中文摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
符号说明 | 第17-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-30页 |
1 引言 | 第19-20页 |
2 黄酮类化合物 | 第20-23页 |
2.1 黄酮类化合物的结构和分类 | 第20-21页 |
2.2 黄酮类化合物的功能 | 第21-22页 |
2.3 黄酮类化合物的生物合成途径 | 第22-23页 |
3 查尔酮合酶 | 第23-26页 |
3.1 查尔酮合酶的定义和功能 | 第23-24页 |
3.2 查尔酮合酶的反应机理 | 第24-26页 |
4 查尔酮异构酶 | 第26-28页 |
4.1 查尔酮异构酶的分类与功能 | 第26-27页 |
4.2 查尔酮异构酶的催化机制 | 第27-28页 |
5 立题依据与研究内容 | 第28-30页 |
第二章 蕨类植物中Ⅰ/Ⅱ型查尔酮异构酶的克隆与功能鉴定 | 第30-69页 |
1 前言 | 第30页 |
2 实验材料及仪器 | 第30-39页 |
2.1 植物材料 | 第30-31页 |
2.2 菌种和质粒 | 第31-32页 |
2.3 实验主要试剂 | 第32页 |
2.4 实验仪器 | 第32-33页 |
2.5 主要溶液及培养基 | 第33-34页 |
2.6 PCR引物序列 | 第34-39页 |
3 实验方法 | 第39-54页 |
3.1 基因序列分析 | 第39页 |
3.2 蕨类植物总RNA的提取以及cDNA合成 | 第39-40页 |
3.3 基因克隆 | 第40-43页 |
3.4 蛋白表达载体的构建 | 第43-45页 |
3.5 AcCHI1基因定点突变 | 第45-46页 |
3.6 蕨类植物查尔酮异构酶蛋白表达和纯化 | 第46-47页 |
3.7 酶活功能鉴定 | 第47-49页 |
3.8 基因体内功能研究 | 第49-54页 |
4 实验结果 | 第54-68页 |
4.1 CHI进化分析 | 第54-56页 |
4.2 序列比对 | 第56-57页 |
4.3 CHI序列分析与克隆 | 第57页 |
4.4 原核表达载体构建和蛋白纯化 | 第57-58页 |
4.5 体外酶活鉴定 | 第58-60页 |
4.6 序列比对和蛋白同源模拟 | 第60-63页 |
4.7 突变体原核表达载体构建及蛋白纯化 | 第63-64页 |
4.8 AcCHI1突变体的体外酶活鉴定 | 第64-65页 |
4.9 LoCHI1和AcCHI1在拟南芥体内的过表达分析 | 第65-68页 |
5 总结 | 第68-69页 |
第三章 蕨类植物Ⅳ型查尔酮异构酶与查尔酮合酶的相互作用研究 | 第69-89页 |
1 前言 | 第69页 |
2 实验材料及仪器 | 第69-72页 |
2.1 植物材料 | 第69-70页 |
2.2 菌株和载体 | 第70页 |
2.3 主要试剂 | 第70页 |
2.4 主要培养基或溶液 | 第70-71页 |
2.5 PCR引物 | 第71-72页 |
3 实验方法 | 第72-79页 |
3.1 序列分析 | 第72页 |
3.2 引物设计 | 第72页 |
3.3 基因克隆及原核表达载体的构建 | 第72-74页 |
3.4 蛋白表达 | 第74页 |
3.5 LoCHIL和AcCHIL体外酶活功能鉴定 | 第74页 |
3.6 基因植物体内功能研究 | 第74-76页 |
3.7 CHIL与CHSs相互作用研究 | 第76-79页 |
4 实验结果 | 第79-87页 |
4.1 基因序列分析 | 第79-81页 |
4.2 原核表达载体构建和蛋白纯化 | 第81页 |
4.3 CHILs蛋白活性检测 | 第81-82页 |
4.4 LoCHIL和AcCHIL在植物体内过表达分析 | 第82-85页 |
4.5 CHIL与CHSs相互作用研究 | 第85-87页 |
5 总结 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第103-104页 |
附录 | 第104-128页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第128页 |