| 论文创新点 | 第5-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一章 钾离子通道功能概述及血系分化研究进展 | 第17-37页 |
| 1.1 钾离子通道功能概述 | 第17-22页 |
| 1.1.1 钾离子通道的分类与功能 | 第17-18页 |
| 1.1.2 钾离子通道调控细胞增殖与凋亡 | 第18-22页 |
| 1.2 血细胞分化与白血病概述 | 第22-30页 |
| 1.2.1 红系与巨核系分化 | 第23-24页 |
| 1.2.2 单核系与粒系分化 | 第24-26页 |
| 1.2.3 白血病分类与其分化特征 | 第26-28页 |
| 1.2.4 白血病的分化治疗 | 第28-30页 |
| 1.3 作用于钾通道蝎毒素多肽的药理学应用 | 第30-34页 |
| 1.3.1 毒液动物蝎简介 | 第30-31页 |
| 1.3.2 蝎毒液组成成分 | 第31-32页 |
| 1.3.3 蝎毒素多肽的药理学应用 | 第32-34页 |
| 1.4 本论文的出发点 | 第34-37页 |
| 第二章 蝎毒素BmKKx2的表达纯化和功能鉴定 | 第37-51页 |
| 摘要 | 第37页 |
| 2.1 前言 | 第37-39页 |
| 2.2 实验材料和仪器 | 第39-43页 |
| 2.2.1 质粒与菌种 | 第39-40页 |
| 2.2.2 主要试剂和配置 | 第40-42页 |
| 2.2.3 仪器和材料 | 第42页 |
| 2.2.4 互联网信息和软件 | 第42-43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-47页 |
| 2.3.1 蝎毒素多肽BmKKx2的原核表达 | 第43-46页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第46-47页 |
| 2.3.3 电生理实验检测蝎毒素多肽BmKKx2对HERG通道的阻断作用 | 第47页 |
| 2.4 实验结果 | 第47-50页 |
| 2.4.1 重组蝎毒素多肽BmKKx2的表达纯化 | 第47-49页 |
| 2.4.2 蝎毒素BmKKx2对hERG通道电流的阻断作用 | 第49-50页 |
| 2.5 讨论 | 第50-51页 |
| 第三章 蝎毒素BmKKx2阻断K562细胞HERG通道及对细胞增殖的影响 | 第51-69页 |
| 摘要 | 第51页 |
| 3.1 前言 | 第51-53页 |
| 3.2 实验材料和仪器 | 第53-55页 |
| 3.2.1 实验使用的细胞系 | 第53-54页 |
| 3.2.2 主要试剂盒和抗体 | 第54页 |
| 3.2.3 主要试剂和配置 | 第54页 |
| 3.2.4 仪器和材料 | 第54-55页 |
| 3.2.5 互联网信息和软件 | 第55页 |
| 3.3 实验方法 | 第55-61页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第55-56页 |
| 3.3.2 Western Blot检测 | 第56-59页 |
| 3.3.3 膜片钳检测K562细胞的HERG电流 | 第59页 |
| 3.3.4 细胞计数 | 第59-60页 |
| 3.3.5 MTT实验 | 第60页 |
| 3.3.6 流式细胞术检测细胞周期 | 第60-61页 |
| 3.4 实验结果 | 第61-65页 |
| 3.4.1 hERG通道在白血病病人细胞和各白血病细胞系的表达 | 第61-62页 |
| 3.4.2 蝎毒素BmKKx2对K562细胞hERG通道电流的阻断作用 | 第62-63页 |
| 3.4.3 蝎毒素BmKKx2阻断hERG通道对K562细胞增殖的影响 | 第63-65页 |
| 3.5 讨论 | 第65-69页 |
| 第四章 蝎毒素BmKKx2阻断K562细胞hERG通道及对细胞红系分化的影响 | 第69-97页 |
| 摘要 | 第69-70页 |
| 4.1 前言 | 第70-72页 |
| 4.2 实验材料和仪器 | 第72-75页 |
| 4.2.1 细胞系 | 第72页 |
| 4.2.2 质粒 | 第72-73页 |
| 4.2.3 试剂盒和抗体 | 第73-74页 |
| 4.2.4 主要试剂及其配制 | 第74-75页 |
| 4.2.5 仪器设备 | 第75页 |
| 4.2.6 互联网信息和软件 | 第75页 |
| 4.3 实验方法 | 第75-82页 |
| 4.3.1 K562的红系诱导分化 | 第75-76页 |
| 4.3.2 瑞氏-吉姆萨染色 | 第76页 |
| 4.3.3 联苯胺染色 | 第76页 |
| 4.3.4 细胞表面分子的检测 | 第76-77页 |
| 4.3.5 重组慢病毒质粒构建 | 第77-79页 |
| 4.3.6 慢病毒的包装和K562细胞系感染 | 第79-80页 |
| 4.3.7 细胞总RNA的提取 | 第80页 |
| 4.3.8 cDNA一链的反转录 | 第80-81页 |
| 4.3.9 实时定量PCR | 第81-82页 |
| 4.3.10 Western Blot检测 | 第82页 |
| 4.4 实验结果 | 第82-93页 |
| 4.4.1 K562细胞红系分化诱导模型的建立 | 第82-84页 |
| 4.4.2 蝎毒素BmKKx2阻断hERG通道对K562细胞红系分化的影响 | 第84-87页 |
| 4.4.3 蝎毒素BmKKx2对hERG-knockdown K562细胞红系分化的影响 | 第87-90页 |
| 4.4.4 蝎毒素BmKKx2对K562红系分化过程中hERG通道表达量的影响 | 第90-91页 |
| 4.4.5 蝎毒素BmKKx2对K562细胞分化依赖性凋亡的作用 | 第91-92页 |
| 4.4.6 蝎毒素BmKKx2阻断hERG通道对胞内游离钙离子浓度的影响 | 第92-93页 |
| 4.5 讨论 | 第93-97页 |
| 第五章 蝎毒素BmKTX阻断白血病细胞Kvl.3通道及对粒系分化和单核/巨噬分化的影响 | 第97-107页 |
| 摘要 | 第97页 |
| 5.1 前言 | 第97-99页 |
| 5.2 实验材料和仪器 | 第99-100页 |
| 5.2.1 细胞系 | 第99页 |
| 5.2.2 试剂盒和抗体 | 第99页 |
| 5.2.3 主要试剂及其配制 | 第99-100页 |
| 5.2.4 仪器设备 | 第100页 |
| 5.2.5 互联网信息和软件 | 第100页 |
| 5.3 实验方法 | 第100-101页 |
| 5.3.1 HL60的粒系诱导分化 | 第100页 |
| 5.3.2 THP-1的单核/巨噬诱导分化 | 第100-101页 |
| 5.3.3 细胞表面标志物的检测 | 第101页 |
| 5.3.4 Kv1.3 RNA水平的检测 | 第101页 |
| 5.3.5 Kv1.3 western blot检测 | 第101页 |
| 5.4 实验结果 | 第101-104页 |
| 5.4.1 蝎毒素BmKTX阻断Kv1.3通道对HL60粒系分化和THP-1单核/巨噬分化的影响 | 第101-103页 |
| 5.4.2 蝎毒素BmKTX对分化过程中Kv1.3通道表达的影响 | 第103-104页 |
| 5.5 讨论 | 第104-107页 |
| 研究总结与展望 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-119页 |
| 攻博期间发表的论文 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
