摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
引言 | 第13-22页 |
0.1 结直肠癌 | 第13-14页 |
0.2 黑树莓多酚 | 第14-15页 |
0.3 表观遗传与肿瘤 | 第15-17页 |
0.4 天然化合物与肿瘤表观遗传学 | 第17-20页 |
0.5 研究目的及意义 | 第20-22页 |
第1章 黑树莓多酚对结肠癌细胞存活和生长的影响 | 第22-27页 |
1.1 引言 | 第22页 |
1.2 实验材料 | 第22-23页 |
1.2.1 细胞株、生化试剂和耗材 | 第22页 |
1.2.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
1.2.3 试剂的配制 | 第23页 |
1.3 实验方法及步骤 | 第23-25页 |
1.3.1 HCT-116和LoVo细胞的培养 | 第23-25页 |
1.4 实验结果与讨论 | 第25-26页 |
1.5 结论 | 第26-27页 |
第2章 黑树莓多酚抑制结肠癌的表观机制研究 | 第27-44页 |
2.1 引言 | 第27页 |
2.2 实验材料 | 第27-31页 |
2.2.1 细胞系、动物模型、生化试剂和耗材 | 第27-29页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第29页 |
2.2.3 试剂的配制 | 第29-31页 |
2.3 实验方法及步骤 | 第31-38页 |
2.3.1 溃疡性结肠炎癌变小鼠模型建立 | 第31-32页 |
2.3.2 小鼠肠上皮细胞的获取 | 第32页 |
2.3.3 HCT-116和LoVo细胞的处理和收集 | 第32页 |
2.3.4 肠上皮细胞及体外培养细胞基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
2.3.5 甲基化特异性PCR(MSP) | 第33-35页 |
2.3.6 肠上皮细胞及体外培养细胞总蛋白质的提取 | 第35页 |
2.3.7 细胞总蛋白质浓度的测定(BCA法) | 第35-36页 |
2.3.8 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第36-38页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第38-43页 |
2.4.1 黑树莓多酚上调结肠癌肿瘤小鼠肠上皮细胞SFRP2表达 | 第38页 |
2.4.2 黑树莓多酚上调HCT-116和LoVo结肠癌细胞SFRP2、WIF1表达 | 第38-39页 |
2.4.3 黑树莓多酚下调结肠癌肿瘤小鼠肠上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路关键因子 | 第39-40页 |
2.4.4 黑树莓多酚下调LoVo和HCT-116结肠癌细胞Wnt/β-catenin信号通路关键因子 | 第40页 |
2.4.5 黑树莓多酚下调结肠癌肿瘤小鼠肠上皮细胞SFRP2启动子甲基化水平 | 第40-41页 |
2.4.6 黑树莓多酚下调HCT-116和LoVo细胞SFRP2、WIF1启动子甲基化水平 | 第41-42页 |
2.4.7 黑树莓多酚下调结肠癌肿瘤小鼠肠上皮细胞DNA甲基转移酶表达 | 第42-43页 |
2.5 结论 | 第43-44页 |
第3章 黑树莓多酚抑制结肠癌生长、转移和凋亡作用的潜在机制研究 | 第44-49页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 实验材料 | 第44-45页 |
3.3 实验方法 | 第45页 |
3.3.1 HCT-116和LoVo细胞的处理和收集 | 第45页 |
3.3.2 体外培养细胞总蛋白质的提取 | 第45页 |
3.3.3 细胞总蛋白质浓度的测定(BCA法) | 第45页 |
3.3.4 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第45页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第45-48页 |
3.4.1 黑树莓多酚对HCT-116和LoVo细胞周期蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
3.4.2 黑树莓多酚对HCT-116和LoVo细胞凋亡蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
3.4.3 黑树莓多酚对HCT-116和LoVo细胞转移相关蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
3.5 结论 | 第48-49页 |
第4章 结论与展望 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第59页 |