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Bacillus atrophaeus B44产生iturin A及其对棉苗立枯病的防病促生作用

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 文献综述第13-37页
    1.1 芽孢杆菌特点及其在农业生产中的应用第13-16页
        1.1.1 芽孢杆菌特点第13-14页
        1.1.2 芽孢杆菌生物农药的开发和利用第14-15页
        1.1.3 芽孢杆菌生物肥料的开发和应用第15-16页
    1.2 芽孢杆菌防病机理研究进展第16-20页
        1.2.1 产生抗菌活性物质第16-17页
        1.2.2 与病原物竞争第17-19页
        1.2.3 促生及诱导抗性第19-20页
    1.3 脂肽类抗生素研究第20-27页
        1.3.1 脂肽类抗生素的种类、结构及其抑菌机理第20-22页
        1.3.2 脂肽类抗生素的合成途径第22-23页
        1.3.3 脂肽类抗生素有关操纵子的研究第23-25页
        1.3.4 发酵条件对脂肽类抗生素产生的影响第25-27页
    1.4 伊枯草菌素(iturin A)研究进展第27-33页
        1.4.1 Iturin A研究概况第27-29页
        1.4.2 Iturin A合成酶操纵子第29-30页
        1.4.3 Iturin A的分离和鉴定方法第30-33页
    1.5 本研究的背景与意义第33-37页
        1.5.1 棉苗立枯病的危害及其防治策略第33-34页
        1.5.2 研究意义第34-36页
        1.5.3 本研究的技术路线第36-37页
第二章 B44 菌株及其产脂肽类抗生素种类的鉴定第37-60页
    2.1 材料第37-38页
        2.1.1 供试菌株第37页
        2.1.2 主要试剂及药品第37-38页
        2.1.3 培养基第38页
    2.2 方法第38-45页
        2.2.1 gyr A基因的克隆及分析第38-40页
        2.2.2 全基因组测序分析第40-42页
        2.2.3 脂肽类抗生素生物合成相关基因的PCR分析第42-44页
        2.2.4 脂肽类抗生素的RP-HPLC和MALDI-TOF-MS分析和鉴定第44-45页
    2.3 结果与分析第45-56页
        2.3.1 gyr A基因分析及系统发育树构建第45-46页
        2.3.2 全基因组测序分析第46-49页
        2.3.3 脂肽类抗生素相关合成基因的PCR扩增第49-52页
        2.3.4 RP-HPLC初步分析第52-53页
        2.3.5 MALDI-TOF-MS分析及鉴定第53-56页
    2.4 讨论第56-59页
        2.4.1 萎缩芽孢杆菌的鉴定第56-57页
        2.4.2 B44 产脂肽类抗生素的鉴定第57-58页
        2.4.3 B44 菌株有关的生物信息学分析第58-59页
    2.5 小结第59-60页
        2.5.1 B44 菌株的鉴定第59页
        2.5.2 B44 产脂肽类抗生素的鉴定第59-60页
第三章 itu C基因敲除及其对野生菌株生物防效的影响第60-82页
    3.1 材料第60-61页
        3.1.1 供试菌株和质粒第60页
        3.1.2 酶和主要试剂第60-61页
        3.1.3 培养基第61页
    3.2 方法第61-69页
        3.2.1 同源重组载体pUC19- itu C′::tet的构建第61-66页
        3.2.2 同源重组载体pUC19- itu C′::tet的转化第66页
        3.2.3 突变株和野生菌株生长特性比较第66-67页
        3.2.4 突变株和野生菌株iturin A产生量的RP-HPLC比较分析第67-68页
        3.2.5 突变株和野生菌株产生iturin A的MALDI-TOF-MS的鉴定分析第68页
        3.2.6 突变株和野生菌株对棉苗立枯病的盆栽防效测定第68-69页
    3.3 结果与分析第69-80页
        3.3.1 同源重组载体pUC19- itu C′::tet的构建第69-74页
        3.3.2 重组质粒pUC19- itu C′::tet的转化第74-75页
        3.3.3 突变株和野生菌株生长特性比较第75-76页
        3.3.4 突变株和野生菌株对产生iturin A的影响第76-77页
        3.3.5 突变株脂肽类抗生素的MALDI-TOF-MS的鉴定分析第77-78页
        3.3.6 突变株和野生菌株对棉苗立枯病的盆栽防效测定第78-80页
    3.4 讨论第80-81页
        3.4.1 同源重组载体的构建第80页
        3.4.2 野生菌株和突变菌株生长特性比较第80页
        3.4.3 突变株与野生菌株的iturin A定量分析第80-81页
        3.4.4 突变株与野生菌株的MALDI-TOF-MS鉴定第81页
        3.4.5 缺失突变株与野生菌株对棉立枯病的防效测定第81页
    3.5 小结第81-82页
第四章 不同发酵营养条件对B44 菌株产生iturin A的影响第82-99页
    4.1 材料第82-83页
        4.1.1 供试菌株第82页
        4.1.2 培养基第82-83页
    4.2 方法第83-85页
        4.2.1 不同碳源、氮源和无机盐对iturin A的影响第83-84页
        4.2.2 正交实验设计条件下不同营养对iturin A的影响第84-85页
    4.3 结果与分析第85-95页
        4.3.1 碳源对iturin A的影响第85-88页
        4.3.2 氮源对iturin A的影响第88-90页
        4.3.3 无机盐对iturin A的影响第90-93页
        4.3.4 正交优化设计不同处理对iturin A的影响第93-95页
    4.4 讨论第95-97页
        4.4.1 碳源对iturin A的影响第95-96页
        4.4.2 氮源对iturin A的影响第96页
        4.4.3 无机盐对iturin A的影响第96页
        4.4.4 iturin A产量与生物量的关系第96-97页
        4.4.5 iturin A产量与活菌数的关系第97页
    4.5 小结第97-99页
        4.5.1 iturin A的产生量和抑菌活性测定第97页
        4.5.2 iturin A产量与生物量、活菌数的关系第97-98页
        4.5.3 iturin A产量的正交优化实验第98-99页
第五章 不同营养发酵B44 产物对棉苗立枯病的盆栽防效试验第99-111页
    5.1 材料第99-100页
        5.1.1 供试菌株第99页
        5.1.2 培养基第99页
        5.1.3 供试土壤第99页
        5.1.4 主要试剂第99-100页
    5.2 方法第100-102页
        5.2.1 B44 菌株单因素发酵液对棉立枯病的盆栽防效第100页
        5.2.2 不同发酵液赤霉素、嗜铁素的测定第100-102页
    5.3 结果与分析第102-109页
        5.3.1 不同碳源培养基对棉立枯病的盆栽试验第102-104页
        5.3.2 不同氮源培养基对棉立枯病的盆栽防效试验第104-106页
        5.3.3 不同无机盐培养基对棉立枯病的盆栽防效试验第106-108页
        5.3.4 不同单因素和正交组合对棉立枯病的防效试验第108-109页
    5.4 讨论第109-110页
        5.4.1 iturin A产生量与B44 菌株生物防效关系第109页
        5.4.2 赤霉素和嗜铁素的测定第109-110页
    5.5 小结第110-111页
第六章 不同发酵营养条件下B44 菌株防治棉苗立枯病的田间小区试验第111-117页
    6.1 材料第111-112页
        6.1.1 供试菌株第111页
        6.1.2 供试地点第111页
        6.1.3 品种和种衣剂第111页
        6.1.4 主要试剂第111-112页
    6.2 方法第112页
        6.2.1 不同营养发酵液对棉苗立枯病的小区防效试验第112页
        6.2.2 不同处理棉苗酶活测定第112页
        6.2.3 数据分析第112页
    6.3 结果与分析第112-114页
        6.3.1 不同营养发酵液对棉苗立枯病的小区防效试验第112-114页
        6.3.2 不同处理棉苗酶活测定第114页
    6.4 讨论第114-116页
        6.4.1 不同发酵液处理对棉苗立枯病的小区防效试验第114-115页
        6.4.2 不同发酵液处理的棉苗酶活测定第115-116页
    6.5 小结第116-117页
第七章 研究结论、创新点和展望第117-120页
    7.1 研究结论第117-118页
        7.1.1 生防菌的鉴定第117页
        7.1.2 生防菌抑菌活性物质的鉴定第117页
        7.1.3 突变株与野生菌株的防效比较第117页
        7.1.4 iturin A产生量发酵营养条件的优化第117-118页
        7.1.5 iturin A产生量与生物量、活菌数的关系第118页
        7.1.6 iturin A与生物防效的关系第118页
        7.1.7 生防菌生防机理的研究第118页
    7.2 创新点第118-119页
    7.3 存在问题第119页
    7.4 研究展望第119-120页
参考文献第120-132页
附录 (1):本研究部分实验照片第132-136页
附录 (2):B44 菌株扩增出的相关DNA第136-144页
附录 (3):p UC19- itu C′::tet同源载体构建图第144-145页
致谢第145-146页
作者简介第146-147页
附件第147页

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