 |
3.2 结果与分析 | 第29-35页 |
3.2.1 菌落 PCR 鉴定 | 第29页 |
3.2.2 EST 序列分析 | 第29-30页 |
3.2.3 OBP 相关基因分析 | 第30-33页 |
3.2.4 CSP 相关基因分析 | 第33-34页 |
3.2.5 OR 相关基因分析 | 第34-35页 |
3.3 讨论 | 第35-36页 |
第四章 桃蛀螟 Orco 嗅觉受体基因的克隆和表达谱分析 | 第36-42页 |
4.1 材料与方法 | 第36-38页 |
4.1.1 材料和试剂 | 第36页 |
4.1.2 桃蛀螟不同组织总 RNA 的提取 | 第36页 |
4.1.3 双链 cDNA 的合成 | 第36页 |
4.1.4 引物设计和合成 | 第36-37页 |
4.1.5 PCR 扩增 | 第37页 |
4.1.6 PCR 产物的回收、克隆和测序 | 第37页 |
4.1.7 序列分析 | 第37页 |
4.1.8 荧光定量 PCR | 第37-38页 |
4.1.9 数据统计与分析 | 第38页 |
4.2 结果与分析 | 第38-41页 |
4.2.1 桃蛀螟触角 Orco 基因序列分析 | 第38-40页 |
4.2.2 荧光定量 PCR 结果分析 | 第40-41页 |
4.3 讨论 | 第41-42页 |
第五章 桃蛀螟嗅觉相关蛋白的组织表达分析 | 第42-47页 |
5.1 材料与方法 | 第42-44页 |
5.1.1 试剂与仪器 | 第42页 |
5.1.2 RNA 的提取 | 第42页 |
5.1.3 cDNA 的合成 | 第42页 |
5.1.4 引物设计 | 第42-44页 |
5.1.5 内参基因调整 cDNA 浓度 | 第44页 |
5.1.6 PCR 扩增 | 第44页 |
5.2 结果分析 | 第44-46页 |
5.2.1 桃蛀螟触角 OBP 基因序列分析 | 第44-45页 |
5.2.2 桃蛀螟触角 CSP 基因序列分析 | 第45-46页 |
5.3 讨论 | 第46-47页 |
第六章 全文总结 | 第47-49页 |
6.1 桃蛀螟触角 cDNA 文库的构建及生物信息学分析 | 第47页 |
6.2 受体基因 CpunOrco 的克隆和表达谱分析 | 第47页 |
6.3 OBP 和 CSP 基因在雌雄蛾不同组织的表达 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附录 | 第57-68页 |
在读期间发表的论文 | 第68-69页 |
作者简历 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |