摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文缩略表 | 第7-12页 |
第1章 引言 | 第12-16页 |
1.1 概述 | 第12页 |
1.2 研究移植静脉重塑的现实意义 | 第12-13页 |
1.3 移植静脉重塑过程的研究现状 | 第13-16页 |
第2章 兔移植静脉细胞增殖变化的关键时间点 | 第16-36页 |
引言 | 第16页 |
2.1 实验材料 | 第16-20页 |
2.1.1 实验动物 | 第16页 |
2.1.2 实验仪器 | 第16-17页 |
2.1.3 实验试剂 | 第17-18页 |
2.1.4 主要溶液试剂配方 | 第18-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-22页 |
2.2.1 实验环境 | 第20页 |
2.2.2 实验分组 | 第20-21页 |
2.2.3 动物模型的建立 | 第21页 |
2.2.4 标本采集及处理 | 第21-22页 |
2.3 实验检测 | 第22-26页 |
2.3.1 HE染色 | 第22页 |
2.3.2 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第22-23页 |
2.3.3 Western Blot检测 | 第23-25页 |
2.3.4 免疫组化 | 第25-26页 |
2.3.5 透射电镜检测 | 第26页 |
2.4 统计学方法 | 第26-27页 |
2.5 实验结果 | 第27-31页 |
2.5.1 动物模型建立情况 | 第27页 |
2.5.2 移植静脉病理变化 | 第27-29页 |
2.5.3 透射电镜检测 | 第29页 |
2.5.4 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
2.5.5 Western Bloting和免疫组化检测PCNA表达情况 | 第30-31页 |
2.6 讨论 | 第31-35页 |
2.7 小结 | 第35-36页 |
第3章 移植静脉桥关键时间点转录组学研究 | 第36-78页 |
引言 | 第36页 |
3.1 实验材料 | 第36-39页 |
3.1.1 实验动物 | 第36页 |
3.1.2 实验器械 | 第36-37页 |
3.1.3 实验试剂 | 第37-38页 |
3.1.4 芯片信息 | 第38页 |
3.1.5 主要数据库介绍 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39页 |
3.2.1 实验环境 | 第39页 |
3.2.2 实验分组 | 第39页 |
3.2.3 动物模型建立 | 第39页 |
3.2.4 标本采集及处理 | 第39页 |
3.3 实验检测 | 第39-47页 |
3.3.1 RNA样品抽提 | 第39-41页 |
3.3.2 总RNA清理和RNA质量检测 | 第41-42页 |
3.3.3 准备标记反应 | 第42-43页 |
3.3.4 标记/扩增的RNA和标记cRNA QC的净化 | 第43页 |
3.3.5 杂交 | 第43-44页 |
3.3.6 清洗芯片 | 第44-45页 |
3.3.7 扫描并用Agilent Feature Extraction软件提取数据 | 第45-46页 |
3.3.8 逆转录、实时定量RT-PCR分析验证芯片结果 | 第46-47页 |
3.4 统计学方法 | 第47页 |
3.5 实验结果 | 第47-69页 |
3.5.1 芯片实验量化和质量评估 | 第47-49页 |
3.5.2 芯片扫描图及原始数据 | 第49页 |
3.5.3 两个时间点与对照组正常静脉差异基因筛选 | 第49-50页 |
3.5.4 差异基因功能分析 | 第50-63页 |
3.5.5 差异基因通路分析 | 第63-66页 |
3.5.6 mTOR信号通路基因在移植静脉血管重塑过程中变化情况 | 第66-68页 |
3.5.7 qRT-PCR验证mTOR信号通路相关基因变化情况 | 第68-69页 |
3.6 讨论 | 第69-76页 |
3.6.1 重塑过程中基因表达变化 | 第71页 |
3.6.2 两个时间点移植静脉中的差异基因GO分析 | 第71-72页 |
3.6.3 两个时间点移植静脉中的差异基因Pathway分析 | 第72-73页 |
3.6.4 mTOR信号通路在移植静脉血管重塑过程中作用 | 第73-76页 |
3.7 小结 | 第76-78页 |
第4章 结论与展望 | 第78-80页 |
4.1 主要结论 | 第78页 |
4.2 创新点 | 第78页 |
4.3 进一步工作的方向 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第91-92页 |
综述 | 第92-102页 |
参考文献 | 第99-102页 |