本论文创新点 | 第6-7页 |
目录 | 第7-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第16-42页 |
1 磷酸原激酶 | 第16-21页 |
1.1 精氨酸激酶 | 第17-20页 |
1.2 肌酸激酶 | 第20-21页 |
2 二硫键 | 第21-24页 |
3 FK506结合蛋白 | 第24-27页 |
3.1 FKBP蛋白家族 | 第24-26页 |
3.2 FKBP12 | 第26-27页 |
4 蛋白质体外折叠研究 | 第27-32页 |
4.1 蛋白质变性方法的选择 | 第28-29页 |
4.2 体外折叠研究的主要技术手段 | 第29-32页 |
5 蛋白质细胞内折叠研究 | 第32-39页 |
5.1 大分子拥挤 | 第33-35页 |
5.2 分子伴侣 | 第35-36页 |
5.3 细胞的区室化与蛋白质折叠 | 第36-38页 |
5.4 蛋白质细胞内折叠研究的新方法 | 第38-39页 |
6 蛋白质结构同源模建 | 第39-40页 |
7 本论文的选题背景及研究内容 | 第40-42页 |
第二章 氧化型精氨酸激酶的发现及其分子内二硫键的定位 | 第42-57页 |
引言 | 第42-43页 |
1 材料与方法 | 第43-49页 |
1.1 试剂与材料 | 第43页 |
1.2 主要实验仪器 | 第43-44页 |
1.3 实验方法 | 第44-49页 |
2 结果与分析 | 第49-55页 |
2.1 精氨酸激酶突变体的测序结果比对 | 第49-53页 |
2.2 精氨酸激酶及其突变体的表达与纯化 | 第53-54页 |
2.3 胱氨酸诱导生成氧化型精氨酸激酶 | 第54页 |
2.4 氧化型精氨酸激酶分子内二硫键的定位 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-56页 |
4 小结 | 第56-57页 |
第三章 330位精氨酸突变对精氨酸激酶结构和功能的影响 | 第57-75页 |
引言 | 第57-58页 |
1 材料与方法 | 第58-61页 |
1.1 试剂与材料 | 第58-59页 |
1.2 实验仪器 | 第59页 |
1.3 实验方法 | 第59-61页 |
2 结果与分析 | 第61-72页 |
2.1 R330K突变体的测序结果比对 | 第61-66页 |
2.2 O-R330K的发现 | 第66-67页 |
2.3 O-R330K分子内二硫键的定位 | 第67页 |
2.4 R330突变对酶活性的影响 | 第67-68页 |
2.5 R330突变对分子构象影响 | 第68-69页 |
2.6 R330突变对分子大小和形状的影响 | 第69-70页 |
2.7 突变体R330K分子结构模建 | 第70-72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
4 小结 | 第74-75页 |
第四章 FK506结合蛋白12对精氨酸激酶折叠的影响 | 第75-97页 |
引言 | 第75-76页 |
1 材料与方法 | 第76-84页 |
1.1 试剂与材料 | 第76-77页 |
1.2 实验仪器 | 第77页 |
1.3 实验方法 | 第77-84页 |
2 结果与分析 | 第84-93页 |
2.1 Wt-hFKBP12的表达与纯化 | 第84页 |
2.2 Wt-hFKBP12蛋白可能存在聚合体的证据 | 第84-86页 |
2.3 pET28b-hFKBP12(His)的构建、表达与纯化 | 第86-89页 |
2.4 hFKBP12(His)与Wt-hFKBP12热稳定性和PPIase活性比较 | 第89-91页 |
2.5 hFKBP12对精氨酸激酶热聚集的影响 | 第91-93页 |
2.6 hFKBP12对盐酸胍变性精氨酸激酶复性过程中聚集的影响 | 第93页 |
3 讨论 | 第93-96页 |
4 小结 | 第96-97页 |
第五章 大分子拥挤试剂对精氨酸激酶折叠的影响 | 第97-109页 |
引言 | 第97-98页 |
1 材料与方法 | 第98-100页 |
1.1 试剂与材料 | 第98页 |
1.2 实验仪器 | 第98页 |
1.3 实验方法 | 第98-100页 |
2 结果与分析 | 第100-106页 |
2.1 精氨酸激酶在缓冲液中的复性动力学过程 | 第100-101页 |
2.2 不同浓度的拥挤试剂对变性AK复性的影响 | 第101-102页 |
2.3 PEG 2000对精氨酸激酶复性动力学过程的影响 | 第102-103页 |
2.4 Dextran70对精氨酸激酶复性动力学过程的影响 | 第103-104页 |
2.5 Ficoll70对精氨酸激酶复性动力学过程的影响 | 第104-106页 |
2.6 精氨酸激酶在不同环境中复性的动力学常数(k) | 第106页 |
3 讨论 | 第106-108页 |
4 小结 | 第108-109页 |
研究总结 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-123页 |
攻博期间发表的论文 | 第123-124页 |
致谢 | 第124-125页 |