| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 概述 | 第12页 |
| 1.2 金刚烷胺概述 | 第12-13页 |
| 1.2.1 金刚烷胺的理化性质 | 第12-13页 |
| 1.2.2 金刚烷胺的危害 | 第13页 |
| 1.3 金刚烷胺国内外使用现状 | 第13-14页 |
| 1.4 金刚烷胺限量标准 | 第14页 |
| 1.5 金刚烷胺残留检测技术 | 第14-16页 |
| 1.5.1 色谱分析技术 | 第14-15页 |
| 1.5.2 其它检测技术 | 第15-16页 |
| 1.6 免疫分析技术 | 第16-19页 |
| 1.6.1 酶联免疫吸附技术研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6.2 免疫层析技术研究进展 | 第18-19页 |
| 1.7 本研究内容及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 金刚烷胺全抗原合成及多克隆抗体的制备 | 第21-30页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.1 主要材料及试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.3.1 金刚烷胺全抗原的合成 | 第22-23页 |
| 2.3.2 金刚烷胺全抗原的鉴定与评价 | 第23页 |
| 2.3.3 动物免疫 | 第23-24页 |
| 2.3.4 间接ELISA监控抗血清效价 | 第24页 |
| 2.3.5 抗血清的纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.6 多克隆抗体的评价 | 第25-26页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第26-29页 |
| 2.4.1 全抗原的鉴定与评价 | 第26-27页 |
| 2.4.2 多克隆抗体免疫应答曲线 | 第27-28页 |
| 2.4.3 多克隆抗体评价 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 酶联免疫吸附定量检测金刚烷胺方法的建立 | 第30-40页 |
| 3.1 前言 | 第30页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第30-31页 |
| 3.2.1 主要材料及试剂 | 第30-31页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.3.1 棋盘滴定 | 第31页 |
| 3.3.2 全抗原包被液的优化 | 第31页 |
| 3.3.3 封闭剂的优化 | 第31-32页 |
| 3.3.4 竞争pH的优化 | 第32页 |
| 3.3.5 竞争时间的优化 | 第32页 |
| 3.3.6 间接竞争ELISA标准曲线 | 第32页 |
| 3.3.7 交叉反应率 | 第32-33页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第33-39页 |
| 3.4.1 全抗原与抗体工作浓度的确定 | 第33-34页 |
| 3.4.2 全抗原包被液对间接竞争ELISA的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.3 封闭剂对间接竞争ELISA的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.4 竞争pH对间接竞争ELISA的影响 | 第36页 |
| 3.4.5 竞争时间对间接竞争的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.6 间接竞争ELISA标准曲线 | 第37-38页 |
| 3.4.7 交叉反应率 | 第38-39页 |
| 3.5 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 胶体金免疫层析技术定量检测金刚烷胺方法的建立 | 第40-53页 |
| 4.1 前言 | 第40-41页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第41页 |
| 4.2.1 主要材料及试剂 | 第41页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第41页 |
| 4.3 实验方法 | 第41-45页 |
| 4.3.1 胶体金探针的制备 | 第41-42页 |
| 4.3.2 胶体金免疫层析试纸条的制备与组装 | 第42页 |
| 4.3.3 胶体金标记抗体pH的优化 | 第42-43页 |
| 4.3.4 胶体金标记抗体量的优化 | 第43页 |
| 4.3.5 T线固定全抗原和C线固定羊抗鼠二抗浓度的优化 | 第43-44页 |
| 4.3.6 胶体金探针用量的优化 | 第44页 |
| 4.3.7 试纸条检测时间的确定 | 第44-45页 |
| 4.3.8 标准曲线的建立 | 第45页 |
| 4.3.9 交叉反应率 | 第45页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第45-52页 |
| 4.4.1 胶体金免疫层析试纸条的制备与组装 | 第45-47页 |
| 4.4.2 胶体金标记抗体pH对试纸条的影响 | 第47页 |
| 4.4.3 胶体金标记抗体量对试纸条的影响 | 第47-48页 |
| 4.4.4 T线全抗原和C线羊抗鼠二抗浓度对试纸条的影响 | 第48-49页 |
| 4.4.5 胶体金探针用量对试纸条的影响 | 第49页 |
| 4.4.6 试纸条检测时间的确定 | 第49-50页 |
| 4.4.7 标准曲线的建立 | 第50-51页 |
| 4.4.8 交叉反应率 | 第51-52页 |
| 4.5 小结 | 第52-53页 |
| 第五章 酶联免疫吸附法与胶体金免疫层析法的比对 | 第53-60页 |
| 5.1 前言 | 第53页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第53-54页 |
| 5.2.1 主要材料及试剂 | 第53-54页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 5.3.1 ELISA与GICT检测能力比对 | 第54页 |
| 5.3.2 ELISA与GICT样本基质实验 | 第54-55页 |
| 5.3.3 ELISA及GICT与UPLC-MS/MS相关性实验 | 第55-56页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第56-59页 |
| 5.4.1 ELISA与GICT检测能力比对分析 | 第56页 |
| 5.4.2 ELISA与GICT实际样本适用性评价 | 第56-57页 |
| 5.4.3 ELISA及GICT与UPLC-MS/MS相关性评价 | 第57-59页 |
| 5.5 小结 | 第59-60页 |
| 第六章 结论与展望 | 第60-63页 |
| 6.1 结论 | 第60-61页 |
| 6.1.1 金刚烷胺全抗原合成及多克隆抗体的制备 | 第60页 |
| 6.1.2 酶联免疫吸附定量检测金刚烷胺方法的建立 | 第60页 |
| 6.1.3 胶体金免疫层析技术定量检测金刚烷胺方法的建立 | 第60-61页 |
| 6.1.4 ELISA与GICT的比对 | 第61页 |
| 6.2 展望 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录1 试剂材料 | 第71-73页 |
| 附录2 试剂配制 | 第73-75页 |
| 附录3 仪器设备 | 第75-76页 |
| 个人介绍 | 第76页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第76页 |
