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桃蛀螟嗅觉相关基因的筛选与表达谱分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第11-21页
    1.1 昆虫气味结合蛋白(Odorant binding proteins,OBPs)第12-14页
        1.1.1 气味结合蛋白的种类第12-13页
        1.1.2 昆虫气味结合蛋白的一般特性和分子结构第13页
        1.1.3 气味结合蛋白的表达部位第13页
        1.1.4 气味结合蛋白的功能第13-14页
        1.1.5 气味结合蛋白的三维结构第14页
    1.2 化学感受蛋白(Chemosensory proteins,CSPs)第14-16页
        1.2.1 化学感受蛋白的种类第15页
        1.2.2 化学感受蛋白的分子结构第15页
        1.2.3 化学感受蛋白的表达第15页
        1.2.4 化学感受蛋白的功能第15-16页
        1.2.5 化学感受蛋白的三维结构第16页
    1.3 气味受体(Odorant receptor,ORs)第16-18页
        1.3.1 气味受体的研究进展第17页
        1.3.2 昆虫气味受体的种类及分子结构第17-18页
        1.3.3 气味受体的表达第18页
        1.3.4 气味受体的功能第18页
    1.4 感觉神经元膜蛋白(Sensory neuron membarane proteins,SNMPs)第18-19页
    1.5 气味降解酶(Odorant degrading enzymes,ODEs)第19页
    1.6 本研究的的目的和技术路线第19-21页
        1.6.1 研究目的和意义第19-20页
        1.6.2 技术路线第20-21页
第二章 桃蛀螟触角 cDNA 文库的构建第21-28页
    2.1 材料与方法第21-24页
        2.1.1 供试昆虫第21页
        2.1.2 主要试剂及仪器第21页
        2.1.3 总 RNA 的提取第21-22页
        2.1.4 第一链 cDNA 的合成第22页
        2.1.5 LD-PCR 合成双链 cDNA第22-23页
        2.1.6 ds cDNA 的纯化与分离第23页
        2.1.7 ds cDNA 与 pSMART2IFD 载体连接第23-24页
        2.1.8 重组质粒电转入 E.coli 感受态细胞第24页
        2.1.9 文库质量鉴定第24页
    2.2 结果与分析第24-26页
        2.2.1 总 RNA 的提取第24-25页
        2.2.2 最佳循环数的确定第25页
        2.2.3 ds cDNA 分析第25页
        2.2.4 ds cDNA 的纯化与分离第25-26页
        2.2.5 菌液 PCR 鉴定文库插入片段大小第26页
    2.3 讨论第26-28页
第三章 桃蛀螟触角 ESTs 序列测定与分析第28-36页
    3.1 材料与方法第28-29页
        3.1.1 材料第28页
        3.1.2 方法第28-29页
    3.2 结果与分析第29-35页
        3.2.1 菌落 PCR 鉴定第29页
        3.2.2 EST 序列分析第29-30页
        3.2.3 OBP 相关基因分析第30-33页
        3.2.4 CSP 相关基因分析第33-34页
        3.2.5 OR 相关基因分析第34-35页
    3.3 讨论第35-36页
第四章 桃蛀螟 Orco 嗅觉受体基因的克隆和表达谱分析第36-42页
    4.1 材料与方法第36-38页
        4.1.1 材料和试剂第36页
        4.1.2 桃蛀螟不同组织总 RNA 的提取第36页
        4.1.3 双链 cDNA 的合成第36页
        4.1.4 引物设计和合成第36-37页
        4.1.5 PCR 扩增第37页
        4.1.6 PCR 产物的回收、克隆和测序第37页
        4.1.7 序列分析第37页
        4.1.8 荧光定量 PCR第37-38页
        4.1.9 数据统计与分析第38页
    4.2 结果与分析第38-41页
        4.2.1 桃蛀螟触角 Orco 基因序列分析第38-40页
        4.2.2 荧光定量 PCR 结果分析第40-41页
    4.3 讨论第41-42页
第五章 桃蛀螟嗅觉相关蛋白的组织表达分析第42-47页
    5.1 材料与方法第42-44页
        5.1.1 试剂与仪器第42页
        5.1.2 RNA 的提取第42页
        5.1.3 cDNA 的合成第42页
        5.1.4 引物设计第42-44页
        5.1.5 内参基因调整 cDNA 浓度第44页
        5.1.6 PCR 扩增第44页
    5.2 结果分析第44-46页
        5.2.1 桃蛀螟触角 OBP 基因序列分析第44-45页
        5.2.2 桃蛀螟触角 CSP 基因序列分析第45-46页
    5.3 讨论第46-47页
第六章 全文总结第47-49页
    6.1 桃蛀螟触角 cDNA 文库的构建及生物信息学分析第47页
    6.2 受体基因 CpunOrco 的克隆和表达谱分析第47页
    6.3 OBP 和 CSP 基因在雌雄蛾不同组织的表达第47-49页
参考文献第49-57页
附录第57-68页
在读期间发表的论文第68-69页
作者简历第69-70页
致谢第70-71页

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