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KLF7基因调控肌肉卫星细胞静息的分子机制研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第13-35页
    1.1 肌肉卫星细胞第13-16页
        1.1.1 肌肉卫星细胞为骨骼肌干细胞第13-14页
        1.1.2 肌肉卫星细胞的体节起源第14-16页
    1.2 肌肉卫星细胞生理第16-29页
        1.2.1 肌肉卫星细胞标记第16-18页
        1.2.2 肌肉卫星细胞微环境第18-19页
        1.2.3 肌肉卫星细胞静息和激活调控第19-25页
        1.2.4 肌肉卫星细胞迁移第25-27页
        1.2.5 成肌分化第27-29页
    1.3 Krüppel样因子(The Krüppel-like factor,KLF)第29-31页
    1.4 KLFs与肌肉发育第31-33页
        1.4.1 心肌第31-32页
        1.4.2 平滑肌第32页
        1.4.3 骨骼肌第32-33页
    1.5 KLF7研究进展第33-35页
第二章 试验材料与方法第35-44页
    2.1 试验材料第35页
        2.1.1 实验动物第35页
        2.1.2 主要试验试剂第35页
    2.2 试验方法第35-42页
        2.2.1 小鼠单根肌纤维的分离培养第35-36页
        2.2.2 小鼠肌肉卫星细胞的分离纯化培养第36页
        2.2.3 成肌细胞C2C12培养第36页
        2.2.4 细胞转染第36-37页
        2.2.5 真核表达质粒的构建第37页
        2.2.6 腺病毒过表达质粒的构建及病毒准备第37-39页
        2.2.7 实时定量PCR分析第39-40页
        2.2.8 Western Blot分析第40-41页
        2.2.9 双荧光素酶报告分析第41页
        2.2.10 免疫荧光分析第41-42页
        2.2.11 EdU标记细胞增殖分析第42页
    2.3 数据分析第42-44页
第三章 KLF7在调节肌肉卫星细胞静息中起关键作用第44-52页
    3.1 引言第44页
    3.2 结果与分析第44-49页
        3.2.1 静息态肌肉卫星细胞KLF7表达水平较高第44-46页
        3.2.2 KLF7在非分裂期的成肌细胞表达较高第46-47页
        3.2.3 干扰KLF7促进肌肉卫星细胞激活和扩增第47-48页
        3.2.4 干扰KLF7促进成肌细胞增殖第48-49页
        3.2.5 过表达KLF7抑制成肌细胞增殖第49页
    3.3 讨论第49-51页
    3.4 小结第51-52页
第四章 KLF7调控肌肉卫星细胞静息与成肌细胞细胞周期阻滞依赖于p21第52-57页
    4.1 引言第52页
    4.2 结果与分析第52-55页
        4.2.1 肌肉细胞中KLF7调控p21表达第52-53页
        4.2.2 干扰p21促进成肌细胞增殖第53-54页
        4.2.3 干扰p21促进肌肉卫星细胞激活和扩增第54页
        4.2.4 KLF7调控肌肉卫星细胞激活依赖于p21第54-55页
        4.2.5 KLF7调控成肌细胞增殖依赖于p21第55页
    4.3 讨论第55-56页
    4.4 小结第56-57页
第五章 KLF7调控肌肉细胞增殖及p21表达可能依赖于自身乙酰化修饰第57-62页
    5.1 引言第57页
    5.2 结果与分析第57-60页
        5.2.1 KLF家族因子乙酰化位点保守性分析第57-58页
        5.2.2 构建KLF7乙酰化位点突变载体第58页
        5.2.3 KLF7调控p21启动子转录激活可能依赖于乙酰化修饰第58-59页
        5.2.4 KLF7乙酰化位点对其在肌肉细胞中增殖调控的重要性第59-60页
    5.3 讨论第60页
    5.4 小结第60-62页
第六章 肌肉细胞中TGF-β信号负调控KLF7第62-67页
    6.1 引言第62-63页
    6.2 结果与分析第63-65页
        6.2.1 TGF-β信号通路阻断抑制成肌细胞增殖第63页
        6.2.2 TGF-β信号通路阻断抑制肌肉卫星细胞激活和扩增第63-64页
        6.2.3 TGF-β信号在肌肉细胞中负调控KLF7第64页
        6.2.4 KLF7介导TGF-β信号通路阻断诱导的成肌细胞增殖抑制第64页
        6.2.5 TGF-β信号通路阻断诱导的肌肉卫星细胞静息依赖于KLF7第64-65页
    6.3 讨论第65-66页
    6.4 小结第66-67页
第七章 KLF7介导经典Notch信号通路诱导的肌肉卫星细胞静息第67-72页
    7.1 引言第67页
    7.2 结果与分析第67-70页
        7.2.1 N3ICD活性片段过表达激活Notch信号下游靶基因第67-68页
        7.2.2 经典Notch信号通路激活促进KLF7表达第68-69页
        7.2.3 KLF7介导经典Notch信号通路诱导的成肌细胞细胞周期阻滞第69页
        7.2.4 经典Notch信号通路诱导的肌肉卫星细胞静息需要KLF7介导第69-70页
    7.3 讨论第70-71页
    7.4 小结第71-72页
第八章 KLF7没有参与肌肉细胞成肌分化调控第72-76页
    8.1 引言第72页
    8.2 结果与分析第72-74页
        8.2.1 KLF7在成肌细胞分化阶段表达特征第72页
        8.2.2 干扰KLF7不影响成肌分化标志基因表达第72-73页
        8.2.3 过表达KLF7不影响成肌分化标志基因表达第73页
        8.2.4 干扰KLF7对成肌分化没有影响第73-74页
    8.3 讨论第74-75页
    8.4 小结第75-76页
第九章 结论、创新点与进一步研究内容第76-77页
    9.1 结论第76页
    9.2 创新点第76页
    9.3 下一步研究内容第76-77页
参考文献第77-93页
缩略 词第93-94页
附录第94-107页
致谢第107-108页
作者简介第108页

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