摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-35页 |
1.1 肌肉卫星细胞 | 第13-16页 |
1.1.1 肌肉卫星细胞为骨骼肌干细胞 | 第13-14页 |
1.1.2 肌肉卫星细胞的体节起源 | 第14-16页 |
1.2 肌肉卫星细胞生理 | 第16-29页 |
1.2.1 肌肉卫星细胞标记 | 第16-18页 |
1.2.2 肌肉卫星细胞微环境 | 第18-19页 |
1.2.3 肌肉卫星细胞静息和激活调控 | 第19-25页 |
1.2.4 肌肉卫星细胞迁移 | 第25-27页 |
1.2.5 成肌分化 | 第27-29页 |
1.3 Krüppel样因子(The Krüppel-like factor,KLF) | 第29-31页 |
1.4 KLFs与肌肉发育 | 第31-33页 |
1.4.1 心肌 | 第31-32页 |
1.4.2 平滑肌 | 第32页 |
1.4.3 骨骼肌 | 第32-33页 |
1.5 KLF7研究进展 | 第33-35页 |
第二章 试验材料与方法 | 第35-44页 |
2.1 试验材料 | 第35页 |
2.1.1 实验动物 | 第35页 |
2.1.2 主要试验试剂 | 第35页 |
2.2 试验方法 | 第35-42页 |
2.2.1 小鼠单根肌纤维的分离培养 | 第35-36页 |
2.2.2 小鼠肌肉卫星细胞的分离纯化培养 | 第36页 |
2.2.3 成肌细胞C2C12培养 | 第36页 |
2.2.4 细胞转染 | 第36-37页 |
2.2.5 真核表达质粒的构建 | 第37页 |
2.2.6 腺病毒过表达质粒的构建及病毒准备 | 第37-39页 |
2.2.7 实时定量PCR分析 | 第39-40页 |
2.2.8 Western Blot分析 | 第40-41页 |
2.2.9 双荧光素酶报告分析 | 第41页 |
2.2.10 免疫荧光分析 | 第41-42页 |
2.2.11 EdU标记细胞增殖分析 | 第42页 |
2.3 数据分析 | 第42-44页 |
第三章 KLF7在调节肌肉卫星细胞静息中起关键作用 | 第44-52页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 结果与分析 | 第44-49页 |
3.2.1 静息态肌肉卫星细胞KLF7表达水平较高 | 第44-46页 |
3.2.2 KLF7在非分裂期的成肌细胞表达较高 | 第46-47页 |
3.2.3 干扰KLF7促进肌肉卫星细胞激活和扩增 | 第47-48页 |
3.2.4 干扰KLF7促进成肌细胞增殖 | 第48-49页 |
3.2.5 过表达KLF7抑制成肌细胞增殖 | 第49页 |
3.3 讨论 | 第49-51页 |
3.4 小结 | 第51-52页 |
第四章 KLF7调控肌肉卫星细胞静息与成肌细胞细胞周期阻滞依赖于p21 | 第52-57页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 结果与分析 | 第52-55页 |
4.2.1 肌肉细胞中KLF7调控p21表达 | 第52-53页 |
4.2.2 干扰p21促进成肌细胞增殖 | 第53-54页 |
4.2.3 干扰p21促进肌肉卫星细胞激活和扩增 | 第54页 |
4.2.4 KLF7调控肌肉卫星细胞激活依赖于p21 | 第54-55页 |
4.2.5 KLF7调控成肌细胞增殖依赖于p21 | 第55页 |
4.3 讨论 | 第55-56页 |
4.4 小结 | 第56-57页 |
第五章 KLF7调控肌肉细胞增殖及p21表达可能依赖于自身乙酰化修饰 | 第57-62页 |
5.1 引言 | 第57页 |
5.2 结果与分析 | 第57-60页 |
5.2.1 KLF家族因子乙酰化位点保守性分析 | 第57-58页 |
5.2.2 构建KLF7乙酰化位点突变载体 | 第58页 |
5.2.3 KLF7调控p21启动子转录激活可能依赖于乙酰化修饰 | 第58-59页 |
5.2.4 KLF7乙酰化位点对其在肌肉细胞中增殖调控的重要性 | 第59-60页 |
5.3 讨论 | 第60页 |
5.4 小结 | 第60-62页 |
第六章 肌肉细胞中TGF-β信号负调控KLF7 | 第62-67页 |
6.1 引言 | 第62-63页 |
6.2 结果与分析 | 第63-65页 |
6.2.1 TGF-β信号通路阻断抑制成肌细胞增殖 | 第63页 |
6.2.2 TGF-β信号通路阻断抑制肌肉卫星细胞激活和扩增 | 第63-64页 |
6.2.3 TGF-β信号在肌肉细胞中负调控KLF7 | 第64页 |
6.2.4 KLF7介导TGF-β信号通路阻断诱导的成肌细胞增殖抑制 | 第64页 |
6.2.5 TGF-β信号通路阻断诱导的肌肉卫星细胞静息依赖于KLF7 | 第64-65页 |
6.3 讨论 | 第65-66页 |
6.4 小结 | 第66-67页 |
第七章 KLF7介导经典Notch信号通路诱导的肌肉卫星细胞静息 | 第67-72页 |
7.1 引言 | 第67页 |
7.2 结果与分析 | 第67-70页 |
7.2.1 N3ICD活性片段过表达激活Notch信号下游靶基因 | 第67-68页 |
7.2.2 经典Notch信号通路激活促进KLF7表达 | 第68-69页 |
7.2.3 KLF7介导经典Notch信号通路诱导的成肌细胞细胞周期阻滞 | 第69页 |
7.2.4 经典Notch信号通路诱导的肌肉卫星细胞静息需要KLF7介导 | 第69-70页 |
7.3 讨论 | 第70-71页 |
7.4 小结 | 第71-72页 |
第八章 KLF7没有参与肌肉细胞成肌分化调控 | 第72-76页 |
8.1 引言 | 第72页 |
8.2 结果与分析 | 第72-74页 |
8.2.1 KLF7在成肌细胞分化阶段表达特征 | 第72页 |
8.2.2 干扰KLF7不影响成肌分化标志基因表达 | 第72-73页 |
8.2.3 过表达KLF7不影响成肌分化标志基因表达 | 第73页 |
8.2.4 干扰KLF7对成肌分化没有影响 | 第73-74页 |
8.3 讨论 | 第74-75页 |
8.4 小结 | 第75-76页 |
第九章 结论、创新点与进一步研究内容 | 第76-77页 |
9.1 结论 | 第76页 |
9.2 创新点 | 第76页 |
9.3 下一步研究内容 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-93页 |
缩略 词 | 第93-94页 |
附录 | 第94-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
作者简介 | 第108页 |