摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第13-37页 |
1.1 芽孢杆菌特点及其在农业生产中的应用 | 第13-16页 |
1.1.1 芽孢杆菌特点 | 第13-14页 |
1.1.2 芽孢杆菌生物农药的开发和利用 | 第14-15页 |
1.1.3 芽孢杆菌生物肥料的开发和应用 | 第15-16页 |
1.2 芽孢杆菌防病机理研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 产生抗菌活性物质 | 第16-17页 |
1.2.2 与病原物竞争 | 第17-19页 |
1.2.3 促生及诱导抗性 | 第19-20页 |
1.3 脂肽类抗生素研究 | 第20-27页 |
1.3.1 脂肽类抗生素的种类、结构及其抑菌机理 | 第20-22页 |
1.3.2 脂肽类抗生素的合成途径 | 第22-23页 |
1.3.3 脂肽类抗生素有关操纵子的研究 | 第23-25页 |
1.3.4 发酵条件对脂肽类抗生素产生的影响 | 第25-27页 |
1.4 伊枯草菌素(iturin A)研究进展 | 第27-33页 |
1.4.1 Iturin A研究概况 | 第27-29页 |
1.4.2 Iturin A合成酶操纵子 | 第29-30页 |
1.4.3 Iturin A的分离和鉴定方法 | 第30-33页 |
1.5 本研究的背景与意义 | 第33-37页 |
1.5.1 棉苗立枯病的危害及其防治策略 | 第33-34页 |
1.5.2 研究意义 | 第34-36页 |
1.5.3 本研究的技术路线 | 第36-37页 |
第二章 B44 菌株及其产脂肽类抗生素种类的鉴定 | 第37-60页 |
2.1 材料 | 第37-38页 |
2.1.1 供试菌株 | 第37页 |
2.1.2 主要试剂及药品 | 第37-38页 |
2.1.3 培养基 | 第38页 |
2.2 方法 | 第38-45页 |
2.2.1 gyr A基因的克隆及分析 | 第38-40页 |
2.2.2 全基因组测序分析 | 第40-42页 |
2.2.3 脂肽类抗生素生物合成相关基因的PCR分析 | 第42-44页 |
2.2.4 脂肽类抗生素的RP-HPLC和MALDI-TOF-MS分析和鉴定 | 第44-45页 |
2.3 结果与分析 | 第45-56页 |
2.3.1 gyr A基因分析及系统发育树构建 | 第45-46页 |
2.3.2 全基因组测序分析 | 第46-49页 |
2.3.3 脂肽类抗生素相关合成基因的PCR扩增 | 第49-52页 |
2.3.4 RP-HPLC初步分析 | 第52-53页 |
2.3.5 MALDI-TOF-MS分析及鉴定 | 第53-56页 |
2.4 讨论 | 第56-59页 |
2.4.1 萎缩芽孢杆菌的鉴定 | 第56-57页 |
2.4.2 B44 产脂肽类抗生素的鉴定 | 第57-58页 |
2.4.3 B44 菌株有关的生物信息学分析 | 第58-59页 |
2.5 小结 | 第59-60页 |
2.5.1 B44 菌株的鉴定 | 第59页 |
2.5.2 B44 产脂肽类抗生素的鉴定 | 第59-60页 |
第三章 itu C基因敲除及其对野生菌株生物防效的影响 | 第60-82页 |
3.1 材料 | 第60-61页 |
3.1.1 供试菌株和质粒 | 第60页 |
3.1.2 酶和主要试剂 | 第60-61页 |
3.1.3 培养基 | 第61页 |
3.2 方法 | 第61-69页 |
3.2.1 同源重组载体pUC19- itu C′::tet的构建 | 第61-66页 |
3.2.2 同源重组载体pUC19- itu C′::tet的转化 | 第66页 |
3.2.3 突变株和野生菌株生长特性比较 | 第66-67页 |
3.2.4 突变株和野生菌株iturin A产生量的RP-HPLC比较分析 | 第67-68页 |
3.2.5 突变株和野生菌株产生iturin A的MALDI-TOF-MS的鉴定分析 | 第68页 |
3.2.6 突变株和野生菌株对棉苗立枯病的盆栽防效测定 | 第68-69页 |
3.3 结果与分析 | 第69-80页 |
3.3.1 同源重组载体pUC19- itu C′::tet的构建 | 第69-74页 |
3.3.2 重组质粒pUC19- itu C′::tet的转化 | 第74-75页 |
3.3.3 突变株和野生菌株生长特性比较 | 第75-76页 |
3.3.4 突变株和野生菌株对产生iturin A的影响 | 第76-77页 |
3.3.5 突变株脂肽类抗生素的MALDI-TOF-MS的鉴定分析 | 第77-78页 |
3.3.6 突变株和野生菌株对棉苗立枯病的盆栽防效测定 | 第78-80页 |
3.4 讨论 | 第80-81页 |
3.4.1 同源重组载体的构建 | 第80页 |
3.4.2 野生菌株和突变菌株生长特性比较 | 第80页 |
3.4.3 突变株与野生菌株的iturin A定量分析 | 第80-81页 |
3.4.4 突变株与野生菌株的MALDI-TOF-MS鉴定 | 第81页 |
3.4.5 缺失突变株与野生菌株对棉立枯病的防效测定 | 第81页 |
3.5 小结 | 第81-82页 |
第四章 不同发酵营养条件对B44 菌株产生iturin A的影响 | 第82-99页 |
4.1 材料 | 第82-83页 |
4.1.1 供试菌株 | 第82页 |
4.1.2 培养基 | 第82-83页 |
4.2 方法 | 第83-85页 |
4.2.1 不同碳源、氮源和无机盐对iturin A的影响 | 第83-84页 |
4.2.2 正交实验设计条件下不同营养对iturin A的影响 | 第84-85页 |
4.3 结果与分析 | 第85-95页 |
4.3.1 碳源对iturin A的影响 | 第85-88页 |
4.3.2 氮源对iturin A的影响 | 第88-90页 |
4.3.3 无机盐对iturin A的影响 | 第90-93页 |
4.3.4 正交优化设计不同处理对iturin A的影响 | 第93-95页 |
4.4 讨论 | 第95-97页 |
4.4.1 碳源对iturin A的影响 | 第95-96页 |
4.4.2 氮源对iturin A的影响 | 第96页 |
4.4.3 无机盐对iturin A的影响 | 第96页 |
4.4.4 iturin A产量与生物量的关系 | 第96-97页 |
4.4.5 iturin A产量与活菌数的关系 | 第97页 |
4.5 小结 | 第97-99页 |
4.5.1 iturin A的产生量和抑菌活性测定 | 第97页 |
4.5.2 iturin A产量与生物量、活菌数的关系 | 第97-98页 |
4.5.3 iturin A产量的正交优化实验 | 第98-99页 |
第五章 不同营养发酵B44 产物对棉苗立枯病的盆栽防效试验 | 第99-111页 |
5.1 材料 | 第99-100页 |
5.1.1 供试菌株 | 第99页 |
5.1.2 培养基 | 第99页 |
5.1.3 供试土壤 | 第99页 |
5.1.4 主要试剂 | 第99-100页 |
5.2 方法 | 第100-102页 |
5.2.1 B44 菌株单因素发酵液对棉立枯病的盆栽防效 | 第100页 |
5.2.2 不同发酵液赤霉素、嗜铁素的测定 | 第100-102页 |
5.3 结果与分析 | 第102-109页 |
5.3.1 不同碳源培养基对棉立枯病的盆栽试验 | 第102-104页 |
5.3.2 不同氮源培养基对棉立枯病的盆栽防效试验 | 第104-106页 |
5.3.3 不同无机盐培养基对棉立枯病的盆栽防效试验 | 第106-108页 |
5.3.4 不同单因素和正交组合对棉立枯病的防效试验 | 第108-109页 |
5.4 讨论 | 第109-110页 |
5.4.1 iturin A产生量与B44 菌株生物防效关系 | 第109页 |
5.4.2 赤霉素和嗜铁素的测定 | 第109-110页 |
5.5 小结 | 第110-111页 |
第六章 不同发酵营养条件下B44 菌株防治棉苗立枯病的田间小区试验 | 第111-117页 |
6.1 材料 | 第111-112页 |
6.1.1 供试菌株 | 第111页 |
6.1.2 供试地点 | 第111页 |
6.1.3 品种和种衣剂 | 第111页 |
6.1.4 主要试剂 | 第111-112页 |
6.2 方法 | 第112页 |
6.2.1 不同营养发酵液对棉苗立枯病的小区防效试验 | 第112页 |
6.2.2 不同处理棉苗酶活测定 | 第112页 |
6.2.3 数据分析 | 第112页 |
6.3 结果与分析 | 第112-114页 |
6.3.1 不同营养发酵液对棉苗立枯病的小区防效试验 | 第112-114页 |
6.3.2 不同处理棉苗酶活测定 | 第114页 |
6.4 讨论 | 第114-116页 |
6.4.1 不同发酵液处理对棉苗立枯病的小区防效试验 | 第114-115页 |
6.4.2 不同发酵液处理的棉苗酶活测定 | 第115-116页 |
6.5 小结 | 第116-117页 |
第七章 研究结论、创新点和展望 | 第117-120页 |
7.1 研究结论 | 第117-118页 |
7.1.1 生防菌的鉴定 | 第117页 |
7.1.2 生防菌抑菌活性物质的鉴定 | 第117页 |
7.1.3 突变株与野生菌株的防效比较 | 第117页 |
7.1.4 iturin A产生量发酵营养条件的优化 | 第117-118页 |
7.1.5 iturin A产生量与生物量、活菌数的关系 | 第118页 |
7.1.6 iturin A与生物防效的关系 | 第118页 |
7.1.7 生防菌生防机理的研究 | 第118页 |
7.2 创新点 | 第118-119页 |
7.3 存在问题 | 第119页 |
7.4 研究展望 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-132页 |
附录 (1):本研究部分实验照片 | 第132-136页 |
附录 (2):B44 菌株扩增出的相关DNA | 第136-144页 |
附录 (3):p UC19- itu C′::tet同源载体构建图 | 第144-145页 |
致谢 | 第145-146页 |
作者简介 | 第146-147页 |
附件 | 第147页 |