| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-29页 |
| 第一章 microRNAlet-7研究进展 | 第12-19页 |
| ·microRNA let-7的概述 | 第12-13页 |
| ·microRNA let-7的生物合成 | 第13-14页 |
| ·microRNA let-7与肿瘤的关系 | 第14-16页 |
| ·microRNA let-7负调控Ras癌基因 | 第14-15页 |
| ·microRNA let-7抑制HMGA2癌基因表达 | 第15页 |
| ·microRNA let-7作用于c-myc癌基因 | 第15-16页 |
| ·microRNA let-7与细胞周期蛋白的关系 | 第16页 |
| ·microRNA let-7与肿瘤预后的关系 | 第16页 |
| ·microRNA let-7对干细胞的调控 | 第16-19页 |
| ·microRNA let-7调控干细胞发育时序性 | 第16-17页 |
| ·microRNA let-7调控干细胞增殖 | 第17-19页 |
| 第二章 猪瘟病毒研究进展 | 第19-29页 |
| ·CSFV概述 | 第19-21页 |
| ·CSFV形态和理化特性 | 第19-21页 |
| ·CSFV生化特性和分型 | 第21页 |
| ·CSFV培养细胞 | 第21页 |
| ·CSFV分子生物学研究 | 第21-26页 |
| ·CSFV基因组结构 | 第21-22页 |
| ·非编码区 | 第22-26页 |
| ·CSFV与细胞相互作用研究 | 第26-29页 |
| ·CSFV的细胞受体与入胞 | 第26页 |
| ·CSFV诱导淋巴细胞凋亡 | 第26-27页 |
| ·CSFV对细胞溶解性感染的调节 | 第27页 |
| ·CSFV引起树突状细胞无应答 | 第27页 |
| ·宿主天然免疫系统对猪瘟病毒的识别 | 第27-29页 |
| 试验研究 | 第29-54页 |
| 第三章 融合ssc-let-7c前体的绿色荧光蛋白报告基因载体构建与纯化 | 第29-43页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·质粒与菌株 | 第29页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器与设备 | 第30页 |
| ·方法与步骤 | 第30-37页 |
| ·靶向CSFV 3'UTR microRNA的预测 | 第30页 |
| ·ssc-let-7c片段的扩增与回收 | 第30-32页 |
| ·目的基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第33-34页 |
| ·目的基因的合成 | 第34-37页 |
| ·结果 | 第37-40页 |
| ·已知猪microRNA对CSFV 3'UTR的预测结果 | 第37页 |
| ·ssc-let-7c对CSFV 3'UTR作用位点的预测 | 第37-38页 |
| ·提取DNA质量的鉴定及PCR产物的电泳结果 | 第38页 |
| ·目的片段的克隆与鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组报告基因质粒的鉴定与纯化结果 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·靶标的预测 | 第40-41页 |
| ·let-7的功能和合成过程 | 第41-42页 |
| ·pGene-pre-let-7c的构建 | 第42页 |
| ·质粒纯化 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 融合ssc-let-7c细胞株的建立及其抑制CSFV在SUVEC细胞中的增殖 | 第43-54页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·病毒悬液与细胞 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·仪器与设备 | 第43页 |
| ·方法与步骤 | 第43-47页 |
| ·G418最佳筛选浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·pGene-pre-let-7c质粒转染SUVEC细胞 | 第44页 |
| ·G418筛选及阳性细胞的获得 | 第44页 |
| ·稳定表达pGene-let-7c SUVEC细胞株的获得 | 第44-45页 |
| ·猪瘟病毒接种阳性细胞 | 第45页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第45页 |
| ·猪瘟病毒基因的Real-Time PCR检测 | 第45-46页 |
| ·MTT比色法测SUVEC细胞增殖 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-50页 |
| ·重组质粒转染结果 | 第47页 |
| ·G418筛选及阳性细胞的获得 | 第47页 |
| ·表达ssc-let-7c细胞株的获得 | 第47-48页 |
| ·CSFV的RT-PCR检测结果 | 第48-50页 |
| ·MTT比色法测SUVEC细胞增殖结果 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·用pGenesil-1.1-dBm2载体来表达microRNA | 第50-51页 |
| ·RT-PCR的定量分析 | 第51-52页 |
| ·let-7c下调CSFV在SUVEC中的表达 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
