摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第12-38页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 真菌多糖的研究概况 | 第12-21页 |
1.2.1 真菌多糖的分离纯化技术 | 第13-15页 |
1.2.2 真菌多糖化学结构的分析方法 | 第15-19页 |
1.2.3 真菌多糖的生理活性 | 第19-21页 |
1.3 竹荪及竹荪多糖研究概况 | 第21-23页 |
1.3.1 竹荪简介 | 第21-22页 |
1.3.2 竹荪多糖研究进展 | 第22-23页 |
1.4 本课题选题依据和研究内容 | 第23-25页 |
1.4.1 选题依据 | 第23-24页 |
1.4.2 研究内容和技术路线 | 第24-25页 |
1.5 本课题主要创新点 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-38页 |
第2章 竹荪多糖的分离纯化与结构分析 | 第38-55页 |
2.1 前言 | 第38页 |
2.2 实验材料与试剂 | 第38-40页 |
2.3 主要仪器与设备 | 第40页 |
2.4 实验方法 | 第40-44页 |
2.4.1 竹荪粗多糖提取 | 第40页 |
2.4.2 竹荪粗多糖蛋白质去除和乙醇沉淀 | 第40-41页 |
2.4.3 竹荪粗多糖阴离子交换层析纯化 | 第41页 |
2.4.4 竹荪多糖凝胶柱层析纯化 | 第41页 |
2.4.5 竹荪多糖分子量的分布测定 | 第41-42页 |
2.4.6 竹荪多糖的单糖组成分析 | 第42页 |
2.4.7 高碘酸氧化和Smith降解分析 | 第42-43页 |
2.4.8 竹荪多糖的红外光谱扫描 | 第43页 |
2.4.9 核磁共振分析 | 第43页 |
2.4.10 统计分析 | 第43-44页 |
2.5 结果与讨论 | 第44-51页 |
2.5.1 竹荪多糖的分离纯化 | 第44-45页 |
2.5.2 竹荪多糖结构鉴定 | 第45-51页 |
2.6 本章小结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
第3章 竹荪多糖的免疫调节活性研究 | 第55-72页 |
3.1 前言 | 第55页 |
3.2 实验材料与试剂 | 第55-56页 |
3.3 主要仪器与设备 | 第56-57页 |
3.4 实验方法 | 第57-59页 |
3.4.1 竹荪多糖 DP1 溶液的配制 | 第57页 |
3.4.2 细胞培养 | 第57页 |
3.4.3 竹荪多糖DP1对小鼠巨噬细胞RAW264.7 分泌细胞因子的影响 | 第57-58页 |
3.4.4 小鼠巨噬细胞膜表面识别竹荪多糖DP1的受体研究 | 第58页 |
3.4.5 不同温度和p H处理对竹荪多糖DP1免疫活性的影响 | 第58-59页 |
3.4.6 统计分析 | 第59页 |
3.5 实验结果与讨论 | 第59-68页 |
3.5.1 竹荪多糖DP1对RAW264.7 分泌细胞因子的影响 | 第59-61页 |
3.5.2 小鼠巨噬细胞膜受体TLR2、TLR4、CR3和Dectin-1 对DP1免疫活性的影响 | 第61-63页 |
3.5.3 不同温度的和p H处理对竹荪多糖DP1免疫活性的影响 | 第63-68页 |
3.6 本章小结 | 第68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
第4章 竹荪多糖抑制红细胞氧化性溶血作用研究 | 第72-85页 |
4.1 前言 | 第72页 |
4.2 实验材料与试剂 | 第72-73页 |
4.3 主要仪器与设备 | 第73页 |
4.4 实验方法 | 第73-75页 |
4.4.1 红细胞悬液的制备 | 第73-74页 |
4.4.2 竹荪多糖DP1对AAPH诱导的红细胞氧化性溶血的保护作用 | 第74页 |
4.4.3 溶血抑制率测定 | 第74页 |
4.4.4 SEM扫描电镜观察红细胞形态 | 第74页 |
4.4.5 红细胞内活性氧(ROS)水平的测定 | 第74页 |
4.4.6 红细胞内蛋白含量的测定 | 第74页 |
4.4.7 红细胞内抗氧化酶活性和丙二醛含量测定 | 第74-75页 |
4.4.8 竹荪多糖对血清氧化损伤的保护作用 | 第75页 |
4.4.9 统计分析 | 第75页 |
4.5 结果与讨论 | 第75-82页 |
4.5.1 竹荪多糖 DP1 对红细胞氧化性溶血的抑制作用 | 第75-76页 |
4.5.2 竹荪多糖DP1对红细胞表面形貌的保护作用 | 第76-77页 |
4.5.3 竹荪多糖DP1红细胞内ROS水平的影响 | 第77页 |
4.5.4 竹荪多糖DP1对红细胞内抗氧化酶活性影响 | 第77-80页 |
4.5.5 竹荪多糖DP1对红细胞内丙二醛(MDA)含量的影响 | 第80页 |
4.5.6 竹荪多糖DP1对血清氧化损伤的保护作用 | 第80-82页 |
4.6 本章小结 | 第82页 |
参考文献 | 第82-85页 |
第5章 竹荪多糖功能化纳米硒的制备 及其抗肿瘤机制研究 | 第85-122页 |
5.1 前言 | 第85-87页 |
5.2 实验材料与试剂 | 第87-88页 |
5.3 主要仪器与设备 | 第88-89页 |
5.4 实验方法 | 第89-94页 |
5.4.1 竹荪多糖纳米硒配合物(DP1-SeNPs)的制备 | 第89页 |
5.4.2 DP1-Se NPs的表征 | 第89页 |
5.4.3 细胞系及培养 | 第89-90页 |
5.4.4 肿瘤细胞存活率的测定 | 第90页 |
5.4.5 细胞表面形态的观察 | 第90-91页 |
5.4.6 Hep G2细胞核形态观察 | 第91页 |
5.4.7 Hep G2细胞核染色质DNA断裂分析 | 第91页 |
5.4.8 Hep G2细胞凋亡检测 | 第91-92页 |
5.4.9 Hep G2细胞周期分布检测 | 第92页 |
5.4.10 Hep G2细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)检测 | 第92页 |
5.4.11 Hep G2细胞内活性氧ROS水平检测 | 第92-93页 |
5.4.12 Hep G2细胞内Caspase活性检测 | 第93页 |
5.4.13 Hep G2细胞内死亡结构域相关蛋白FADD的表达水平检测 | 第93-94页 |
5.4.14 统计分析 | 第94页 |
5.5 实验结果与讨论 | 第94-112页 |
5.5.1 DP1-Se NPs的制备及表征 | 第94-99页 |
5.5.2 DP1-Se NPs抗肿瘤细胞增殖活性 | 第99-101页 |
5.5.3 DP1-Se NPs诱导Hep G2细胞凋亡 | 第101-112页 |
5.6 本章小结 | 第112-113页 |
参考文献 | 第113-122页 |
第6章 竹荪多糖-锌配合物的制备及抗肿瘤活性研究 | 第122-135页 |
6.1 前言 | 第122-123页 |
6.2 实验材料与试剂 | 第123页 |
6.3 主要仪器与设备 | 第123页 |
6.4 实验方法 | 第123-125页 |
6.4.1 竹荪多糖-锌配合物 DP1-Zn 的制备 | 第123页 |
6.4.2 竹荪多糖-锌配合物DP1-Zn的表征 | 第123-124页 |
6.4.3 细胞系及培养 | 第124页 |
6.4.4 DP1-Zn对肿瘤细胞增殖抑制率测定 | 第124页 |
6.4.5 DP1-Zn对人乳腺癌细胞MCF-7 细胞核形态观察 | 第124页 |
6.4.6 DP1-Zn诱导MCF-7 细胞凋亡检测 | 第124页 |
6.4.7 DP1-Zn诱导MCF-7 细胞周期阻滞分析 | 第124-125页 |
6.4.8 DP1-Zn处理后MCF-7 细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)检测 | 第125页 |
6.4.9 统计分析 | 第125页 |
6.5 实验结果与讨论 | 第125-132页 |
6.5.1 DP1-Zn 的制备及表征 | 第125-127页 |
6.5.2 DP1-Zn抗肿瘤细胞增殖活性 | 第127-128页 |
6.5.3 DP1-Zn诱导MCF-7 细胞凋亡 | 第128-132页 |
6.6 本章小结 | 第132页 |
参考文献 | 第132-135页 |
结论与展望 | 第135-138页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第138-140页 |
致谢 | 第140-141页 |
附件 | 第141页 |