| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第17-29页 |
| 1.1 DS概述 | 第17-18页 |
| 1.2 DS的神经功能缺陷 | 第18-19页 |
| 1.2.1 DS神经功能缺陷概述 | 第18页 |
| 1.2.2 DS神经功能缺陷的细胞学机制 | 第18-19页 |
| 1.2.3 DS神经功能缺陷的遗传学机制 | 第19页 |
| 1.3 DS的小鼠模型 | 第19-22页 |
| 1.4 DS蛋白组学研究 | 第22-25页 |
| 1.4.1 蛋白组学概述 | 第22-23页 |
| 1.4.2 差异蛋白组学 | 第23-24页 |
| 1.4.3 蛋白组学在DS筛查中的应用 | 第24-25页 |
| 1.5 本研究的目的、试验方案设计及意义 | 第25-29页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第25-26页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第26页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第26-27页 |
| 1.5.4 研究意义 | 第27-29页 |
| 第二章 iTRAQ技术筛选DS小鼠海马组织的差异蛋白表达 | 第29-43页 |
| 2.1 实验仪器与材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-36页 |
| 2.2.1 Ts65Dn小鼠的传代繁殖 | 第31页 |
| 2.2.2 采用PCR技术进行子代小鼠品系型别鉴定 | 第31-33页 |
| 2.2.3 小鼠海马组织蛋白样品提取及酶解 | 第33页 |
| 2.2.4 酶解肽段的质谱分析 | 第33-34页 |
| 2.2.5 iTRAQ | 第34-36页 |
| 2.3 结果 | 第36-39页 |
| 2.3.1 Ts65Dn小鼠传代繁殖子代一般情况 | 第36页 |
| 2.3.2 子代小鼠品系基因鉴定结果 | 第36-37页 |
| 2.3.3 蛋白提取及定量结果 | 第37-38页 |
| 2.3.4 iTRAQ筛选Ts65Dn小鼠海马蛋白差异表达 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-43页 |
| 第三章 DS小鼠海马组织差异蛋白的生物信息学分析 | 第43-57页 |
| 3.1 实验方法 | 第43-44页 |
| 3.1.1 差异蛋白序列及信息提取 | 第43页 |
| 3.1.2 差异蛋白理化性质分析 | 第43-44页 |
| 3.1.3 差异蛋白GO功能分析和富集分析 | 第44页 |
| 3.1.4 差异蛋白KEGG通路分析 | 第44页 |
| 3.1.5 差异蛋白相互作用网络分析 | 第44页 |
| 3.2 结果 | 第44-55页 |
| 3.2.1 差异蛋白理化分析结果 | 第44-46页 |
| 3.2.2 差异蛋白GO归类分析 | 第46-49页 |
| 3.2.3 差异蛋白GO富集分析 | 第49-51页 |
| 3.2.4 差异蛋白KEGG通路分析 | 第51-53页 |
| 3.2.5 差异蛋白网络分析结果 | 第53-54页 |
| 3.2.6 差异蛋白的相互作用频度分析 | 第54-55页 |
| 3.3 讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 Akt在Ts65Dn小鼠神经元凋亡中的作用初探 | 第57-73页 |
| 4.1 实验仪器与材料 | 第57-60页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第57-58页 |
| 4.1.2 实验材料 | 第58-60页 |
| 4.1.3 溶液配制 | 第60页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-64页 |
| 4.2.1 Ts65Dn小鼠海马组织样本制备 | 第60-61页 |
| 4.2.2 透射电镜实验步骤 | 第61页 |
| 4.2.3 TUNEL实验步骤 | 第61页 |
| 4.2.4 神经干细胞的分离培养 | 第61页 |
| 4.2.5 神经干细胞的鉴定 | 第61-62页 |
| 4.2.6 神经干细胞的诱导分化 | 第62页 |
| 4.2.7 分化培养细胞的染色鉴定 | 第62页 |
| 4.2.8 免疫组化观察海马组织Akt蛋白及其磷酸化 | 第62页 |
| 4.2.9 Western blot检测海马组织Akt蛋白及其磷酸化表达 | 第62-64页 |
| 4.2.10 LY294002抑制神经元细胞Akt活化 | 第64页 |
| 4.2.11 流式细胞仪检测神经元细胞凋亡 | 第64页 |
| 4.3 结果 | 第64-71页 |
| 4.3.1 透射电镜观察Ts65Dn小鼠海马形态 | 第64-65页 |
| 4.3.2 TUNEL检测神经元凋亡 | 第65-66页 |
| 4.3.3 Ts65Dn脑组织AKT蛋白及其磷酸活化的表达 | 第66-68页 |
| 4.3.4 神经干细胞培养、诱导及染色鉴定 | 第68-69页 |
| 4.3.5 Ts65Dn神经元Akt磷酸活化及其与细胞凋亡的关系 | 第69-71页 |
| 4.4 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 主要结论与展望 | 第73-75页 |
| 5.1 主要结论 | 第73页 |
| 5.2 展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录A：筛选发现有差异的374种蛋白列表 | 第81-105页 |
| 附录B：前7个差异表达蛋白的质谱图 | 第105-109页 |
| 附录C：Top10最为富集的KEGG途径图 | 第109-119页 |
| 攻读学位期间发表的主要学术论文 | 第119-121页 |
| 在读期间主持参与的科研项目及获得科研奖励 | 第121-123页 |
| 在读期间参加的主要学术会议 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
