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大豆FKF1和GI基因克隆、表达模式及功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-25页
   ·植物体内的生物钟系统第12-18页
     ·拟南芥的生物钟第12-13页
     ·生物钟的保守性第13-15页
     ·生物钟的功能第15-18页
   ·光周期途径第18-20页
     ·拟南芥中的光周期途径第18-19页
     ·其他物种的光周期途径第19-20页
   ·F-BOX 蛋白家族的功能第20-23页
   ·GIGANTEA 的功能第23-24页
   ·本项目的研究目的和意义第24-25页
第二章 材料与方法第25-39页
   ·试验材料第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌株及质粒第25-27页
   ·实验方法第27-39页
     ·候选基因的确定第27-28页
     ·引物设计与 PCR 扩增第28页
     ·基因结构分析第28页
     ·系统进化树的构建第28页
     ·FKF1/2 LOV 功能域 3D 结构模拟第28页
     ·PCR 产物的回收与连接反应第28-29页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第29页
     ·连接产物的转化第29页
     ·基因表达载体的构建第29页
     ·农杆菌感受态的制备第29-30页
     ·农杆菌的转化及阳性克隆的鉴定第30页
     ·拟南芥转化与筛选第30页
     ·利用原生质体的瞬时表达系统观察亚细胞定位第30-31页
     ·植物叶片 RNA 的提取及 DNA 的消化第31页
     ·cDNA 第一链的合成(OK)第31-32页
     ·实时荧光定量 PCR第32页
     ·qRT-PCR 的数据处理第32-36页
     ·酵母双杂(Y2H)第36页
     ·植物总蛋白的提取第36-37页
     ·抗体检测(SDS-PAGE 蛋白电泳)第37-39页
第三章 大豆 FKF1 and GI 表达模式及功能分析第39-72页
   ·结果与分析第40-66页
     ·大豆 FKFs and GIs 基因的克隆第40-41页
     ·大豆 FKF1/2 保守功能域分析第41-44页
     ·FKF1 和 GI 基因家族的进化分析第44-47页
     ·大豆 FKFs 和 GIs 的亚细胞定位第47-49页
     ·大豆 FKFs and GIs 不同组织器官的表达模式第49-52页
     ·大豆 FKFs and GIs 不同发育时期的表达模式第52-55页
     ·大豆 FKF1 and GI 的昼夜节律表达模式第55-59页
     ·光周期对大豆 FKF1 and GI 的节律表达的影响第59-61页
     ·大豆 FKFs 和 GIs 在酵母中的相互作用第61-64页
     ·大豆 FKF1/2 过表达拟南芥的表型分析第64-65页
     ·大豆 FKF1/2 抗体的检测第65-66页
   ·讨论第66-72页
     ·大豆 FKF1 和 GI 的同源基因第66页
     ·大豆 FKF1/2 的保守位点第66-67页
     ·大豆 FKF1 和 GI 的亚细胞定位第67页
     ·大豆 FKF1 和 GI 的时空表达第67-69页
     ·大豆 FKF1 和 GI 的节律表达第69-70页
     ·大豆 FKF1 和 GI 的互作分析第70-71页
     ·大豆 FKF1/2 和 GI1α的开花调控第71-72页
第四章 全文结论第72-74页
   ·大豆 FKF1 和 GI 在进化上具有高度的保守性第72页
   ·大豆 FKF1 和 GI 参与调节多个器官的发育进程第72页
   ·GmFKFs 和 GmGI2 可能共同作用调控大豆开花第72页
   ·大豆 FKF1 对开花的调控具有物种特异性第72页
   ·GmGI1 不同剪切本的功能可能不同第72页
   ·GmGI3 的功能可能与 GmGI1 和 GmGI2 不同第72-74页
参考文献第74-82页
致谢第82-83页
作者简历第83页

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