摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 前言 | 第12页 |
2 植物开花机理简介 | 第12-16页 |
2.1 成花诱导阶段 | 第13页 |
2.2 成花启动阶段 | 第13-14页 |
2.3 花器官发育阶段 | 第14-16页 |
3 LFY、UFO和FUL三个开花相关基因简介 | 第16-20页 |
3.1 LFY和UFO基因功能简介 | 第16-18页 |
3.2 FUL基因功能简介 | 第18-20页 |
4 本研究目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 樟树LFY、UFO和FUL基因克隆与序列分析 | 第22-37页 |
1 前言 | 第22页 |
2 材料 | 第22-23页 |
2.1 植物材料 | 第22页 |
2.2 实验试剂 | 第22-23页 |
2.2.1 RNA和DNA提取试剂 | 第22-23页 |
2.2.2 基因克隆所需实验试剂 | 第23页 |
3 方法 | 第23-31页 |
3.1 CTAB法提取DNA | 第23-24页 |
3.2 CTAB法提取RNA | 第24页 |
3.3 樟树RNA反转录 | 第24-25页 |
3.4 基因克隆 | 第25-29页 |
3.4.1Cc LFY基因克隆 | 第25-26页 |
3.4.2 Cc FUL基因克隆 | 第26-29页 |
3.4.3 Cc UFO基因克隆 | 第29页 |
3.5 测序 | 第29-30页 |
3.5.1 PMD18-T载体的连接 | 第29-30页 |
3.5.2 热激转化大肠杆菌DH5a | 第30页 |
3.5.3 菌落PCR检测 | 第30页 |
3.6 基因序列分析和系统进化树的构建 | 第30-31页 |
4 结果与分析 | 第31-36页 |
4.1 基因克隆 | 第31-33页 |
4.1.1 Cc LFY基因克隆 | 第31页 |
4.1.2 Cc FUL基因克隆 | 第31-32页 |
4.1.3 Cc UFO基因克隆 | 第32-33页 |
4.2 基因序列分析和系统进化的构建 | 第33-36页 |
4.2.1 Cc LFY基因 | 第33-34页 |
4.2.2 Cc FUL基因 | 第34-35页 |
4.2.3 Cc UFO基因 | 第35-36页 |
5 讨论 | 第36-37页 |
5.1 基因克隆 | 第36页 |
5.2 基因系统进化树的构建 | 第36-37页 |
第三章 基因表达分析 | 第37-40页 |
1 材料 | 第37页 |
1.1 植物材料 | 第37页 |
1.2 实验试剂 | 第37页 |
2 方法 | 第37-38页 |
2.1 樟树RNA的提取 | 第37页 |
2.2 樟树RNA的转录 | 第37-38页 |
2.3 樟树的半定量表达分析 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
第四章 载体构建和拟南芥遗传转化 | 第40-51页 |
1 材料 | 第40-41页 |
1.1 植物材料 | 第40页 |
1.2 实验试剂 | 第40-41页 |
1.2.1 载体构建所需试剂 | 第40页 |
1.2.2 拟南芥遗传转化所需试剂 | 第40页 |
1.2.3 菌株和载体 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-45页 |
2.1 重组超表载体的构建 | 第41-44页 |
2.1.1 质粒提取 | 第41-42页 |
2.1.2 双酶切反应和连接反应 | 第42-43页 |
2.1.3 双酶切检测 | 第43-44页 |
2.1.4 电转农杆菌 | 第44页 |
2.2 农杆菌介导法 | 第44-45页 |
2.3 阳性拟南芥种子的筛选 | 第45页 |
2.4 阳性转基因拟南芥的检测 | 第45页 |
3 结果与分析 | 第45-49页 |
3.1 重组超表载体的构建 | 第45-46页 |
3.2 阳性转基因拟南芥的检测 | 第46页 |
3.3 阳性转基因拟南芥的表型 | 第46-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
4.1 重组超表载体的构建 | 第49页 |
4.2 阳性转基因拟南芥的表型 | 第49-51页 |
第五章 Cc LFY与Cc UFO酵母双杂交实验 | 第51-57页 |
1 前言 | 第51-52页 |
2 材料 | 第52页 |
2.1 实验试剂 | 第52页 |
2.2 菌株与载体 | 第52页 |
3 方法 | 第52-55页 |
3.1 重组载体构建 | 第52-53页 |
3.2 酵母转化 | 第53-54页 |
3.3 酵母的菌落PCR检测 | 第54页 |
3.4 显色反应 | 第54-55页 |
4 结果与分析 | 第55-56页 |
4.1 酵母阳性克隆PCR检测 | 第55页 |
4.2 显色反应 | 第55-56页 |
5 讨论 | 第56-57页 |
第六章 总结与展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-67页 |
致谢 | 第67页 |